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建立一種survivin抗原肽誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞優(yōu)勢取用TCR Vβ基因的方法

發(fā)布時(shí)間:2020-03-29 18:34
【摘要】:目的:探討survivin抗原肽體外誘導(dǎo)健康人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)后T淋巴細(xì)胞活化情況及TCRVβ表達(dá)譜變化。方法:分離健康人PBMC經(jīng)rhIL-4、rhGM-CSF誘導(dǎo)DCs,將成熟DCs分為陰性組(不負(fù)載肽)、未洗脫負(fù)載組(負(fù)載survivin肽)、洗脫負(fù)載組(經(jīng)酸液洗脫并多聚甲醛固定后負(fù)載survivin肽),分別與自體淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)誘導(dǎo)抗原特異性T淋巴細(xì)胞。分別于24小時(shí)、48小時(shí)、96小時(shí)和7天以Elisa法檢測誘導(dǎo)后T淋巴細(xì)胞中IFN-γ的分泌,并于第7天通過流式細(xì)胞儀分析TCRVβ表達(dá)譜。結(jié)果:隨著時(shí)間延長兩實(shí)驗(yàn)組IFN-γ的分泌比陰性組顯著增高,且洗脫負(fù)載組增加更為顯著。流式細(xì)胞儀分析結(jié)果顯示洗脫負(fù)載組相比于陰性組及未洗脫負(fù)載組引起TCR Vβ表達(dá)譜的改變更為明顯,其中TCR亞家族Vβ7.2、Vβ12、Vβ14、Vβ16、Vβ20、Vβ22最為顯著。結(jié)論:DCs經(jīng)酸液洗脫表面多肽并固定的方法更能有效地誘導(dǎo)TCRVβ亞家族優(yōu)勢取用。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2606356

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