【摘要】：目的:預(yù)測并篩選鑒定狂犬病毒糖蛋白及核蛋白BALB/c小鼠MHC限制性CTL和Th表位。方法:從NCBI數(shù)據(jù)庫中獲取狂犬病毒糖蛋白及核蛋白的完整氨基酸序列,然后運(yùn)用生物信息學(xué)軟件BIMAS、SYFPEITHI和RANKPEP對CTL表位及Th表位進(jìn)行預(yù)測并合成相關(guān)抗原表位。BALB/c小鼠經(jīng)狂犬疫苗免疫后,通過淋巴細(xì)胞增殖實驗對預(yù)測的多肽進(jìn)行初步篩選。初步篩選的多肽再利用ELISPOT和流式細(xì)胞法進(jìn)行進(jìn)一步篩選,檢測指標(biāo)主要包括細(xì)胞因子IFN-γ和IL-4的分泌水平以及多肽對CD3+CD4+/CD3+CD8+T細(xì)胞亞群的影響情況。結(jié)果:經(jīng)軟件預(yù)測獲得8條可能的CTL與Th表位,多肽合成后經(jīng)分析各條多肽純度大于90%。實驗驗證后證明2條多肽G367-381及G333-341能夠成為細(xì)胞表位,其中G367-381作為Th表位,G333-341作為CTL表位。結(jié)論:G367-381及G333-341是狂犬病毒的細(xì)胞表位,可用于未來狂犬病毒表位疫苗的研究。
[Abstract]:......
【作者單位】： 復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院分子免疫實驗室
【基金】：“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(2009ZX09203-701) “艾滋病和病毒性肝炎等重大傳染病防治”國家科技重大專項(2012ZX10002006-002-003) 國家自然基金(30901315)資助
【分類號】：R392

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本文編號：2473869