本文選題：胚胎干細(xì)胞　切入點(diǎn)：心肌細(xì)胞　出處：《基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床》2013年09期

【摘要】：目的觀察擬胚體(EB)貼壁時(shí)間對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞(ESC)心肌分化的影響并研究其機(jī)制。方法用懸滴培養(yǎng)法促進(jìn)ESCs形成EBs。EBs在不同的分化天數(shù)貼壁,觀察搏動(dòng)EBs百分比,RT-PCR檢測(cè)Nkx2.5,GATA4和β-MHC mRNA表達(dá),Western blot檢測(cè)Src家族酪氨酸激酶磷酸化水平。結(jié)果分化第3,4天貼壁組搏動(dòng)EB百分比及Nkx2.5,GATA4,β-MHC表達(dá)水平顯著低于分化第5,6和7天貼壁組(P0.05);EB貼壁能夠使Src激酶磷酸化水平升高,Src激酶阻斷劑PP2能夠抑制貼壁誘發(fā)的Src激酶磷酸化水平升高(P0.05);對(duì)于分化第4天貼壁組,在分化第4～6天使用PP2能夠增加搏動(dòng)EBs百分比及β-MHC表達(dá)水平(P0.05)。結(jié)論 EB貼壁時(shí)間是影響ESC心肌分化的一個(gè)重要因素。在分化第4天或者之前貼壁可以顯著抑制心肌分化,其機(jī)制可能是EB貼壁激活了Src激酶。
[Abstract]:Objective to observe the effect of adherent time of EBS on myocardial differentiation of mouse embryonic stem cell ESCs and its mechanism. Methods suspension culture method was used to promote the formation of ESCs into EBs.EBs and adhere to the wall at different differentiation days. The expression of GATA4 and 尾 -MHC mRNA was detected by RT-PCR. The tyrosine kinase phosphorylation of Src family was detected by Western blot. Results the percentage of EB pulsatile and the expression of Nkx2.5, GATA4, 尾 -MHC in adherent group were significantly lower than those in 5th and 7th day of differentiation. P0.05 EB adherent can increase the level of phosphorylation of Src kinase. PP2, a blocker of SRC-kinase, can inhibit the increase of Src kinase phosphorylation induced by adhesion. The percentage of pulsatile EBs and the expression level of 尾 -MHC were increased by using PP2 on the 4th day of differentiation. Conclusion EB adhesion time is an important factor affecting myocardial differentiation of ESC. Adhesion on or before the 4th day of differentiation can significantly inhibit myocardial differentiation. The mechanism may be that EB adherent activates Src kinase.
【作者單位】： 武漢大學(xué)中南醫(yī)院心內(nèi)科;南方醫(yī)科大學(xué)神經(jīng)生物學(xué)教研室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81200119) 中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專(zhuān)項(xiàng)資金(121007)
【分類(lèi)號(hào)】：R329.1

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