氧氟沙星膠體金免疫層析試紙條的研制
發(fā)布時間:2020-02-01 11:16
【摘要】:氧氟沙星是最廣泛使用的氟喹諾酮類藥物之一,用于治療人和動物不同病因的感染,是最有前景的抗菌化療劑。氟喹諾酮可以通過抑制DNA回旋酶或拓撲異構(gòu)酶II,從而抑制革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細菌。氧氟沙星在獸醫(yī)學中的廣泛使用使其通過動物源食物進入食物鏈,并對環(huán)境和人類健康帶來重大風險。氧氟沙星的大量攝取可導(dǎo)致微生物形成抗性并引起病理狀態(tài),例如菌群失調(diào),過敏反應(yīng),抑制一些酶的活性等。免疫層析試紙條(ICG)由于靈敏度高、簡單、成本低、無需過多專業(yè)技能來操作,總體上比其它傳統(tǒng)方法更經(jīng)濟,時間短,現(xiàn)在的應(yīng)用已越來越普遍。ICG制備過程中影響重現(xiàn)性因素較多,需要詳細研究考察。本研究以氧氟沙星為研究對象,膠體金作為標記物來標記氧氟沙星單克隆抗體,根據(jù)競爭抑制免疫層析原理研制出氧氟沙星膠體金ICG并對其進行包括膠體金與抗體結(jié)合的最佳條件、硝酸纖維素膜的型號、包被原稀釋液、包被原稀釋倍數(shù)、金標抗體復(fù)溶倍數(shù)、硝酸纖維素膜封閉液的選擇、金標墊處理液的選擇在內(nèi)的各參數(shù)系統(tǒng)優(yōu)化。在實驗中,優(yōu)化了檢測氧氟沙星殘留的膠體金免疫層析試紙條的工作條件。確定膠體金與抗體結(jié)合的最佳pH為9,最佳抗體量為18 μL;硝酸纖維素膜型號為Millipore HF135s;包被原稀釋液為PB,金標墊處理液為PBST,方法檢測限為10 ng/mL,牛奶樣品的檢測限為60 ng/mL。
【學位授予單位】:天津科技大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R392-33
本文編號:2575376
【學位授予單位】:天津科技大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R392-33
【參考文獻】
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1 崔希;熊齊榮;熊勇華;山珊;賴衛(wèi)華;;免疫磁分離結(jié)合膠體金免疫層析法快速檢測大腸桿菌O157∶H7[J];分析化學;2013年12期
2 張澤英;袁宗輝;;獸藥人工抗原合成的研究進展[J];中國獸藥雜志;2006年05期
,本文編號:2575376
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