【摘要】：目的:觀察溫敏型水凝膠加載基質(zhì)細胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)的體內(nèi)外釋放性能及對造血組織的影響。方法:(1)體外釋放:用殼聚糖/明膠/甘油磷酸鈉(chitosan-gelatin-glycerol phosphate,CS/G/GP)加載經(jīng)125I標(biāo)記的SDF-1并通過γ探測儀測量其體外釋放率。(2)體內(nèi)釋放:注射該緩釋系統(tǒng)到18只SD大鼠股骨干中,在第1~6天(每天3只)收集注射側(cè)股骨頭、股骨干、周圍肌肉組織及對側(cè)股骨頭,測量其釋放量。(3)骨髓造血:將10只SD大鼠隨機分為2組,實驗組注射0.1 ml CS/G/GP加載SDF-1入5只大鼠股骨干,對照組注射0.1 ml CS/G/GP入5只SD大鼠股骨干中。在第7天處死10只大鼠收集注射側(cè)股骨頭行活檢,觀察造血活躍程度。結(jié)果:根據(jù)γ探測儀測量值獲得該緩釋系統(tǒng)加載SDF-1的體外及骨髓內(nèi)釋放曲線。實驗組骨髓造血活躍程度明顯高于對照組,兩組間造血面積差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:加載SDF-1的可注射溫敏型水凝膠第2~5天在股骨頭局部維持穩(wěn)定濃度且活躍骨髓造血組織。
【圖文】：

重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報2013年第38卷第7期（JournalofChongqingMedicalUniversity2013.Vol.38No.7）圖2CS/G/GP水凝膠加載125I標(biāo)記的SDF-1在SD-大鼠骨髓內(nèi)的釋放曲線Fig.2InvivoreleasecurveofCS/G/GPhydrogelcontaining125IlabeledSDF-1義。本文采用的殼聚糖/明膠/甘油磷酸鈉（chitosan-gelatin-glycerolphosphate，CS/G/GP）體系具有良好的生物相容性及可降解性，在室溫下呈液體，pH7.4左右當(dāng)溫度升至37°C左右時發(fā)生凝膠化作用，加入1%明膠可縮短其凝膠化時間并增大其儲能模量[6]。本文將采用此緩釋系統(tǒng)加載SDF-1并觀察其體外、骨髓內(nèi)的釋放情況及其對造血組織的影響。1材料及方法1.1主要材料及儀器殼聚糖（脫乙酰度90%，北京索萊寶科技有限公司），甘油磷酸鈉（美國sigma公司），明膠（北京索萊寶科技有限公司），SDF-1（美國sigma公司），PD-10脫鹽柱（美國GEHea-lthcare公司），Na125I（成都中核高通同位素公司，18.2GBq/ml），GC-911γ放射免疫計數(shù)器（安徽科大創(chuàng)新公司），恒溫水浴箱（上海躍進公司），電子pH計（上海雷磁公司），高壓蒸汽滅菌箱（上海申安醫(yī)療器械廠）。1.2水凝膠的制備將2.5%的殼聚糖與1%的明膠融入0.1mol/L的乙酸溶液中經(jīng)高壓蒸汽滅菌（121℃，15min），，后將44.4%的甘油磷酸鈉經(jīng)0.2μm的過濾器過濾消毒后逐滴加入殼聚糖/明膠溶液中，并不斷攪拌直至pH7.4左右，將CS/G/GP溶液放于4℃中儲存?zhèn)溆肹6]。1.3125I標(biāo)記SDF-1利用傳統(tǒng)的氯胺-T法標(biāo)記[7]。首先，將5μlNa125I加入200μlSDF-1（0.1mg/ml）溶液中。然后將溶于0.5mol/L磷酸緩沖液（pH7.5）的0.2mg/ml的氯胺-T溶液100μl加入上述混合液中。室溫下攪動2min，然后將100μl含0.4mg?

醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)圖像處理系統(tǒng)（骨髓活檢）觀察造血活躍程度。1.7數(shù)據(jù)處理實驗數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗。檢驗水準(zhǔn)α=0.05。2結(jié)果2.1體外釋放通過繪制SDF-1的體外釋放曲線（圖1），可見SDF-1在初期釋放較快，在第3天累計釋放已達到47%，而后釋放逐漸緩慢，第7天時達62%。2.2骨髓內(nèi)釋放通過繪制SDF-1體內(nèi)釋放曲線（圖2），可見SDF-1初期釋放迅速，第2天就累計釋放達53%，第6天時達80%，體內(nèi)釋放較體外釋放更迅速，這可能因體內(nèi)相關(guān)酶對水凝膠的降解所致。圖1CS/G/GP水凝膠加載125I標(biāo)記的SDF-1的體外釋放曲線Fig.1InvitroreleasecurveofCS/G/GPhydrogelcontaining125IlabeledSDF-1累積釋放百分比（%）100.0080.0060.0040.0020.000.00時間（d）12345631.5553.5764.9071.0375.6580.01時間（d）70.0060.0050.0040.0030.0020.0010.000.00累積釋放百分比（%）9.6835.2247.5453.5757.4860.6062.4765.1312345678—743—

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本文編號：2573175