本文選題：斑馬魚 + 轉(zhuǎn)基因�。� 參考：《生物技術(shù)通報》2013年11期

【摘要】：對常規(guī)試驗方法加以改進(jìn),使之適用于斑馬魚腦部熒光標(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞的分選。以lhx5∶Kaede轉(zhuǎn)基因株系為例,利用轉(zhuǎn)基因斑馬魚腦部制備單細(xì)胞懸液進(jìn)行熒光激活細(xì)胞分選(Fluorescence-activated cell sorting,FACS),獲得lhx5熒光標(biāo)記細(xì)胞。提取總RNA后進(jìn)行基因芯片分析從而了解lhx5標(biāo)記神經(jīng)元的基因表達(dá)特性。結(jié)果顯示,通過本流程可成功制備斑馬魚幼魚腦部單細(xì)胞懸液,lhx5∶Kaede平均熒光陽性率為6%。提取RNA質(zhì)量及總量均能滿足基因芯片要求�；蛐酒Y(jié)果顯示lhx5及其他標(biāo)記分子的表達(dá)均得到了顯著富集。有效地分離斑馬魚幼魚中樞神經(jīng)系統(tǒng)熒光標(biāo)記細(xì)胞,可用于特定細(xì)胞群的基因表達(dá)譜分析。
[Abstract]:The conventional test method was improved to be suitable for the sorting of nerve cells labeled with fluorescence in zebrafish brain. Using lhx5:Kaede transgenic strain as an example, single cell suspension was prepared from the brain of transgenic zebrafish for fluorescence activated cell sorting (FAC) and lhx5 labeled cells were obtained. The gene expression characteristics of lhx5 labeled neurons were analyzed by gene chip analysis after total RNA extraction. The results showed that the average fluorescence positive rate of single cell suspension in brain of juvenile zebrafish was 6%. The quality and quantity of RNA extracted can meet the requirement of gene chip. The results of gene chip showed that the expression of lhx5 and other marker molecules were significantly enriched. Fluorescent labeled cells in central nervous system of juvenile zebrafish were effectively isolated and could be used for gene expression profiling of specific cell groups.
【作者單位】： 復(fù)旦大學(xué)腦科學(xué)研究院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(30970948)
【分類號】：R329

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1793496