抗Ⅰ型馬立克氏病毒sorf2蛋白的多克隆抗體制備及其特異性鑒定
發(fā)布時間:2018-03-11 06:51
本文選題:Ⅰ型馬立克氏病毒 切入點:sorf基因 出處:《微生物學(xué)報》2013年03期 論文類型:期刊論文
【摘要】:【目的】制備高效價鼠和兔抗Ⅰ型馬立克氏病毒(Marek's disease virus,MDV)sorf2蛋白的多克隆抗體并對其特異性進行鑒定!痉椒ā恳寓裥蚆DV GX0101為模板,利用PCR擴增sorf2基因,分別克隆進原核表達載體pET-28a(+)和pET-32a(+)中,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(Rosetta),經(jīng)異丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)后進行融合蛋白的表達和純化。用純化的融合目的蛋白常規(guī)免疫6-8周齡Balb/c小鼠和成年新西蘭大白兔,制備抗sorf2蛋白的多克隆抗體。用Western blot和間接免疫熒光試驗鑒定多克隆抗體的特異性!窘Y(jié)果】Ⅰ型MDV的sorf2基因在原核表達載體中能夠正確表達,免疫小鼠和兔后能獲得與sorf2蛋白發(fā)生特異性反應(yīng)的高效價的多克隆抗體。【結(jié)論】制備的抗sorf2蛋白的多克隆抗體能夠特異的鑒定MDV sorf2基因缺失株,有效的區(qū)分MDV疫苗株HVT(FC-126)與Ⅰ型MDV毒株,用于臨床MDV野毒的分離鑒定。
[Abstract]:[objective] to prepare the polyclonal antibody against Marekf2 disease disease of Marek's virus type 鈪,
本文編號:1597047
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