本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)化生長因子β1聯(lián)合軟骨源性形態(tài)發(fā)生蛋白-2體外誘導(dǎo)成肌細(xì)胞向軟骨細(xì)胞的分化

  更多相關(guān)文章： 成肌細(xì)胞 細(xì)胞因子 軟骨分化 種子細(xì)胞

【摘要】：目的:探討轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)聯(lián)合軟骨源性形態(tài)發(fā)生蛋白-2(CDMP-2)體外誘導(dǎo)犬成肌細(xì)胞向軟骨細(xì)胞表型定向分化的可行性。方法:取成年比格犬大腿股直肌肌肉,以機(jī)械分解法與二步酶消化法分離獲得成肌細(xì)胞,取第4代成肌細(xì)胞,以2.0×104細(xì)胞/cm2的密度接種于24孔培養(yǎng)板,使用含CDMP-2和(或)TGF-β1的完全培養(yǎng)液誘導(dǎo)分化成肌細(xì)胞,觀察細(xì)胞生長情況。誘導(dǎo)14 d后獲取細(xì)胞,進(jìn)行HE染色、甲苯胺藍(lán)染色,觀察細(xì)胞形態(tài)及胞內(nèi)高硫酸化的蛋白聚糖變化。免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測II型膠原蛋白著色情況。RT-PCR檢測I型、II型膠原蛋白、aggrecan及Sox9 mRNA表達(dá)。阿爾新藍(lán)法定量檢測細(xì)胞糖胺聚糖(GAG)含量。結(jié)果:3個加入細(xì)胞因子的實驗組成肌細(xì)胞形態(tài)由長梭形向多角形、類圓形轉(zhuǎn)變;HE染色、甲苯胺藍(lán)染色和軟骨特異性I型和Ⅱ型膠原免疫組化法檢測及RT-PCR檢測中,實驗組均有不同程度的陽性表達(dá);TGF-β1與CDMP-2聯(lián)合應(yīng)用組糖胺聚糖含量明顯高于其他三組(P0.05)。結(jié)論:CDMP-2和TGF-β1可以單獨(dú)誘導(dǎo)高密度單層培養(yǎng)的犬成肌細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化,表達(dá)軟骨細(xì)胞特異性細(xì)胞表型,并且CDMP-2和TGF-β1有協(xié)同作用。
【作者單位】： 江蘇省無錫市第二人民醫(yī)院骨科;上海同濟(jì)大學(xué)附屬東方醫(yī)院運(yùn)動創(chuàng)傷關(guān)節(jié)外科;
【基金】：上海市自然科學(xué)基金項目(09ZR1425500)
【分類號】：R329
【正文快照】： 種子細(xì)胞是組織工程研究中最基本、最重要的因素之一,是組織工程的生命源泉。理想的種子細(xì)胞來源匱乏,嚴(yán)重限制了軟骨組織工程的臨床應(yīng)用和推廣[1]。高效、大量獲取優(yōu)良種子細(xì)胞是組織工程學(xué)需要解決的首要問題[2]。成肌細(xì)胞(skeletalmyoblasts)是組織工程學(xué)種子細(xì)胞之一,具

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 ;Effect of the gap junction blocker 1-heptanol on chondrogenic differentiation of mouse bone marrow mesenchymal stem cells in vitro[J];Journal of Nanjing Medical University;2009年02期

2 恩和吉日嘎拉;徐偉明;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志;2012年04期

3 顧羊林;朱文輝;王予彬;盧亮宇;程晏;李靖龍;;犬成肌細(xì)胞體外向纖維軟骨細(xì)胞表型分化的實驗研究[J];同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2012年02期

4 王月秋;陳伯華;;兔椎間盤移植人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的實驗觀察[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年27期

5 徐遠(yuǎn);俞興;徐林;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與髓核細(xì)胞的體外共培養(yǎng)[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年27期

6 張春興;王芳;廖彩仙;吳亞瓊;孟兵;;白細(xì)胞介素3與c-kit~+Lin~-細(xì)胞的增殖[J];中國組織工程研究;2012年01期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 賈帥軍;定向結(jié)構(gòu)軟骨支架復(fù)合骨髓基質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨缺損的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 徐遠(yuǎn);大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與髓核細(xì)胞體外共培養(yǎng)的實驗研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2011年

