發(fā)布時(shí)間：2018-03-06 15:54

  本文選題：代謝綜合征　切入點(diǎn)：心肌梗死　出處：《天津醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：目的本實(shí)驗(yàn)采用自發(fā)性高血糖(otsuka long-evans tokushima fatty,OLETF)大鼠高脂喂養(yǎng)的方法制作代謝綜合征大鼠模型,在該模型的基礎(chǔ)上結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈分支左前降支制作代謝綜合征合并心肌梗死大鼠模型。本實(shí)驗(yàn)旨在:1、建立一種更具穩(wěn)定性、更易復(fù)制且更接近臨床實(shí)際情況的代謝綜合征合并心肌梗死大鼠模型;2、從氧化應(yīng)激角度研究代謝綜合征合并心肌梗死對(duì)心肌損傷的影響并探討硫氧還蛋白及硫氧還蛋白相互作用蛋白在心肌損傷過(guò)程中可能發(fā)揮的作用。方法4周齡SPF級(jí)雄性O(shè)LETF大鼠18只,同品系、同周齡、同性別對(duì)照組LETO(long-evans tokushima otsuka,LETO)大鼠18只,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物總共36只,體重在170-185g之間,均購(gòu)于日本大冢制藥株式會(huì)社德島研究所(日本SLC公司),于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所屏障環(huán)境內(nèi)飼養(yǎng)。標(biāo)準(zhǔn)飼料適應(yīng)性飼養(yǎng)2周后分組,即對(duì)照(N)組LETO大鼠飼繼續(xù)標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng),代謝綜合征(MS)組OLETF大鼠改為高脂飼料喂養(yǎng)。每周于大鼠空腹(禁食12h后)行口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(oral glucose tolerance test,OGTT);每周測(cè)收縮壓和舒張壓;每?jī)芍芊Q(chēng)一次體重;每?jī)芍苋?nèi)眥靜脈血,測(cè)血清總膽固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)水平,判斷造模是否成功。待MS模型建立后,采用隨機(jī)數(shù)字法將MS組和N組各分為兩組,即:MS大鼠假手術(shù)組(MS組,n=9)、MS大鼠心肌梗死組(MS-MI組,n=9);對(duì)照大鼠假手術(shù)組(Sham組,n=9)、對(duì)照大鼠心肌梗死組(MI組,n=9);分組后采用結(jié)扎心臟左前降支近端的方法制作心肌梗死模型�？紤]到MS大鼠成模率及建立心梗模型時(shí)的死亡率,另備同批次同周齡OLETF、LETO大鼠各9只同條件喂養(yǎng),必要時(shí)補(bǔ)足每組大鼠數(shù)量以減少誤差。超聲心動(dòng)圖評(píng)價(jià)大鼠心臟功能,蘇木素-伊紅(hematoxylin eosin,HE)染色光鏡下觀(guān)察心肌形態(tài),結(jié)合炎癥評(píng)分對(duì)其炎癥反應(yīng)進(jìn)行半定量評(píng)估,透射電鏡下觀(guān)察心肌超微結(jié)構(gòu)變化。分光光度法測(cè)定心肌組織谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、髓過(guò)氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)水平;熒光法檢測(cè)NADPH氧化酶(NOX)含量;Western blot和RT-PCR法分別檢測(cè)心梗交界區(qū)心肌組織的硫氧還蛋白(thioredoxin,TRX)和硫氧還蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)蛋白及mRNA表達(dá)。使用SPSS17.0和Graphpad Prism6.0軟件完成統(tǒng)計(jì)、分析數(shù)據(jù)并作圖。結(jié)果1、MS組和N組比較:24周齡MS組大鼠OGTT試驗(yàn)結(jié)果顯示MS組大鼠各時(shí)間點(diǎn)血糖值及胰島素水平均高于N組(P0.05);MS組大鼠TC、TG明顯高于N組(P0.05);MS組大鼠收縮壓、舒張壓與N組相比顯著升高(P0.05)。2、MI大鼠模型左室功能超聲心動(dòng)圖評(píng)價(jià):MI組及MS-MI組大鼠左心室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)、左心室收縮末期內(nèi)徑(LVESD)較Sham組及MS組顯著增加(P0.05),左心室短軸縮短率(LVFS)、左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)比Sham組及MS組均顯著下降(P0.05);MS-MI組與MI組比較結(jié)果顯示LVEDD、LVESD增加更明顯(P0.05);LVFS、LVEF下降更顯著(P0.05)。