人FKBP3在哺乳動(dòng)物細(xì)胞系中的轉(zhuǎn)染表達(dá)與定位
本文選題:FKBP 切入點(diǎn):基因表達(dá) 出處:《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2013年05期 論文類(lèi)型:期刊論文
【摘要】:以含cDNA序列的質(zhì)粒為模板,下游引物帶有FLAG標(biāo)簽,PCR擴(kuò)增,插入pcDNA3.1,成功構(gòu)建C端帶FLAG標(biāo)簽的人野生型肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶FKBP3的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體pcDNA3.1-FKBP3-FLAG。轉(zhuǎn)染HEK 293T細(xì)胞,Western blot檢測(cè);轉(zhuǎn)染COS-7細(xì)胞,熒光顯微鏡觀察。FKBP3在HEK 293T、COS-7細(xì)胞中均有表達(dá),且定位在COS-7細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核,胞質(zhì)分布較多,為進(jìn)一步研究FKBP3的相互作用蛋白和功能奠定了一定的基礎(chǔ)。
[Abstract]:The plasmid containing cDNA sequence as a template, primers with FLAG tags, PCR amplification, pcDNA3.1 insertion, expression of C end labeled with FLAG wild-type peptidyl prolyl CIS trans isomerase FKBP3 in mammalian cells transfected with HEK plasmid pcDNA3.1-FKBP3-FLAG. in 293T cells was successfully constructed, Western blot; transfection of COS-7 cells were observed by fluorescence microscopy.FKBP3 in HEK 293T, were expressed in COS-7 cells, and COS-7 cells located in the cytoplasm and the nucleus, cytoplasmic distribution and lays a foundation for further study on function and interaction of protein FKBP3.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)生命科學(xué)院生物學(xué)教研室;
【基金】:安徽省教育廳自然科學(xué)重點(diǎn)科研項(xiàng)目(編號(hào):KJ2010A187) 安徽省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):11040606M170、11040606M164)
【分類(lèi)號(hào)】:R346
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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