【摘要】：骨形態(tài)發(fā)生蛋白9是高效誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞骨向分化的因子之一,其臨床應(yīng)用前景廣闊。課題組前期研究表明,Wnt11對BMP9誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞的骨向分化有促進(jìn)作用,但具體機(jī)制不詳。據(jù)報道,TGF-β1參與調(diào)節(jié)Wnt11促進(jìn)MSCs軟骨細(xì)胞分化;但在BMP9誘導(dǎo)干細(xì)胞骨向分化中,Wnt11與TGF-β1的關(guān)系尚不清楚。本研究主要目的是探究Wnt11及TGF-β1與BMP9誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞骨向分化的關(guān)系及其可能機(jī)制。本實驗采用組織化學(xué)染色、Western blot、RT-PCR、茜素紅染色、小鼠異位成骨和μ-CT分析等實驗方法。首先,明確Wnt11對BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞骨向分化的影響,及可能的調(diào)節(jié)機(jī)制;然后,分析BMP9誘導(dǎo)干細(xì)胞骨向分化中,Wnt11對TGF-β1的影響;最后,探討TGF-β1對BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞骨向分化的影響及可能機(jī)制。結(jié)果顯示,外源性過表達(dá)Wnt11促進(jìn)BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞骨向分化,并增加p38 MAPK磷酸化(p-p38 MAPK)水平;在BMP9誘導(dǎo)MSCs骨向分化中,Wnt11能促進(jìn)TGF-β1表達(dá);BMP9在誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞骨向分化中也能促進(jìn)TGF-β1表達(dá)上調(diào),過表達(dá)TGF-β1能增強(qiáng)BMP9對骨向分化標(biāo)志物的誘導(dǎo)作用;外源性過表達(dá)TGF-β1增加Smad2/3的磷酸化水平,并同時增加p-p38 MAPK水平;抑制p38 MAPK明顯減弱TGF-β1對BMP9誘導(dǎo)MSCs骨向分化的促進(jìn)作用。結(jié)果提示,TGF-β1可能參與Wnt11對BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞骨向分化的促進(jìn)作用,機(jī)制可能與促進(jìn)p38 MAPK磷酸化有關(guān)。
【圖文】：

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文t11 對 BMP9 誘導(dǎo) C3H10T1/2 細(xì)胞骨向分化的影響酸酶染色結(jié)果顯示，外源性過表達(dá) Wnt11 能明顯增強(qiáng) 2 細(xì)胞的 ALP 活性（圖 1.1）。Western blot 結(jié)果顯示，外源性過 BMP9 對 Runx2 和 OPN 蛋白水平的促進(jìn)作用（圖 1.2 和 1 對 BMP9 誘導(dǎo) C3H10T1/2 細(xì)胞骨向分化有促進(jìn)作用，但具體

Wnt11 對 BMP9 誘導(dǎo) C3H10T1/2 細(xì)胞骨向分化有促進(jìn)作用，，但具體機(jī)制不詳圖 1.1 Wnt11 對 BMP9 在 C3H10T1/2 細(xì)胞中誘導(dǎo) ALP 活性的影響（n=3）Fig 1.1 Effects of Wnt11 on BMP9-induced ALP activity in C3H10T1/2 cells（n=3）
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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1 郭宏亮;鄭紀(jì)偉;韓建國;王鵬來;張磊;;轉(zhuǎn)化生長因子β_1對種植體表面成骨細(xì)胞I型膠原蛋白基因表達(dá)研究[J];交通醫(yī)學(xué);2013年05期

2 趙玉明;葛立宏;A E Grigoriadis;;轉(zhuǎn)化生長因子β對體外破骨細(xì)胞分化的影響[J];實用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2006年01期

本文編號：2604594