【摘要】：表觀遺傳學是20世紀80年代逐漸興起的一門學科,是在研究與經(jīng)典的孟德爾遺傳學遺傳法則不相符的許多遺傳過程中逐步發(fā)展起來的。表觀遺傳學是指在基因組的核苷酸序列不發(fā)生改變的情況下,基因表達的可遺傳變化的一門遺傳學分支。本論文主要圍繞人源INO80/YY1染色質(zhì)重塑酶復合物受抑癌基因BCCIP的調(diào)控而展開。BCCIP(BRCA2 and CDKN1A interacting protein)是一個與乳腺癌易感基因2(breast cancer susceptibility gene 2,BRCA2)和p21(cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,CDKN1A)相互作用的蛋白質(zhì)。在細胞有絲分裂、細胞周期調(diào)控、胞質(zhì)分裂、DNA損傷的同源重組修復、基因組的穩(wěn)定性以及參與基因轉錄調(diào)控等方面起著重要作用。YY1(Yin Yang1)作為GLI-Kruppel家族中的一員,最初被認為是一種DNA結合蛋白質(zhì),隨著研究的深入發(fā)現(xiàn)YY1是人源INO80染色質(zhì)重塑復合物的一個特異性亞基,參與調(diào)控多種細胞進程。YY1蛋白上既含有轉錄激活區(qū)又含有轉錄抑制區(qū),可以廣泛的調(diào)節(jié)基因的轉錄活性。大量的研究表明,YY1可以通過募集不同的轉錄因子到YY1的不同區(qū)域從而調(diào)節(jié)基因轉錄的激活或抑制。我們的前期研究發(fā)現(xiàn)BCCIP基因受到INO80/YY1復合物的調(diào)控,BCCIP為INO80/YY1染色質(zhì)重塑酶復合物的一個調(diào)控靶基因。通過對UCSC Genome Browser數(shù)據(jù)庫中ChIP-Seq數(shù)據(jù)進行分析,發(fā)現(xiàn)在幾種人的癌細胞系中YY1可以募集到BCCIP轉錄起始位點。但是BCCIP對YY1蛋白的穩(wěn)定性作用是否會影響YY1在BCCIP啟動子區(qū)域的募集尚不清楚。在人結腸癌細胞系中,我們的研究數(shù)據(jù)表明轉錄因子YY1調(diào)控BCCIP基因轉錄,而BCCIP蛋白又對YY1蛋白起著穩(wěn)定作用,因此可以推斷存在一個YY1-BCCIP-YY1的正反饋調(diào)節(jié)環(huán)。在細胞結腸癌細胞中,過表達BCCIP,可以提高YY1蛋白表達水平,敲低BCCIP則可以降低YY1的蛋白表達水平。此外,通過免疫共沉淀的方法證實了BCCIP和YY1蛋白可以直接結合,其結合的區(qū)域為BCCIP的N-端酸性結構域和中間保守結構域與YY1/146-270aa區(qū)域。進一步,YY1蛋白的穩(wěn)定性與BCCIP蛋白中間保守結構域介導的YY1的泛素化途徑有關。BCCIP基因的啟動子區(qū)域包含了轉錄因子YY1的特異結合位點(CCGCCATC),在熒光素報告實驗中,該結合位點可以影響pGL4-BCCIP-Luc熒光素酶的轉錄活性。在慢病毒介導的BCCIP敲低細胞系中,進行ChIP實驗,我們發(fā)現(xiàn),由于YY1蛋白的穩(wěn)定性降低,從而使其在BCCIP基因啟動子區(qū)域近端的募集峰降低,并且這種降低無法通過過表達YY1恢復。此外,在敲低YY1時,抑制了BCCIP蛋白本身在其基因啟動子區(qū)域近端的募集,以上研究表明,YY1轉錄因子在對BCCIP基因轉錄時可以通過BCCIP蛋白本身以YY1轉錄因子依賴的方式進行調(diào)節(jié)。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R394

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相關博士學位論文 前1條

1 隋毅;人源BCCIP對YY1蛋白穩(wěn)定性作用及其對BCCIP基因的轉錄調(diào)控機制[D];吉林大學;2019年

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本文編號：2620998