2 于鵬;兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與髓核細(xì)胞共培養(yǎng)體系的實驗研究[D];華中科技大學(xué);2010年

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陸華;惠國楨;苗宗寧;吳衛(wèi)江;蔣云召;周建宏;陸爻忠;陳革;葛風(fēng);徐杰;;全反式維甲酸聯(lián)合細(xì)胞因子誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞的作用[J];江蘇醫(yī)藥;2007年07期

2 李全雙;梅晰凡;郭占鵬;王瀅麗;秦書儉;;成肌干細(xì)胞在透明質(zhì)酸凝膠載體中誘導(dǎo)分化為軟骨細(xì)胞的研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2010年07期

3 張美;呂國楓;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨的誘導(dǎo)分化[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年45期

4 張玉強(qiáng);李游;王巖峰;王偉;呂剛;;經(jīng)誘導(dǎo)的大鼠成肌細(xì)胞應(yīng)用于組織工程化人工骨的實驗研究[J];中國矯形外科雜志;2011年14期

5 劉杰;傅強(qiáng);;Beagle犬上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)鑒定及脂肪干細(xì)胞誘導(dǎo)成肌的實驗研究[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2011年10期

6 陳軍;劉玉俠;姜文華;;間充質(zhì)干細(xì)胞向肝樣細(xì)胞的誘導(dǎo)分化[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年45期

7 修忠標(biāo),林建華;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化生物學(xué)的影響因素[J];骨與關(guān)節(jié)損傷雜志;2004年08期

8 張云鵬;白希壯;孫羽;;BMP-14與bFGF聯(lián)合誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨分化的實驗研究[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2009年12期

9 王勁,羅成基,郭朝華,張勇;間充質(zhì)干細(xì)胞與相關(guān)因子[J];中國實驗血液學(xué)雜志;2002年05期

10 陳曉萍,劉紅,劉淑紅,吳燕,吳海濤,范明;外源性重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抑制成人成肌細(xì)胞的體外分化[J];生理學(xué)報;2003年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 侯桂華;;豬皮片移植對HLA-DR4轉(zhuǎn)基因小鼠細(xì)胞因子產(chǎn)生的影響[A];山東免疫學(xué)會、山東微生物學(xué)會醫(yī)學(xué)微生物學(xué)專業(yè)委員會、山東省醫(yī)學(xué)會微生物學(xué)和免疫學(xué)專業(yè)委員會、山東省醫(yī)藥生物技術(shù)學(xué)會2001年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2001年

2 趙德容;孫嵐玲;王文余;;白細(xì)胞介素13-1種新的抗炎癥淋巴因子[A];慶祝黑龍江省免疫學(xué)會成立十周年（1993—2003）論文集[C];2003年

3 李士澤;倪江;姜冬梅;楊煥民;計紅;;冷應(yīng)激家兔血壓與血清細(xì)胞因子的變化及其相互關(guān)系[A];節(jié)能環(huán)保 和諧發(fā)展——2007中國科協(xié)年會論文集（二）[C];2007年

4 樂晶晶;董競成;蔡萃;崔琰;倪健;劉閏紅;;支氣管哮喘模型的建立與評價[A];第十次全國中西醫(yī)結(jié)合防治呼吸系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

5 周琳;樊笑霞;王皓;郝婉瑩;張玲珍;宓慶梅;仲人前;;細(xì)胞因子對人B細(xì)胞活化因子基因啟動子的調(diào)節(jié)作用[A];全國臨床免疫檢驗研討會暨第六屆全國臨床免疫學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

6 楊海偉;魏繼福;張偉;宋為娟;魏椺;何韶衡;;重組蟑螂過敏原rPer a 7對肥大細(xì)胞TLR受體的調(diào)控和細(xì)胞因子釋放[A];中華醫(yī)學(xué)會2009年全國變態(tài)反應(yīng)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

7 朱應(yīng)葆;白若昀;田榮;陳明哲;;血管活性多肽及細(xì)胞因子對血管平滑肌細(xì)胞增殖的調(diào)控[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會第五次會議論文摘要匯編[C];1992年

