【摘要】：NPCEDRG基因是一個鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)相關(guān)基因.NPCEDRG基因啟動子為TATA-less啟動子,其核心啟動子區(qū)域位于-146～-8 bp區(qū),該區(qū)域包含NFY、STAT1和cMYB等轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點.前期研究結(jié)果提示,轉(zhuǎn)錄因子NFY可能參與NPCEDRG基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控.為明確NFY轉(zhuǎn)錄因子在NPCEDRG基因轉(zhuǎn)錄中的作用,本研究應(yīng)用報告基因載體系統(tǒng)分析方法對NPCEDRG基因核心啟動子區(qū)進(jìn)行NFY結(jié)合位點(或CCAAT-box)缺失突變及其功能分析,分別構(gòu)建NPCEDRG基因核心啟動子區(qū)NFY結(jié)合位點缺失突變的Luc和EGFP報告基因表達(dá)載體.比較核心啟動子和NFY結(jié)合位點缺失突變體報告基因載體的轉(zhuǎn)錄活性和效率.結(jié)果表明,在MCF7和CNE2細(xì)胞中,NFY結(jié)合位點缺失突變體的轉(zhuǎn)錄活性分別約為其核心啟動子轉(zhuǎn)錄活性66.94%和75.72%,即NFY結(jié)合位點缺失致使該啟動子轉(zhuǎn)錄效率在MCF7和CNE2細(xì)胞中分別降低了33.06%和24.28%;EGFP報告基因表達(dá)載體系統(tǒng)研究結(jié)果與Luc報告基因載體系統(tǒng)結(jié)果基本吻合.本研究再次證實,轉(zhuǎn)錄因子NFY通過結(jié)合NPCEDRG基因啟動子的核心元件NFY結(jié)合位點參與NPCEDRG基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控,并提高其基因轉(zhuǎn)錄活性和效率.
[Abstract]:NPCEDRG gene is a nasopharyngeal carcinoma (nasopharyngeal carcinoma,NPC) related gene, NPCEDRG gene promoter is TATA-less promoter, its core promoter region is located in -146 bp region, which contains transcription factor binding sites such as NFY,STAT1 and cMYB. Previous studies suggest that transcription factor NFY may be involved in the transcriptional regulation of NPCEDRG gene. In order to clarify the role of NFY transcription factors in the transcription of NPCEDRG gene, the deletion mutation of NFY binding site (or CCAAT-box) and its function in the core promoter region of NPCEDRG gene were analyzed by the method of reporter gene vector system analysis. Luc and EGFP reporter gene expression vectors with deletion mutation of NFY binding site in core promoter of NPCEDRG gene were constructed. To compare the transcriptional activity and efficiency of core promoter and NFY binding site deletion mutants. The results showed that the transcriptional activities of NFY binding site deletion mutants in MCF7 and CNE2 cells were 66.94% and 75.72%, respectively. The loss of NFY binding site resulted in a reduction of transcription efficiency of the promoter by 33.06% and 24.28% in MCF7 and CNE2 cells, respectively. The results of EGFP reporter gene expression vector system were consistent with those of Luc reporter gene vector system. This study confirmed that transcription factor NFY participates in the transcriptional regulation of NPCEDRG gene by binding to the NFY binding site of the core component of the promoter of the NPCEDRG gene and enhances its transcriptional activity and efficiency.
【作者單位】： 湖南師范大學(xué)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;中南大學(xué)湘雅醫(yī)院衛(wèi)生部腫瘤蛋白質(zhì)組學(xué)重點實驗室;
【基金】：湖南省自然科學(xué)基金項目(No.13JJ3059) 湖南師范大學(xué)博士啟動基金(No.130618)~~
【分類號】：R341

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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5 彭R，

本文編號：2386511