本文關(guān)鍵詞：shRNA特異性靜默大鼠肺泡巨噬細胞TLR2基因?qū)θ緣m大鼠肺纖維化的抑制作用

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【摘要】：目的構(gòu)建表達大鼠TLR2的shRNA慢病毒載體,并研究其在染塵大鼠肺組織內(nèi)對巨噬細胞功能的抑制效應(yīng)。方法設(shè)計并構(gòu)建具有干擾效力的shRNA表達質(zhì)粒,篩選出對TLR2干擾效果最好的一段序列,使用Gateway方法重組到慢病毒表達載體中進行包裝,采用包裝好的慢病毒感染大鼠肺泡巨噬細胞系NR8383,ELISA法檢測TGF-β1、IL-1β、IL-6的表達情況;而后,在大鼠矽肺模型中引入TLR2慢病毒載體,觀察矽肺發(fā)生和進展情況。結(jié)果成功篩選出具有良好TLR2表達干擾效果的shRNA,并成功包裝入慢病毒,慢病毒滴度為1.0×106TU/ml,轉(zhuǎn)染慢病毒的肺泡巨噬細胞釋放TGF-β1、IL-1β、IL-6均顯著減少(P0.05);轉(zhuǎn)導(dǎo)了干擾病毒載體的矽肺大鼠,其矽肺發(fā)生發(fā)展受抑情況均優(yōu)于對照組。結(jié)論成功構(gòu)建了表達大鼠TLR2 shRNA的慢病毒,具有良好的抑制TGF-β1、IL-1β、IL-6功能,并能有效抑制矽肺的發(fā)生發(fā)展,揭示TLR2可能成為治療肺纖維化的潛在靶點。
【作者單位】： 同濟大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院;第二軍醫(yī)大學(xué)研管大隊臨床十隊;第二軍醫(yī)大學(xué)免疫學(xué)教研室;
【分類號】：R363
【正文快照】： 一般認為,SiO2粉塵長期刺激肺泡,引發(fā)慢性肺泡炎癥,導(dǎo)致肺泡巨噬細胞(alveolar macrophage,AM)分泌多種細胞因子和炎性介質(zhì),作用于肺間質(zhì)細胞和成纖維細胞,促使成纖維細胞大量增殖和膠原沉積[1～3]。因此作為塵肺的重要啟動細胞,AM觸發(fā)炎癥應(yīng)答的作用一直受到重視[4]。Toll樣

【共引文獻】

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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【相似文獻】

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本文編號：1231872