發(fā)布時(shí)間：2017-12-27 14:28

  本文關(guān)鍵詞：靜脈分子指紋Eph-B4在移植靜脈適應(yīng)動(dòng)脈環(huán)境過程中的調(diào)控機(jī)制的動(dòng)物模型研究　出處：《昆明醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： Eph-B4 內(nèi)膜增生 靜脈移植 靜脈移植后狹窄

【摘要】：[目的]將靜脈移植到動(dòng)脈環(huán)境中,靜脈會(huì)在細(xì)胞或／和分子水平進(jìn)行適應(yīng)和調(diào)整,包括細(xì)胞增殖和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的沉淀或重塑,以使靜脈壁增厚,在靜脈移植過渡階段產(chǎn)生病理性的血管內(nèi)膜增生。Eph-B4在哺乳動(dòng)物胚胎時(shí)期決定靜脈系統(tǒng)的分化,并且,它被認(rèn)為是成熟靜脈系統(tǒng)的靜態(tài)標(biāo)記。此前進(jìn)行的研究顯示外科手術(shù)將靜脈移植入動(dòng)脈環(huán)境中是將靜脈去特征化,其表現(xiàn)在Eph-B4的消失和管壁內(nèi)膜的增厚。我們運(yùn)用進(jìn)行了靜脈移植的大鼠動(dòng)物模型來驗(yàn)證在靜脈移植術(shù)后的靜脈適應(yīng)期間, Eph-B4對(duì)靜脈管壁厚度起決定性作用的假設(shè)。[方法]我們將靜脈移植至同種異體大鼠體內(nèi)來建立靜脈移植動(dòng)物模型,以確定靜脈在形態(tài)和生理上的變化過程。試驗(yàn)將供體鼠的肝上下腔靜脈移植至受體鼠的腎下腹主動(dòng)脈。將24只大鼠分為兩組,其中12只入組對(duì)照組,12只入組試驗(yàn)組。兩組都于移植后1周取出一半的大鼠體內(nèi)的移植靜脈,另一半的大鼠在移植后4周取出移植靜脈。試驗(yàn)組需對(duì)移植靜脈的Eph-B4進(jìn)行刺激,在進(jìn)行靜脈移植術(shù)前將需移植的靜脈在Ephrin-B2/Fc液中浸泡20分鐘,并在靜脈移植術(shù)后每天用Ephrin-B2/Fc液對(duì)大鼠進(jìn)行腹腔注射直至試驗(yàn)終止取出靜脈。所有的移植靜脈均保存于液氮中,并對(duì)移植物標(biāo)本進(jìn)行HE染色、α-肌動(dòng)蛋白免疫組化染色以及Eph-B4免疫熒光染色以研究標(biāo)本在細(xì)胞及分子水平的變化。所有數(shù)據(jù)采用SPSS12.0軟件分析和統(tǒng)計(jì)。[結(jié)果]隨著靜脈移植后4周靜脈管壁的不斷增厚,可見移植靜脈管壁厚度的增加具有時(shí)間性。值得注意的是,相較于對(duì)照組4周時(shí)的移植靜脈,經(jīng)過Ephrin-B2/Fc液處理的試驗(yàn)組移植靜脈管壁厚度減小并且α-肌動(dòng)蛋白的表達(dá)減少。而試驗(yàn)1周所采集的樣本兩組間在移植靜脈管壁厚度及α-肌動(dòng)蛋白的表達(dá)上并無明顯差別。還需注意的是,對(duì)照組移植靜脈Eph-B4的表達(dá)減少并且在動(dòng)脈環(huán)境中其靜脈特征消失,而試驗(yàn)組經(jīng)Ephrin-B2/Fc液處理的移植靜脈其Eph-B4的表達(dá)得以保留。[結(jié)論]Eph-B4不只是成熟靜脈系統(tǒng)的靜態(tài)標(biāo)記物,在靜脈移植的過程中刺激Eph-B4可以保留靜脈的特性并且防止靜脈壁增厚�？梢�,持續(xù)對(duì)靜脈標(biāo)記物的刺激可以減少靜脈移植的失敗。刺激成熟細(xì)胞的Eph-B4為疾病的治療提供了一條新的路徑。
[Abstract]:[Objective] to the vein graft artery vein environment, will adapt and adjust the cell or / and molecular level, including cell proliferation and extracellular matrix (ECM) deposition or remodeling, in order to make the vein wall thickening in the vein graft intimal hyperplasia in transition stage of pathology. Eph-B4 determines the differentiation of the venous system during the mammalian embryo, and it is considered a static marker of the mature venous system. Previous studies have shown that surgical operation of venous transplantation into the arterial environment is characterized by venous disappearance, which is manifested by the disappearance of Eph-B4 and thickening of the inner wall of the tube. We used a rat model of venous transplantation to verify the hypothesis that Eph-B4 plays a decisive role in the thickness of venous wall during vein adaptation after vein transplantation. [Methods] we transplanted the vein to the allograft rats to establish the animal model of the vein graft to determine the morphological and physiological changes in the vein. The donor rat's superior and inferior vena cava was transplanted into the lower abdominal aorta of the recipient rat. 24 rats were divided into two groups, of which 12 were in the control group and 12 were in the test group. In the two groups, half of the rats were removed 1 weeks after transplantation, and the other half of the rats were taken out of the vein for 4 weeks after the transplantation. The experimental group needed to stimulate the Eph-B4 of the vein graft. Before vein transplantation, the vein needed to be transplanted was soaked for 20 minutes in the Ephrin-B2/Fc solution. After the intravenous transplantation, the rats were injected with Ephrin-B2/Fc solution every day until the end of the test. All the transplanted veins were stored in liquid nitrogen. HE staining, alpha actin immunohistochemical staining and Eph-B4 immunofluorescence staining were applied to study the changes of specimens at cellular and molecular level. All data are analyzed and counted by SPSS12.0 software. [results] with the continuous thickening of the venous wall 4 weeks after the vein transplantation, the thickness of the tube wall of the vein graft was more timeliness. It is worth noting that compared with the control group at 4 weeks, the thickness of transplanted venous wall decreased and the expression of alpha actin decreased in Ephrin-B2/Fc treated group. There was no significant difference in the thickness of the wall of the vein graft and the expression of alpha actin in the two groups of samples collected for 1 weeks. It is also necessary to note that the expression of Eph-B4 in the vein graft of the control group is reduced, and the vein characteristics disappeared in the arterial environment, while the expression of Eph-B4 in the experimental group treated with Ephrin-B2/Fc solution is preserved. [conclusion]Eph-B4 is not only a static marker of mature venous system, but also stimulates Eph-B4 during vein graft. It can retain the characteristics of vein and prevent thickening of vein wall. It can be seen that the continuous stimulation of the vein markers can reduce the failure of the vein graft. The Eph-B4 that stimulates the mature cells provides a new path for the treatment of disease.
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R-332;R622.4

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本文編號(hào)：1342078