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交通相關(guān)PM2.5通過鈣信號通路調(diào)控Jurkat T細(xì)胞IL-2的釋放

發(fā)布時間:2018-12-14 03:04
【摘要】:目的探討交通相關(guān)PM2.5對Jurkat T細(xì)胞白介素-2(IL-2)的影響及鈣信號通路對IL-2釋放的調(diào)控作用。方法以100μg/ml的PM2.5染毒Jurkat T細(xì)胞,以生理鹽水為對照組,并用鈣調(diào)磷酸酶拮抗劑環(huán)孢菌素A(CSA)、鈣離子螯合劑(EGTA)進行干預(yù),設(shè)置空白濾膜組、EGTA組和CSA組平行對照,染毒時間為3、6和24 h。ELISA方法測定細(xì)胞上清IL-2水平;QRT-PCR測定細(xì)胞鈣調(diào)磷酸酶(CaN)、活化T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子(NFAT)的mRNA表達;免疫熒光法觀察NFAT核分布情況。結(jié)果交通相關(guān)PM2.5染毒細(xì)胞3、6和24 h后,100μg/ml PM2.5組IL-2水平明顯低于空白濾膜和生理鹽水組,但高于100μg/ml PM2.5+CSA組、100μg/ml PM2.5+EGTA組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),并且隨著時間的延長,IL-2表達水平呈降低趨勢。100μg/ml PM2.5組的NFAT、CaN mRNA表達水平高于對照組、100μg/ml PM2.5+CSA組、100μg/ml PM2.5+EGTA組,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。PM2.5能夠使NFAT蛋白脫磷酸化而活化,可移位至細(xì)胞核內(nèi)。白介素-2表達水平與NFAT基因、CaN基因表達水平呈負(fù)相關(guān),差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論交通相關(guān)PM2.5可抑制Jurkat T細(xì)胞釋放IL-2,Ca2+-CaN-NFAT信號通路可能參與調(diào)控PM2.5對Jurkat T細(xì)胞IL-2的釋放。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of traffic related PM2.5 on interleukin-2 (IL-2) in Jurkat T cells and the regulation of calcium signaling pathway on IL-2 release. Methods Jurkat T cells were exposed to 100 渭 g/ml PM2.5, and normal saline was used as control group. The calcium chelator (EGTA), a calcium chelator of cyclosporin A (CSA), was used as a calcium chelating agent. The blank filter membrane group was set up. The levels of IL-2 in supernatant of EGTA group and CSA group were measured by 3 h.ELISA and 24 h.ELISA methods. QRT-PCR was used to detect the mRNA expression of T cell transcription factor (NFAT) activated by calmodulin (CaN), and the distribution of NFAT nucleus was observed by immunofluorescence. Results the level of IL-2 in 100 渭 g/ml PM2.5 group was significantly lower than that in blank filter membrane and saline group, but higher than that in 100 渭 g/ml PM2.5 CSA group and 100 渭 g/ml PM2.5 EGTA group. The difference was statistically significant (P0.05), and the expression level of IL-2 decreased with time. The NFAT,CaN mRNA expression level of 100 渭 g/ml PM2.5 group was higher than that of control group, 100 渭 g/ml PM2.5 CSA group. In the 100 渭 g/ml PM2.5 EGTA group, the difference was statistically significant (P0.05). PM2.5 could dephosphorize and activate the NFAT protein, which could be translocated into the nucleus. The expression level of IL-2 was negatively correlated with NFAT gene and CaN gene expression, and the difference was statistically significant (P0.05). Conclusion PM2.5 can inhibit the release of IL-2,Ca2-CaN-NFAT from Jurkat T cells and may be involved in the regulation of IL-2 release from Jurkat T cells by PM2.5.
【作者單位】: 山西醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院環(huán)境衛(wèi)生學(xué)教研室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(No.81072261) 2009年山西省高校優(yōu)秀青年學(xué)術(shù)帶頭人支持項目
【分類號】:R392

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