本文選題：HCV　切入點：包膜糖蛋白E　出處：《中國輸血雜志》2013年10期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的獲得在果蠅S2(S2)細胞中穩(wěn)定表達的重組丙型肝炎病毒(HCV)包膜糖蛋白2(rE2)。方法 PCR擴增截短型E2基因,克隆至pCR2.1-T載體,將測序正確的基因亞克隆至表達載體pMT/Bip/V5-HisC,構建重組表達載體pMT-E2。用FuGENE HD轉染試劑將pMT-E2轉染至S2細胞,并篩選抗性細胞,然后誘導目的蛋白表達;以Western-blotting法鑒定表達產物與HCV感染者血清反應性。結果成功構建截短型HCV E2表達載體pMT-E2,并獲得到穩(wěn)定表達rE2蛋白的S2細胞株,Western-blotting法證明rE2具有良好的免疫學活性。結論在S2細胞成功表達的HCV rE2蛋白可用于HCV感染者血清的鑒定,為HCV診斷性抗原的優(yōu)化和重組疫苗的研發(fā)提供了實驗材料。
[Abstract]:Objective to obtain recombinant hepatitis C virus (HCV) envelope glycoprotein 2rE2, which is stably expressed in Drosophila S2nS2.Methods truncated E2 gene was amplified by PCR and cloned into pCR2.1-T vector. The recombinant expression vector pMT-E2was constructed by subcloning the correct gene into the expression vector pMT-Bip-V5-HisC. the pMT-E2 was transfected into S2 cells with FuGENE HD transfection reagent, and the resistant cells were screened, then the target protein expression was induced. Results the truncated HCV E2 expression vector pMT-E2 was successfully constructed, and the S2 cell line expressing rE2 protein stably was obtained by Western-blotting. Conclusion rE2 has good immunological activity. The HCV rE2 protein successfully expressed in S2 cells can be used to identify the serum of HCV infected patients. It provides experimental materials for the optimization of HCV diagnostic antigen and the development of recombinant vaccine.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學生物技術學院輸血醫(yī)學系;
【基金】：大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目(201212121060、201212121061) 廣東省科技計劃項目(2010B031000024、2012A080203003)
【分類號】：R392.1

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