3、大體標(biāo)本、HE染色及炎癥半定量評(píng)估:(1)觀(guān)察大體標(biāo)本顯示Sham組及MS組外觀(guān)無(wú)明顯差異,MI組及MS-MI組心肌梗死區(qū)域顏色蒼白。(2)光鏡和電鏡下Sham組無(wú)明顯變化,MS組出現(xiàn)輕微損傷,MI組及MS-MI組心肌細(xì)胞損傷明顯;炎癥評(píng)分顯示,Sham組及MS組評(píng)分差異不明顯;MI組及MS-MI組評(píng)分較Sham組及MS顯著升高(P0.05),且MS-MI組評(píng)分高于MI組(P0.05)。4、心肌組織氧化應(yīng)激指標(biāo):MI組及MS-MI組抗氧化應(yīng)激指標(biāo)GSH、T-AOC、SOD水平較Sham組及MS組顯著下降(P0.05),氧化應(yīng)激指標(biāo)MPO、NOX及MDA含量較Sham組及MS組顯著升高(P0.05)。MS-MI組GSH、T-AOC、SOD水平顯著低于MI組(P0.05),而MPO、NOX及MDA含量較MI組顯著升高(P0.05)。5、心肌組織RX、TXNIP蛋白和mRNA表達(dá):(1)Western blot結(jié)果:MI組及MS-MI組TRX蛋白表達(dá)低于Sham組及MS組,TXNIP蛋白表達(dá)高于Sham組及MS組(均P0.05);MS-MI組與MI組相比TRX蛋白表達(dá)更低,TXNIP蛋白表達(dá)更高(均P0.05)。(2)RT-PCR結(jié)果:與Sham組及MS組相比,MI組及MS-MI組TRX mRNA表達(dá)降低,TXNIP mRNA增加(均P0.05);MS-MI組較MI組TRX mRNA表達(dá)更低,TXNIP mRNA表達(dá)更高(均P0.05)。結(jié)論1、通過(guò)高脂喂養(yǎng)的方法成功建立了OLETF大鼠代謝綜合征動(dòng)物模型,模型大鼠血糖、胰島素水平、血清TC、TG及血壓顯著升高。2、采用結(jié)扎MS模型大鼠心臟左前降支的方法成功建立了MS合并MI動(dòng)物模型,模型大鼠左心功能明顯下降,炎癥及氧化應(yīng)激水平明顯升高。3、心肌梗死時(shí)TRX對(duì)心肌的保護(hù)減弱,TXNIP對(duì)心肌的損傷增強(qiáng),并且MS可通過(guò)下調(diào)TRX表達(dá)和上調(diào)TXNIP表達(dá)來(lái)加重氧化應(yīng)激,進(jìn)一步加重心肌損傷。
[Abstract]:The purpose of this experiment was spontaneous (Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty high glucose, OLETF) method in high fat fed rats making rat model of metabolic syndrome, was based on the model of rat left branch of anterior descending coronary artery to make metabolic syndrome complicated with myocardial infarction model rats. This experiment aims to establish: 1. A more stable, more easy to copy and more close to the actual clinical situation of the metabolic syndrome complicated with myocardial infarction model rats; 2, from the perspective of oxidative stress metabolic syndrome complicated with myocardial infarction on myocardial infarction and explore the thioredoxin and thioredoxin interacting protein may play in myocardial injury the role of SPF. Methods 4 week old male OLETF 18 rats of the same strain, the same age, the same sex control group LETO (Long-Evans Tokushima Otsuka, LETO) 18 rats, a total of 36 animal experiments, weight 鍦，

本文編號(hào)：1575492