【摘要】：表觀遺傳學(xué)是20世紀(jì)80年代逐漸興起的一門學(xué)科,是在研究與經(jīng)典的孟德爾遺傳學(xué)遺傳法則不相符的許多遺傳過程中逐步發(fā)展起來的。表觀遺傳學(xué)是指在基因組的核苷酸序列不發(fā)生改變的情況下,基因表達(dá)的可遺傳變化的一門遺傳學(xué)分支。本論文主要圍繞人源INO80/YY1染色質(zhì)重塑酶復(fù)合物受抑癌基因BCCIP的調(diào)控而展開。BCCIP(BRCA2 and CDKN1A interacting protein)是一個(gè)與乳腺癌易感基因2(breast cancer susceptibility gene 2,BRCA2)和p21(cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,CDKN1A)相互作用的蛋白質(zhì)。在細(xì)胞有絲分裂、細(xì)胞周期調(diào)控、胞質(zhì)分裂、DNA損傷的同源重組修復(fù)、基因組的穩(wěn)定性以及參與基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控等方面起著重要作用。YY1(Yin Yang1)作為GLI-Kruppel家族中的一員,最初被認(rèn)為是一種DNA結(jié)合蛋白質(zhì),隨著研究的深入發(fā)現(xiàn)YY1是人源INO80染色質(zhì)重塑復(fù)合物的一個(gè)特異性亞基,參與調(diào)控多種細(xì)胞進(jìn)程。YY1蛋白上既含有轉(zhuǎn)錄激活區(qū)又含有轉(zhuǎn)錄抑制區(qū),可以廣泛的調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄活性。大量的研究表明,YY1可以通過募集不同的轉(zhuǎn)錄因子到Y(jié)Y1的不同區(qū)域從而調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄的激活或抑制。我們的前期研究發(fā)現(xiàn)BCCIP基因受到INO80/YY1復(fù)合物的調(diào)控,BCCIP為INO80/YY1染色質(zhì)重塑酶復(fù)合物的一個(gè)調(diào)控靶基因。通過對(duì)UCSC Genome Browser數(shù)據(jù)庫中ChIP-Seq數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)在幾種人的癌細(xì)胞系中YY1可以募集到BCCIP轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)。但是BCCIP對(duì)YY1蛋白的穩(wěn)定性作用是否會(huì)影響YY1在BCCIP啟動(dòng)子區(qū)域的募集尚不清楚。在人結(jié)腸癌細(xì)胞系中,我們的研究數(shù)據(jù)表明轉(zhuǎn)錄因子YY1調(diào)控BCCIP基因轉(zhuǎn)錄,而BCCIP蛋白又對(duì)YY1蛋白起著穩(wěn)定作用,因此可以推斷存在一個(gè)YY1-BCCIP-YY1的正反饋調(diào)節(jié)環(huán)。在細(xì)胞結(jié)腸癌細(xì)胞中,過表達(dá)BCCIP,可以提高YY1蛋白表達(dá)水平,敲低BCCIP則可以降低YY1的蛋白表達(dá)水平。此外,通過免疫共沉淀的方法證實(shí)了BCCIP和YY1蛋白可以直接結(jié)合,其結(jié)合的區(qū)域?yàn)锽CCIP的N-端酸性結(jié)構(gòu)域和中間保守結(jié)構(gòu)域與YY1/146-270aa區(qū)域。進(jìn)一步,YY1蛋白的穩(wěn)定性與BCCIP蛋白中間保守結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)的YY1的泛素化途徑有關(guān)。BCCIP基因的啟動(dòng)子區(qū)域包含了轉(zhuǎn)錄因子YY1的特異結(jié)合位點(diǎn)(CCGCCATC),在熒光素報(bào)告實(shí)驗(yàn)中,該結(jié)合位點(diǎn)可以影響pGL4-BCCIP-Luc熒光素酶的轉(zhuǎn)錄活性。在慢病毒介導(dǎo)的BCCIP敲低細(xì)胞系中,進(jìn)行ChIP實(shí)驗(yàn),我們發(fā)現(xiàn),由于YY1蛋白的穩(wěn)定性降低,從而使其在BCCIP基因啟動(dòng)子區(qū)域近端的募集峰降低,并且這種降低無法通過過表達(dá)YY1恢復(fù)。此外,在敲低YY1時(shí),抑制了BCCIP蛋白本身在其基因啟動(dòng)子區(qū)域近端的募集,以上研究表明,YY1轉(zhuǎn)錄因子在對(duì)BCCIP基因轉(zhuǎn)錄時(shí)可以通過BCCIP蛋白本身以YY1轉(zhuǎn)錄因子依賴的方式進(jìn)行調(diào)節(jié)。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R394

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 隋毅;人源BCCIP對(duì)YY1蛋白穩(wěn)定性作用及其對(duì)BCCIP基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制[D];吉林大學(xué);2019年

，

本文編號(hào)：2620998