本文關(guān)鍵詞：銅綠假單胞菌pfm基因?qū)θ头置谙到y(tǒng)效應(yīng)蛋白的影響　出處：《微生物學(xué)通報》2013年08期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 銅綠假單胞菌 三型分泌系統(tǒng) 蛋白表達(dá)水平 Western雜交

【摘要】：【目的】檢測銅綠假單胞菌基因pfm對三型分泌系統(tǒng)效應(yīng)蛋白的影響�！痉椒ā繕�(gòu)建pfm基因互補(bǔ)菌株pfmC。提取野生株P(guān)AO1、敲除株Δpfm和互補(bǔ)株pfmC的RNA,利用Real-time PCR從轉(zhuǎn)錄水平檢測效應(yīng)蛋白ExoS、ExoT和ExoY轉(zhuǎn)錄水平的變化。以ExoS為代表,檢測細(xì)胞內(nèi)和分泌到細(xì)胞外效應(yīng)蛋白的含量。收集銅綠假單胞菌PAO1、Δpfm和pfmC菌體內(nèi)和分泌到細(xì)胞外的總蛋白,利用ExoS多克隆抗體進(jìn)行Western雜交,特異檢測ExoS的蛋白水平。【結(jié)果】與野生型相比,Δpfm中exoS、exoT和exoY轉(zhuǎn)錄水平明顯降低,而pfmC中這3個蛋白的轉(zhuǎn)錄水平得到回補(bǔ)。Δpfm菌體內(nèi)和分泌到細(xì)胞外的ExoS量均明顯低于野生株P(guān)AO1,pfmC細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外分泌的ExoS蛋白量均得到恢復(fù)。【結(jié)論】銅綠假單胞菌基因pfm會影響三型分泌系統(tǒng)效應(yīng)蛋白的水平。
[Abstract]:[objective] to detect the effect of Pseudomonas aeruginosa gene pfm on secretory system effector protein. [methods] to construct pfm gene complementary strain pfmC. extract wild strain PAO1. The RNAs of the knockout strain 螖 pfm and the complementary strain pfmC were removed and the effector protein ExoS was detected at the transcriptional level by Real-time PCR. Changes of ExoT and ExoY transcriptional levels. ExoS was used as the representative to detect intracellular and extracellular effector proteins. PAO1 was collected from Pseudomonas aeruginosa (Pseudomonas aeruginosa). The total proteins secreted into cells by 螖 pfm and pfmC were hybridized by Western using ExoS polyclonal antibodies. The protein level of ExoS was detected specifically. [results] compared with wild type, the transcriptional levels of exoSnexoT and exoY in 螖 pfm were significantly lower than those in wild type. The transcriptional levels of these three proteins in pfmC were compensated. The amount of ExoS secreted into the cells of 螖 pfm was significantly lower than that of the wild strain PAO1. Both intracellular and extracellular secretion of ExoS protein in pfmC cells recovered. [conclusion] Pseudomonas aeruginosa gene pfm may affect the level of secretory system effector protein of type 3.
【作者單位】： 南開大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.30570089) 天津市應(yīng)用基礎(chǔ)研究計(jì)劃項(xiàng)目(No.07JCYBJC08000)
【分類號】：R378
【正文快照】： 銅綠假單胞菌屬于革蘭氏陰性細(xì)菌,是醫(yī)院三大致病菌之一。該菌通過一系列毒力機(jī)制介導(dǎo)感染,三型分泌系統(tǒng)是其中一種重要的機(jī)制。細(xì)菌三型分泌系統(tǒng)在細(xì)胞表面形成針狀結(jié)構(gòu),可以直接將毒力蛋白注入宿主細(xì)胞,造成宿主細(xì)胞死亡,與細(xì)菌快速感染直接相關(guān)[1]。銅綠假單胞菌三型分泌

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1384033