人凋亡誘導因子C-末端截短體AIFΔ1-480的表達對MCF-7細胞的影響
本文選題:AIFΔ- + MCF-細胞 ; 參考:《南方醫(yī)科大學學報》2013年09期
【摘要】:目的觀察人亡誘導因子(AIF)C-末端端截短體AIFΔ1-480重組基因表達對MCF-7細胞生物學行為的影響。方法利用脂質(zhì)體將重組質(zhì)粒PcDNA3.0-FDT-AIFΔ1-480瞬時轉(zhuǎn)染乳腺癌MCF-7細胞,通過Western blot、流式細胞術(shù)、MTT、集落形成試驗、線粒體膜電位測定等方法,檢測目的基因在細胞中的表達及其對轉(zhuǎn)染細胞凋亡相關(guān)分子cytC表達的變化及細胞增殖、凋亡等的影響。結(jié)果重組質(zhì)粒PcDNA3.0-FDT-AIFΔ1-480轉(zhuǎn)染腫瘤細胞后AIF蛋白表達明顯增加;重組質(zhì)粒能明顯抑制乳腺癌MCF-7細胞增殖;上調(diào)細胞色素C的表達;減低線粒體膜電位,正常細胞、空載體組和重組質(zhì)粒的線粒體膜電位(Δψ)分別為4.69±1.07、3.86±1.52和1.51±0.79 mV,重組質(zhì)粒組與對照組相比,線粒體膜電位明顯下降(P0.05);并誘導細胞凋亡,正常細胞組、脂質(zhì)體組、PcDNA3.0組、重組質(zhì)粒組細胞凋亡率分別為:(9.2±5.1)%、(15.4±4.5)%、(20.5±3.9)%、(32.2±6.0)%,重組質(zhì)粒組與對照組相比,細胞凋亡明顯增加(P0.05)。結(jié)論人AIF C-末端端截短體可通過誘導cytC從線粒體中釋放促進MCF-7細胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of AIF 螖 1-480 recombinant gene expression on the biological behavior of MCF-7 cells. Methods the recombinant plasmid PcDNA3.0-FDT-AIF 螖 1-480 was transiently transfected into breast cancer MCF-7 cells by liposome. Western blot, flow cytometry, colony forming test and mitochondrial membrane potential measurement were used. The expression of target gene in cells and its effect on the expression of apoptosis-related molecule cyt C and cell proliferation and apoptosis in transfected cells were detected. Results the expression of AIF protein increased after transfection of recombinant plasmid PcDNA3.0-FDT-AIF 螖 1-480, the recombinant plasmid inhibited the proliferation of breast cancer MCF-7 cells, upregulated the expression of cytochrome C, reduced mitochondrial membrane potential, and decreased the expression of cytochrome C in normal cells. The mitochondrial membrane potential (螖 蠄) of the empty vector group and the recombinant plasmid were 4.69 鹵1.07 鹵3.86 鹵1.52 and 1.51 鹵0.79 MV, respectively. The mitochondrial membrane potential in the recombinant plasmid group was significantly lower than that in the control group (P0.05), and apoptosis was induced in the normal cell group, liposome group and PcDNA3.0 group. The apoptotic rates of the recombinant plasmid group were (9.2 鹵5.1), (15.4 鹵4.5), (20.5 鹵3.9) and (32.2 鹵6.0), respectively. The apoptosis rate of the recombinant plasmid group was significantly higher than that of the control group (P0.05). Conclusion Human AIF C-terminal truncated body can promote apoptosis of MCF-7 cells by inducing cyt C release from mitochondria.
【作者單位】: 西安交通大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院腫瘤中心腫瘤科;
【基金】:國家自然科學基金(81072117)~~
【分類號】:R363
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