8 張理濤;;角質(zhì)形成細(xì)胞及其產(chǎn)生的細(xì)胞因子在皮膚免疫病理中的作用[A];首屆全國中西醫(yī)結(jié)合變態(tài)反應(yīng)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2002年

9 徐紅薇;王春華;任歡;宋英暉;邢淑賢;田景先;;IL-12、IL-7、IL-2協(xié)同誘導(dǎo)PBMC所產(chǎn)生的內(nèi)源性細(xì)胞因子對其細(xì)胞毒活性的影響[A];慶祝黑龍江省免疫學(xué)會成立十周年（1993—2003）論文集[C];2003年

10 丁劍冰;魏曉麗;馬秀敏;林仁勇;王儼;張靜萍;溫浩;;Eg95基因疫苗對繼發(fā)性細(xì)粒棘球蚴感染小鼠的免疫保護(hù)作用研究[A];2005全國第二屆核酸疫苗研討會論文集[C];2005年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳一福;細(xì)胞因子與病理性瘢痕形成密切相關(guān)[N];中國醫(yī)藥報;2005年

2 科文;中科大肝臟天然免疫研究獲新成果[N];中國醫(yī)藥報;2006年

3 吳一福;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院從MSCs中篩選出重要差異蛋白[N];中國醫(yī)藥報;2006年

4 董映璧;胚胎成肌細(xì)胞可治心跳過慢[N];科技日報;2005年

5 記者 田學(xué)科;科學(xué)家弄清肌肉發(fā)育中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[N];科技日報;2007年

6 王蘇平;探究中醫(yī)證本質(zhì)[N];健康報;2004年

7 記者胡德榮;心肌細(xì)胞能體外培養(yǎng)[N];健康報;2002年

8 ;獨(dú)辟蹊徑 追根溯源[N];中國醫(yī)藥報;2003年

9 余志平;抗RSV感染研究聚焦免疫應(yīng)答[N];中國醫(yī)藥報;2005年

10 ;免疫系統(tǒng)會干擾生物鐘[N];農(nóng)村醫(yī)藥報（漢）;2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宋春輝;模擬HCV HVR1免疫7肽對人不同免疫細(xì)胞分泌細(xì)胞因子影響的初步研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2008年

2 汪璇;白介素6類細(xì)胞因子對成人成肌細(xì)胞增殖和分化影響的實驗研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

3 馮林;大鼠脂肪組織來源干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、誘導(dǎo)分化以及與絲素材料相容性的初步研究[D];蘇州大學(xué);2006年

4 野向陽;人臍帶源間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及移植免疫學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2010年

5 畢建軍;組織工程皮膚種子細(xì)胞免疫原性及組織工程皮膚移植SCID鼠的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2008年

6 白雪;旋毛蟲排泄分泌物調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞及成肌細(xì)胞功能的體外研究[D];吉林大學(xué);2011年

7 姜春來;細(xì)胞因子對HIV-1疫苗DNA prime/MVA boost的加強(qiáng)作用[D];吉林大學(xué);2005年

8 張曉紅;T-依賴性B淋巴細(xì)胞激活機(jī)制的探討[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1993年

9 李睿;小鼠卡介苗新生期接種和呼吸道合胞病毒感染對免疫狀態(tài)和實驗性哮喘的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2005年

10 寇麗;重癥急性胰腺炎免疫功能紊亂與調(diào)控[D];天津醫(yī)科大學(xué);2005年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉杰;尿路缺損肌性管腔修復(fù)的種子細(xì)胞實驗研究[D];蘇州大學(xué);2011年

2 趙雷;人高遷移率族蛋白1的克隆、表達(dá)及其功能研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

3 張正姬;CpG誘導(dǎo)Th1型免疫應(yīng)答及其對血吸蟲肝蟲卵肉芽腫病變調(diào)節(jié)作用的研究[D];蘇州大學(xué);2005年

4 翁躍頌;血管活性腸肽對樹突狀細(xì)胞趨化活性及細(xì)胞因子分泌的調(diào)節(jié)作用[D];浙江大學(xué);2006年

5 宣e，

本文編號：1242768