【摘要】：金格桿菌是一種需氧兼性厭氧的革蘭氏陰性菌,常引起6-36月齡兒童感染性關(guān)節(jié)炎、骨髓炎和菌血癥。最近的研究表明,金格桿菌表面存在一種莢膜多糖,它是由N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)和3-脫氧-D-甘露-2-辛酮糖酸(Kdo)以β糖苷鍵連接的二糖重復(fù)單元組成,結(jié)構(gòu)為→3)-β-GalpNAc-(1 →5)-β-Kdop-(2→。合成該二糖重復(fù)單元,并研究其免疫活性,對于發(fā)展金格桿菌疫苗具有重要的意義。由于該二糖重復(fù)單元中的Kdo砌塊的構(gòu)建較為困難,糖苷化反應(yīng)的活性也比較差,其5-OH活性較低,所以構(gòu)建這個(gè)重復(fù)單元具有較高的挑戰(zhàn)性。本文中,我們采用Cornforth法合成Kdo單糖中間體,然后與鄰炔基苯甲酸縮合得到Kdo鄰炔基苯甲酸酯給體。再在金催化下使用Kdo鄰炔基苯甲酸酯給體與Linker反應(yīng)立體選擇性合成β-Kdo。之后,將其與半乳糖胺硫苷、三氟乙酰亞胺酯和鄰炔基苯甲酸酯給體發(fā)生糖苷化反應(yīng),篩選得到最佳反應(yīng)條件,以高收率和較好的立體選擇性得到了 β-連接的半乳糖胺-Kdo二糖結(jié)構(gòu),首次實(shí)現(xiàn)了Kdo與氨基糖之間挑戰(zhàn)性的β-(1→5)糖苷鍵的連接。正交保護(hù)的的β-GalNAc-(1→5)-β-Kdo二糖經(jīng)脫保護(hù)后形成末端具有C5連接臂的抗原,該抗原可被進(jìn)一步連接到載體蛋白和芯片表面,進(jìn)行相關(guān)免疫活性測試,評價(jià)其作為糖類疫苗的潛力。
【圖文】：

Ｆｉｇ．邋１．２邋Ｔｈｅ邋ｍａｉｎ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ邋ｏｆ邋ｂａｃｔｅｒｉａｌ邋ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ逡逑３－脫氧－Ｄ－甘露－２－辛酮糖酸（３－ｄｅｏｘｙ－Ｄ－ｍａｎｎｏ－ｏｃｔ－２－ｕｌｏｓｏｎｉｃ邋ａｃｉｄ，又稱邋ｋｅｔｏ－ｄｅｏｘｙ－逡逑ｏｃｔｏｓｏｎｉｃａｃｉｄ，簡稱Ｋｄｏ，見圖１．３邋），是一種非哺乳動(dòng)物源的高碳糖，普遍存在于不逡逑同微生物的細(xì)胞壁中［３３］。Ｋｄｏ是所有己知的革蘭氏陰性菌脂多糖（ＬＰＳ）核心結(jié)構(gòu)中唯逡逑一的保守結(jié)構(gòu)（少數(shù)情況下是以其衍生物Ｋｏ的形式存在）［３２］。許多細(xì)菌的莢膜多糖逡逑（ＣＰＳ）和胞外多糖（ＥＰＳ）中也含有Ｋｄｏ。例如，腦膜炎奈瑟菌２９ｅ莢膜多糖的重復(fù)逡逑單元由Ｄ—半乳糖胺和Ｋｄｏ殘基交替組成［３４］，大腸桿菌Ｋ１２的莢膜多糖含有鼠李糖和逡逑Ｋｄｏ殘基［３５］。此外，，某些植物和綠藻中也存在Ｋｄｏ，對于植物花粉管的生長和延伸［３６］、逡逑扁藻細(xì)胞外膜ｔｈｅｃａ的合成具有重要意義［３７］。逡逑Ｈ0邋0Ｈ邐ＨＯ邐ＨＯ逡逑ＨＯ0邐Ｈ0Ｘ／Ｘｘ＾＿＿＾邋ＣＯＯＨ邐ＨＱＶ＾ＡＸ邐ＣＯＯＨ逡逑ＨＯ＾＾＾ｙ＾ＣＯＯＨ邐Ｈ0５ｄＺ＾＾／＂0Ｈ逡逑｜邐ＨＯ邐ＨＯ逡逑Ａ邋0Ｈ邐Ｂ邐Ｃ逡逑Ｈ0邐0Ｈ逡逑Ｃ00Ｈ邐／邋ｎ邐ＣＯＯＨ逡逑ＨＯ邐，邋Ｉ邋ＯＨ逡逑Ｄ邐Ｒ邋ＨＮ邋Ｅ逡逑（Ａ）邐２－ｋｅｔｏ－３－ｄｅｏｘｙ－Ｄ－ｍａｎｎｏ－ｏｃｔｕｌｏｓｏｎｉｃ邋ａｃｉｄ邋（Ｋｄｏ），逡逑（Ｂ）邐Ｎｅｕｒａｍｉｎｉｃ邋ａｃｉｄ邋（Ｎｅｕ

