本文關(guān)鍵詞：剛地弓形蟲ROP11基因的克隆及生物信息學(xué)分析

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【摘要】：提取剛地弓形蟲(Toxoplasma gondii)RH株速殖子總RNA,根據(jù)棒狀體蛋白11(ROP11)全長編碼序列(登錄號為DQ077905)的開放閱讀框設(shè)計引物并進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)擴(kuò)增,PCR產(chǎn)物經(jīng)EcoRⅠ和NotⅠ酶切后與原核表達(dá)載體pGEX-6P-2連接,重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸埃希菌(E.coli)XL-Blue,陽性菌落經(jīng)PCR和雙酶切鑒定,并測序。對所得序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析。結(jié)果顯示,RT-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物約為1 500 bp。菌落PCR及雙酶切結(jié)果正確。測序結(jié)果顯示,獲得的ROP11基因片段為1 548 bp(登錄號為KC456639),與GenBank上已有的弓形蟲ROP11序列相比,序列一致性為99%。生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn),ROP11編碼蛋白質(zhì)的預(yù)期相對分子質(zhì)量為Mr57 020,包括有12個保守結(jié)構(gòu)區(qū)域,其前26個氨基酸殘基構(gòu)成信號肽,絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶催化區(qū)域位于170~511氨基酸,且有2個潛在的N-糖基化位點。
【作者單位】： 河北北方學(xué)院病原生物與免疫學(xué)研究所;
【基金】：河北省高等學(xué)�？茖W(xué)技術(shù)研究重點項目(No.ZH2012010)~~
【分類號】：R382.5
【正文快照】： 剛地弓形蟲(Toxoplasma gondii)是一種專性有核細(xì)胞內(nèi)寄生原蟲,呈世界性分布,可感染包括人在內(nèi)的哺乳動物、鳥類和爬行類等,引起弓形蟲病。弓形蟲可寄生在人體多個臟器和組織,多數(shù)感染者無臨床癥狀,免疫力低下者可有嚴(yán)重的臨床癥狀[1-3]。弓形蟲棒狀體蛋白(ROP)由蟲體前端的分

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本文編號：1242509