【摘要】：NPCEDRG基因是一個鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)相關基因.NPCEDRG基因啟動子為TATA-less啟動子,其核心啟動子區(qū)域位于-146～-8 bp區(qū),該區(qū)域包含NFY、STAT1和cMYB等轉錄因子結合位點.前期研究結果提示,轉錄因子NFY可能參與NPCEDRG基因的轉錄調控.為明確NFY轉錄因子在NPCEDRG基因轉錄中的作用,本研究應用報告基因載體系統(tǒng)分析方法對NPCEDRG基因核心啟動子區(qū)進行NFY結合位點(或CCAAT-box)缺失突變及其功能分析,分別構建NPCEDRG基因核心啟動子區(qū)NFY結合位點缺失突變的Luc和EGFP報告基因表達載體.比較核心啟動子和NFY結合位點缺失突變體報告基因載體的轉錄活性和效率.結果表明,在MCF7和CNE2細胞中,NFY結合位點缺失突變體的轉錄活性分別約為其核心啟動子轉錄活性66.94%和75.72%,即NFY結合位點缺失致使該啟動子轉錄效率在MCF7和CNE2細胞中分別降低了33.06%和24.28%;EGFP報告基因表達載體系統(tǒng)研究結果與Luc報告基因載體系統(tǒng)結果基本吻合.本研究再次證實,轉錄因子NFY通過結合NPCEDRG基因啟動子的核心元件NFY結合位點參與NPCEDRG基因的轉錄調控,并提高其基因轉錄活性和效率.
[Abstract]:NPCEDRG gene is a nasopharyngeal carcinoma (nasopharyngeal carcinoma,NPC) related gene, NPCEDRG gene promoter is TATA-less promoter, its core promoter region is located in -146 bp region, which contains transcription factor binding sites such as NFY,STAT1 and cMYB. Previous studies suggest that transcription factor NFY may be involved in the transcriptional regulation of NPCEDRG gene. In order to clarify the role of NFY transcription factors in the transcription of NPCEDRG gene, the deletion mutation of NFY binding site (or CCAAT-box) and its function in the core promoter region of NPCEDRG gene were analyzed by the method of reporter gene vector system analysis. Luc and EGFP reporter gene expression vectors with deletion mutation of NFY binding site in core promoter of NPCEDRG gene were constructed. To compare the transcriptional activity and efficiency of core promoter and NFY binding site deletion mutants. The results showed that the transcriptional activities of NFY binding site deletion mutants in MCF7 and CNE2 cells were 66.94% and 75.72%, respectively. The loss of NFY binding site resulted in a reduction of transcription efficiency of the promoter by 33.06% and 24.28% in MCF7 and CNE2 cells, respectively. The results of EGFP reporter gene expression vector system were consistent with those of Luc reporter gene vector system. This study confirmed that transcription factor NFY participates in the transcriptional regulation of NPCEDRG gene by binding to the NFY binding site of the core component of the promoter of the NPCEDRG gene and enhances its transcriptional activity and efficiency.
【作者單位】： 湖南師范大學醫(yī)學院生物化學與分子生物學教研室;中南大學湘雅醫(yī)院衛(wèi)生部腫瘤蛋白質組學重點實驗室;
【基金】：湖南省自然科學基金項目(No.13JJ3059) 湖南師范大學博士啟動基金(No.130618)~~
【分類號】：R341

【參考文獻】

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本文編號：2386511