邐Ｏｕｔｅｒ邋Ｃｏｒｅ邐Ｉｎｎｅｒ邋ＣｏｆＢ逡逑圖１．２細(xì)菌脂多糖的主要結(jié)構(gòu)逡逑Ｆｉｇ．邋１．２邋Ｔｈｅ邋ｍａｉｎ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ邋ｏｆ邋ｂａｃｔｅｒｉａｌ邋ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ逡逑３－脫氧－Ｄ－甘露－２－辛酮糖酸（３－ｄｅｏｘｙ－Ｄ－ｍａｎｎｏ－ｏｃｔ－２－ｕｌｏｓｏｎｉｃ邋ａｃｉｄ，又稱邋ｋｅｔｏ－ｄｅｏｘｙ－逡逑ｏｃｔｏｓｏｎｉｃａｃｉｄ，簡稱Ｋｄｏ，見圖１．３邋），是一種非哺乳動(dòng)物源的高碳糖，普遍存在于不逡逑同微生物的細(xì)胞壁中［３３］。Ｋｄｏ是所有己知的革蘭氏陰性菌脂多糖（ＬＰＳ）核心結(jié)構(gòu)中唯逡逑一的保守結(jié)構(gòu)（少數(shù)情況下是以其衍生物Ｋｏ的形式存在）［３２］。許多細(xì)菌的莢膜多糖逡逑（ＣＰＳ）和胞外多糖（ＥＰＳ）中也含有Ｋｄｏ。例如，腦膜炎奈瑟菌２９ｅ莢膜多糖的重復(fù)逡逑單元由Ｄ—半乳糖胺和Ｋｄｏ殘基交替組成［３４］，大腸桿菌Ｋ１２的莢膜多糖含有鼠李糖和逡逑Ｋｄｏ殘基［３５］。此外，某些植物和綠藻中也存在Ｋｄｏ，對于植物花粉管的生長和延伸［３６］、逡逑扁藻細(xì)胞外膜ｔｈｅｃａ的合成具有重要意義［３７］。逡逑Ｈ0邋0Ｈ邐ＨＯ邐ＨＯ逡逑ＨＯ0邐Ｈ0Ｘ／Ｘｘ＾＿＿＾邋ＣＯＯＨ邐ＨＱＶ＾ＡＸ邐ＣＯＯＨ逡逑ＨＯ＾＾＾ｙ＾ＣＯＯＨ邐Ｈ0５ｄＺ＾＾／＂0Ｈ逡逑｜邐ＨＯ邐ＨＯ逡逑Ａ邋0Ｈ邐Ｂ邐Ｃ逡逑Ｈ0邐0Ｈ逡逑Ｃ00Ｈ邐／邋ｎ邐ＣＯＯＨ逡逑ＨＯ邐，邋Ｉ邋ＯＨ逡逑Ｄ邐Ｒ邋ＨＮ邋Ｅ逡逑（Ａ）邐２－ｋｅｔｏ－３－ｄｅｏｘｙ－Ｄ－ｍａｎｎｏ－ｏｃｔｕｌｏｓｏｎｉｃ邋ａｃｉｄ邋（Ｋｄｏ），逡逑（Ｂ）邐Ｎｅｕｒａｍｉｎｉｃ邋ａｃｉｄ邋（Ｎｅｕ
【學(xué)位授予單位】：華東理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R392

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本文編號：2603869