本文關(guān)鍵詞： 剛地弓形蟲 地塞米松 多不飽和脂肪酸 增殖　出處：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景及目的:剛地弓形蟲(Toxoplasma gondii)是一種頂復(fù)門專性細(xì)胞內(nèi)寄生蟲,可以導(dǎo)致人等哺乳類動物,甚至鳥類感染,引起弓形蟲病。大部分人在感染弓形蟲后通常處于無癥狀的隱性感染階段,一旦機(jī)體免疫力受損,體內(nèi)休眠期的弓形蟲將快速增殖引起嚴(yán)重的弓形蟲病,尤其是在患有艾滋病,使用免疫抑制劑后或器官移植病人中更加嚴(yán)重。臨床上,患者長期應(yīng)用皮質(zhì)醇激素極易引發(fā)急性弓形蟲病,研究表明外源性糖皮質(zhì)激素增加會增強(qiáng)動物對多種病原體易感性。地塞米松作為一種糖皮質(zhì)激素在臨床上廣泛應(yīng)用,它不僅具有抗炎、抗休克等作用,同時還會影響脂肪酸代謝。有研究表明地塞米松對大鼠巨噬細(xì)胞中的弓形蟲有一定增殖作用,但其作用機(jī)制不清楚。多不飽和脂肪酸不光是生物體細(xì)胞膜的重要組成部分,同時還參與細(xì)胞代謝信號傳導(dǎo)過程,本文研究多不飽和脂肪酸代謝在地塞米松對弓形蟲RH株增殖中的作用。方法:1.用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測地塞米松對弓形蟲增殖作用.2.吉氏染色觀察細(xì)胞內(nèi)弓形蟲增殖率,侵襲率.3.細(xì)胞計數(shù)法計數(shù)地塞米松對弓形蟲的增殖作用.4.氣相色譜分析地塞米松對弓形蟲RH株,人乳腺癌231細(xì)胞多不飽和脂肪酸代謝的影響.結(jié)果:1.MTT法檢測顯示地塞米松能促進(jìn)弓形蟲增殖并呈濃度依賴性。地塞米松作用弓形蟲后,24h時實(shí)驗(yàn)組和對照組相比差異不明顯。但地塞米松作用弓形蟲48h后增殖作用明顯,10~(-7),10~(-6),10~(-5),10~(-4)mg/ml不同濃度地塞米松作用72h后實(shí)驗(yàn)組OD值分別為0.4570±0.017,0.5545±0.023,0.6024±0.035,0.6535±0.046,而對照組為0.3505±0.012,實(shí)驗(yàn)組OD值高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。2.10~(-4)mg/ml地塞米松作用弓形蟲不同時間后,吉氏染色,1000倍顯微鏡下觀察,處理組細(xì)胞內(nèi)假包囊體積明顯大于對照組。計數(shù)實(shí)驗(yàn)組地塞米松作用24h,48h,60h,72h后每100個231細(xì)胞中有65±1,88±2,99±1,100±0個細(xì)胞感染弓形蟲,而對照組為51±3,68±2,83±2,92.3±2。實(shí)驗(yàn)組感染率明顯高于對照組,差異均有有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。計數(shù)地塞米松實(shí)驗(yàn)組48h,60h,72h后100個細(xì)胞內(nèi)弓形蟲數(shù)量分別為497±5,1071±21,4847±115高于對照組(269±7,573±11,1057±42),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。3.細(xì)胞計數(shù)法顯示,10-4mg/ml DXM作用48h后對照組和實(shí)驗(yàn)組之間細(xì)胞外弓形蟲數(shù)量有明顯差異(p0.01).10~(-4)mg/ml DXM作用48h,72h,96h后細(xì)胞外弓形蟲數(shù)量分別為(18±5,119±16,154±29)×10~4個/ml,而對照組為(17±5,65±10,69±10)×10~4個/ml。4.氣相色譜分析發(fā)現(xiàn)弓形蟲脂肪酸多為長鏈不飽和脂肪酸,主要有以下幾種組成:c16:0、c18:0、c18:1、c18:2、c18:3、c20:0、c20:1、c20:2、c20:4、c22:1、c22:2,其中大部分為多不飽和脂肪酸。氣相色譜分析發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組弓形蟲和231細(xì)胞c18:1油酸含量明顯升高;感染弓形蟲的231細(xì)胞多不飽和脂肪酸含量明顯高于未感染弓形蟲的231細(xì)胞,而地塞米松作用后感染弓形蟲的231細(xì)胞多不飽和脂肪酸量與未感染弓形蟲的231細(xì)胞相近。結(jié)論:1.地塞米松對弓形蟲有明顯的增殖作用,呈濃度依賴型。2.地塞米松能影響弓形蟲和人乳腺癌231細(xì)胞膜多不飽和脂肪酸代謝。3.地塞米松促進(jìn)弓形蟲增殖作用的機(jī)制可能是通過改變宿主細(xì)胞和弓形蟲多不飽和脂肪酸代謝來實(shí)現(xiàn)。
[Abstract]:The effects of dexamethasone on the proliferation of Toxoplasma gondii RH strain and human breast cancer were studied by MTT assay .

【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R382.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1445360