本文選題：麻痹性貝毒 + 石房蛤毒素　； 參考：《中國免疫學雜志》2013年01期

【摘要】：目的:利用B淋巴細胞雜交瘤技術制備麻痹性貝毒(PSP)的單克隆抗體,以便建立快速、靈敏、有效的毒素檢測方法。方法:采用甲醛法將半抗原石房蛤毒素(STX)與血藍蛋白(KLH)偶聯(lián)制備成完全抗原STX-KLH,免疫BALB/c小鼠,取其脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞融合,經篩選和克隆,HAT選擇培養(yǎng)雜交瘤細胞,利用ELISA方法篩選出分泌抗STX-McAB的雜交瘤細胞株,并通過小鼠體內誘生腹水的方法獲得單克隆抗體。結果:共獲得4株能穩(wěn)定分泌麻痹性貝毒抗體的陽性細胞株,建立了分析檢測麻痹性貝毒的間接競爭酶聯(lián)免疫方法。對PSP中STX組分的檢出限為20 ng/ml,IC50為220 ng/ml;對GTX2/3的檢出限為10 ng/ml,IC50為50 ng/ml。結論:所制備抗體具有高特異性和靈敏性,可用于研制高質量的國產快速檢測麻痹性貝毒ELISA試劑盒。
[Abstract]:Objective: to establish a rapid, sensitive and effective method for the detection of paralytic shellfish venom PSPs by using B lymphocyte hybridoma technique.Methods: a complete antigen STX-KLH was prepared by coupling hapten STX with hemocyanin KLH by formaldehyde method. BALB/c mice were immunized with STX-KLH. The spleen cells were fused with SP2/0 myeloma cells. The hybridoma cells were selected by screening and cloning hat.Hybridoma cell lines secreting anti- were screened by ELISA method and monoclonal antibodies were obtained by inducing ascites in mice.Results: four positive cell lines were obtained to stably secrete antibodies against paralytic shellfish venom, and an indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa) was established for the detection of paralytic shellfish virus.The detection limit of STX component in PSP is 20 ng / ml and that in GTX2/3 is 20 ng / ml and 50 ng / ml, respectively.Conclusion: the prepared antibody has high specificity and sensitivity and can be used to develop a high quality ELISA kit for rapid detection of paralytic shellfish virus.
【作者單位】： 國家海洋環(huán)境監(jiān)測中心;國家海洋環(huán)境監(jiān)測中心赤潮與藻毒素實驗室;
【基金】：國家高技術研究發(fā)展計劃(863計劃)項目(2006AA09Z163);國家高技術研究發(fā)展計劃(863計劃)項目(2007AA092001) 國家908專項(908-01-ZH3) 國家海洋局海洋赤潮災害立體監(jiān)測技術與應用重點實驗室基金項目(MATHAB200918)資助
【分類號】：R392.4

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本文編號：1744424