本文關(guān)鍵詞：酵母雙雜交技術(shù)篩選人PIF1解螺旋酶相互作用蛋白

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【摘要】：目的應(yīng)用酵母雙雜交技術(shù)研究篩選與人類PIF1解螺旋酶相互作用的蛋白。方法應(yīng)用酵母雙雜交技術(shù),以人PIF1蛋白PINT功能域(1~180氨基酸)和解螺旋酶模序(167~926氨基酸)為誘餌,與HeLa細胞cDNA文庫雜交,篩選能與人PIF1蛋白不同功能域相互作用的蛋白。結(jié)合生物信息學(xué)分析,一對一酵母回復(fù)性雜交及β-galactosidase實驗等確定陽性克隆。結(jié)果 PIF1蛋白PINT功能域雜交共獲得17個陽性克隆,生物信息學(xué)分析有3個陽性基因,它們分別是CCNDBP1、OTUD5、CAP1。而PIF1蛋白解螺旋酶模序未獲得陽性克隆。結(jié)論 PIF1蛋白的PINT功能域?qū)φ{(diào)控PIF1的生理功能具有非常重要的作用。
【作者單位】： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所;石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No.30960093,31160183,31270894)~~
【分類號】：R341
【正文快照】： 解螺旋酶是催化DNA雙鏈解開的酶,幾乎參與包括DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、重組修復(fù)等所有的核酸代謝過程,在生物體內(nèi)具有重要的生理功能。一些解螺旋酶的突變會導(dǎo)致人類遺傳病,包括著色性干皮膚病、Werner綜合征、Bloom綜合征等[1]。PIF1解螺旋酶家族是5′至3′解螺旋酶,在從酵母到人的

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本文編號：1292143