發(fā)布時(shí)間：2018-01-19 20:44

  本文關(guān)鍵詞： 胃潰瘍 肝郁脾虛證 柴黃胃潰寧 SOD HIF-1α LDH-A　出處：《浙江中醫(yī)藥大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的探討柴黃胃潰寧對(duì)胃潰瘍肝郁脾虛證模型大鼠胃黏膜低氧微環(huán)境是否具有改善作用,通過觀察其對(duì)SOD及HIF-1a、LDH-A的影響,探討其可能的作用機(jī)制,明確胃潰瘍肝郁脾虛證的證本質(zhì),進(jìn)一步推動(dòng)驗(yàn)方柴黃胃潰寧的臨床開發(fā)應(yīng)用。方法將60只雄性SD大鼠在適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后隨機(jī)分為2組,分別為正常組20只,胃潰瘍肝郁脾虛證模型組(簡(jiǎn)稱模型組)40只。采用多種復(fù)合因素結(jié)合乙酸燒灼法制備大鼠模型,造模結(jié)束后分別從正常組和模型組中隨機(jī)各抽取10只大鼠,以驗(yàn)證胃潰瘍肝郁脾虛證模型。驗(yàn)證模型后,將剩余30只模型組大鼠再次隨機(jī)分為胃潰瘍肝郁脾虛證模型組(后亦稱模型組)、黃芪建中湯藥物干預(yù)組(后簡(jiǎn)稱黃芪組)、柴黃胃潰寧藥物干預(yù)組(后分別簡(jiǎn)稱為柴黃組),每組各10只。正常組剩余10只大鼠繼續(xù)作為對(duì)照組。其中黃芪組與柴黃組于造模結(jié)束第2天開始灌服實(shí)驗(yàn)方中藥水煎劑,連續(xù)灌胃14天。各組于末次給藥后24h處死,取腹主動(dòng)脈血采集樣本。用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè)血清超氧化物歧化酶(SOD)及缺氧誘導(dǎo)因子-1a(HIF-1a)、乳酸脫氫酶A(LDH-A)的含量。結(jié)果1、與正常組大鼠變化比,肝郁脾虛證胃潰瘍大鼠模型組體重變化有非常顯著性差異(P0.01);其血清GAS、AMY及血漿5-HT較正常組不同程度減低(P0.05或P0.01),血漿NE水平較正常組明顯升高(P0.01);其胃竇區(qū)黏膜表面顏色較蒼白,伴充血水腫,可見被覆薄層滲出物的潰瘍面,鏡下胃黏膜層有缺損,固有腺體排列較紊亂,主細(xì)胞、壁細(xì)胞、黏液細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,可見大量炎癥細(xì)胞浸潤,肌層增厚。模型組符合胃潰瘍肝郁脾虛證的各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo),表明模型建立成功。2、模型組大鼠HIF-1a、LDH高表達(dá),而SOD則出現(xiàn)低表達(dá)。利用柴黃胃潰寧湯劑干預(yù)治療14天后,實(shí)驗(yàn)組血清HIF-1a、LDH含量較前降低,SOD活性則有所升高。血清SOD、LDH與HIF-1a與模型組相比,具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論1、通過模型組大鼠HIF-1a、LDH表達(dá)上調(diào),而SOD則出現(xiàn)低表達(dá),進(jìn)一步明確胃潰瘍肝郁脾虛證大鼠模型存在低氧微環(huán)境的改變。2、通過中藥干預(yù)后的HIF-1 a與LDH表達(dá)變化,明確柴黃胃潰寧能夠調(diào)節(jié)三羥酸循環(huán)能量代謝,改善胃潰瘍肝郁脾虛證的低氧微環(huán)境;同時(shí)表明柴黃胃潰寧可提升機(jī)體SOD的表達(dá)含量,改善氧自由基代謝調(diào)節(jié)及低氧應(yīng)答能力,減輕了脂質(zhì)過氧化物對(duì)機(jī)體組織細(xì)胞的氧化損傷。3、驗(yàn)方柴黃胃潰寧對(duì)胃潰瘍肝郁脾虛證大鼠具有良好的改善低氧缺血狀態(tài)及修復(fù)胃黏膜的作用,其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)線粒體能量代謝及干預(yù)氧自由基代謝有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate whether Chaihuang Weikui Ning can improve gastric mucosal hypoxic microenvironment in rats with gastric ulcer model of liver stagnation and spleen deficiency, and observe its effect on SOD and HIF-1a LDH-A. To explore the possible mechanism of its action, to clarify the nature of the syndrome of stomach ulcer, liver stagnation and spleen deficiency. Methods 60 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into 2 groups after 7 days of adaptive feeding. There were 40 rats in the model group of gastric ulcer with liver stagnation and spleen deficiency syndrome (referred to as the model group). The rat model was made by combination of multiple factors and acetic acid cauterization. At the end of the model, 10 rats were randomly selected from the normal group and the model group to verify the model of gastric ulcer, liver stagnation and spleen deficiency. The remaining 30 rats in the model group were randomly divided into the model group of gastric ulcer liver stagnation and spleen deficiency syndrome (later called model group, Huangqi Jianzhong decoction intervention group). Chaihuang Weikuining drug intervention group (later referred to as Chaihuang group). There were 10 rats in each group. The