本文關(guān)鍵詞：HSP70蛋白在神經(jīng)元樣PC12細(xì)胞氧糖剝奪后的表達(dá)變化　出處：《中國(guó)老年學(xué)雜志》2013年12期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的探討神經(jīng)細(xì)胞氧糖剝奪(OGD)造模后PC12細(xì)胞凋亡和熱休克蛋白(HSP)70水平,評(píng)價(jià)OGD模型。方法利用PC12細(xì)胞,經(jīng)NGF刺激誘導(dǎo)向神經(jīng)細(xì)胞分化,利用OGD建立神經(jīng)細(xì)胞OGD模型;利用MTT法、共聚焦顯微鏡鑒定PC12細(xì)胞轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元樣細(xì)胞及OGD模型的建立,Western印跡檢測(cè)OGD后HSP70蛋白的表達(dá)。結(jié)果應(yīng)用終濃度50 ng/ml NGF的DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng)PC12細(xì)胞,隨培養(yǎng)時(shí)間的增加細(xì)胞呈典型的神經(jīng)元形態(tài)。微管相關(guān)蛋白(MAP)2免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色呈強(qiáng)陽(yáng)性;建立OGD后神經(jīng)元出現(xiàn)不同程度的損傷、壞死及凋亡,隨OGD時(shí)間延長(zhǎng)存活率逐漸降低、凋亡率升高、HSP70蛋白表達(dá)增加。結(jié)論 NGF有效地誘導(dǎo)PC12細(xì)胞轉(zhuǎn)化為神經(jīng)細(xì)胞,OGD可以有效誘導(dǎo)HSP70表達(dá)。
[Abstract]:Objective to investigate the apoptosis of PC12 cells and the level of heat shock protein (HSP70) in PC12 cells induced by oxygen glucose deprivation (OGD), and to evaluate the OGD model. Methods PC12 cells were used in this study. NGF was stimulated to induce neuronal differentiation and OGD was used to establish the neural OGD model. MTT method and confocal microscope were used to identify the transformation of PC12 cells into neuron-like cells and the establishment of OGD model. Western blotting was used to detect the expression of HSP70 protein after OGD. Results PC12 cells were cultured in 50 ng/ml NGF DMEM culture medium. With the increase of culture time, the cells showed typical neuronal morphology, and the microtubule-associated protein mitogen-activated protein (MAPF-2) was strongly positive by immunocytochemical staining. After the establishment of OGD, the neuronal damage, necrosis and apoptosis appeared in varying degrees. The survival rate decreased gradually and the apoptosis rate increased with the prolongation of OGD time. Conclusion NGF can effectively induce the transformation of PC12 cells into neuronal cells. NGF can effectively induce the expression of HSP70.
【作者單位】： 吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)一科;吉林省人民醫(yī)院;
【基金】：吉林省自然基金資助項(xiàng)目(No.201015181) 吉林省科技發(fā)展計(jì)劃國(guó)際合作資助項(xiàng)目(No.20120723) 吉林省科技發(fā)展計(jì)劃青年基金資助在項(xiàng)目(No.20130522024JH,201201016)
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 缺血性腦損傷相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制一直受到廣泛關(guān)注〔1〕,在缺血性腦損傷研究中需建立可模擬腦缺血損傷的體外細(xì)胞模型。本實(shí)驗(yàn)采用神經(jīng)細(xì)胞株P(guān)C12細(xì)胞以神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(NGF)誘導(dǎo)分化為神經(jīng)樣細(xì)胞,進(jìn)行氧糖剝奪(OGD)建立穩(wěn)定神經(jīng)細(xì)胞缺血缺氧模型,為進(jìn)一步研究缺血性腦損傷相

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