本文關鍵詞： 剛地弓形蟲 地塞米松 多不飽和脂肪酸 增殖　出處：《重慶醫(yī)科大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：研究背景及目的:剛地弓形蟲(Toxoplasma gondii)是一種頂復門專性細胞內(nèi)寄生蟲,可以導致人等哺乳類動物,甚至鳥類感染,引起弓形蟲病。大部分人在感染弓形蟲后通常處于無癥狀的隱性感染階段,一旦機體免疫力受損,體內(nèi)休眠期的弓形蟲將快速增殖引起嚴重的弓形蟲病,尤其是在患有艾滋病,使用免疫抑制劑后或器官移植病人中更加嚴重。臨床上,患者長期應用皮質(zhì)醇激素極易引發(fā)急性弓形蟲病,研究表明外源性糖皮質(zhì)激素增加會增強動物對多種病原體易感性。地塞米松作為一種糖皮質(zhì)激素在臨床上廣泛應用,它不僅具有抗炎、抗休克等作用,同時還會影響脂肪酸代謝。有研究表明地塞米松對大鼠巨噬細胞中的弓形蟲有一定增殖作用,但其作用機制不清楚。多不飽和脂肪酸不光是生物體細胞膜的重要組成部分,同時還參與細胞代謝信號傳導過程,本文研究多不飽和脂肪酸代謝在地塞米松對弓形蟲RH株增殖中的作用。方法:1.用四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測地塞米松對弓形蟲增殖作用.2.吉氏染色觀察細胞內(nèi)弓形蟲增殖率,侵襲率.3.細胞計數(shù)法計數(shù)地塞米松對弓形蟲的增殖作用.4.氣相色譜分析地塞米松對弓形蟲RH株,人乳腺癌231細胞多不飽和脂肪酸代謝的影響.結(jié)果:1.MTT法檢測顯示地塞米松能促進弓形蟲增殖并呈濃度依賴性。地塞米松作用弓形蟲后,24h時實驗組和對照組相比差異不明顯。但地塞米松作用弓形蟲48h后增殖作用明顯,10~(-7),10~(-6),10~(-5),10~(-4)mg/ml不同濃度地塞米松作用72h后實驗組OD值分別為0.4570±0.017,0.5545±0.023,0.6024±0.035,0.6535±0.046,而對照組為0.3505±0.012,實驗組OD值高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.001)。2.10~(-4)mg/ml地塞米松作用弓形蟲不同時間后,吉氏染色,1000倍顯微鏡下觀察,處理組細胞內(nèi)假包囊體積明顯大于對照組。計數(shù)實驗組地塞米松作用24h,48h,60h,72h后每100個231細胞中有65±1,88±2,99±1,100±0個細胞感染弓形蟲,而對照組為51±3,68±2,83±2,92.3±2。實驗組感染率明顯高于對照組,差異均有有統(tǒng)計學意義(P0.001)。計數(shù)地塞米松實驗組48h,60h,72h后100個細胞內(nèi)弓形蟲數(shù)量分別為497±5,1071±21,4847±115高于對照組(269±7,573±11,1057±42),差異有統(tǒng)計學意義(P0.001)。3.細胞計數(shù)法顯示,10-4mg/ml DXM作用48h后對照組和實驗組之間細胞外弓形蟲數(shù)量有明顯差異(p0.01).10~(-4)mg/ml DXM作用48h,72h,96h后細胞外弓形蟲數(shù)量分別為(18±5,119±16,154±29)×10~4個/ml,而對照組為(17±5,65±10,69±10)×10~4個/ml。4.氣相色譜分析發(fā)現(xiàn)弓形蟲脂肪酸多為長鏈不飽和脂肪酸,主要有以下幾種組成:c16:0、c18:0、c18:1、c18:2、c18:3、c20:0、c20:1、c20:2、c20:4、c22:1、c22:2,其中大部分為多不飽和脂肪酸。氣相色譜分析發(fā)現(xiàn)實驗組弓形蟲和231細胞c18:1油酸含量明顯升高;感染弓形蟲的231細胞多不飽和脂肪酸含量明顯高于未感染弓形蟲的231細胞,而地塞米松作用后感染弓形蟲的231細胞多不飽和脂肪酸量與未感染弓形蟲的231細胞相近。結(jié)論:1.地塞米松對弓形蟲有明顯的增殖作用,呈濃度依賴型。2.地塞米松能影響弓形蟲和人乳腺癌231細胞膜多不飽和脂肪酸代謝。3.地塞米松促進弓形蟲增殖作用的機制可能是通過改變宿主細胞和弓形蟲多不飽和脂肪酸代謝來實現(xiàn)。
[Abstract]:The effects of dexamethasone on the proliferation of Toxoplasma gondii RH strain and human breast cancer were studied by MTT assay .

【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R382.5

【參考文獻】

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本文編號：1445360