remaining 10 rats in the normal group continued to serve as the control group. The astragalus group and the chaihuang group began to take the experimental prescription Chinese medicine decoction on the second day after the end of the model making. Each group was killed 24 hours after the last administration. Blood samples were collected from abdominal aorta. Serum superoxide dismutase (SOD) and hypoxia inducible factor-1a( HIF-1a) were detected by enzyme linked immunosorbent assay (Elisa). Results 1. Compared with the normal group, the changes of body weight in the model group of gastric ulcer with liver stagnation and spleen deficiency syndrome were significantly different from those in the normal group (P 0.01). The serum level of GASAMY and 5-HT were significantly lower than that of the normal group (P0.05 or P0.01), and the plasma NE level was significantly higher than that of the normal group (P 0.01). Its antral area mucous membrane surface color is paler, accompanied by congestion and edema, can be seen coated with thin layer exudate ulcer surface, under the microscope gastric mucosal layer defects, proper gland arrangement is more disorder, main cells, wall cells. The mucus cells were irregular, a large number of inflammatory cells infiltrated, muscle layer thickened. The model group accord with the various indicators of gastric ulcer liver stagnation and spleen deficiency syndrome, indicating that the model was established successfully. 2. The model group rats HIF-1a. After 14 days of intervention with Chaihuang Weichui Ning decoction, the serum HIF-1a LDH content of the experimental group was lower than that of the former. Compared with the model group, the activity of SOD in serum was significantly higher than that in the model group (P 0.05). Conclusion 1, HIF-1a in the model group was passed through the model group. The expression of LDH was up-regulated, while the expression of SOD was low. It was further confirmed that the rat model of gastric ulcer with liver stagnation and spleen deficiency had the change of hypoxic microenvironment. 2. Through the changes of HIF-1 a and LDH expression after the intervention of traditional Chinese medicine, it is clear that Chaihuang Weikui Ning can regulate the energy metabolism of trihydroxylic acid circulation and improve the hypoxic microenvironment of gastric ulcer with liver stagnation and spleen deficiency syndrome. At the same time, Chaihuang Weikui Ning can improve the expression of SOD, improve the metabolism of oxygen free radicals and the ability of hypoxia response, and alleviate the oxidative damage of lipid peroxide to tissues and cells. 3. Chaihuang Weikui Ning has a good effect on improving hypoxic ischemia and repairing gastric mucosa in rats with gastric ulcer, liver stagnation and spleen deficiency syndrome. The mechanism may be related to regulating mitochondrial energy metabolism and interfering with oxygen free radical metabolism.
【學(xué)位授予單位】：浙江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5;R-332

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本文編號(hào)：1445480