本文關(guān)鍵詞：shRNA特異性靜默大鼠肺泡巨噬細(xì)胞TLR2基因?qū)θ緣m大鼠肺纖維化的抑制作用

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【摘要】：目的構(gòu)建表達(dá)大鼠TLR2的shRNA慢病毒載體,并研究其在染塵大鼠肺組織內(nèi)對(duì)巨噬細(xì)胞功能的抑制效應(yīng)。方法設(shè)計(jì)并構(gòu)建具有干擾效力的shRNA表達(dá)質(zhì)粒,篩選出對(duì)TLR2干擾效果最好的一段序列,使用Gateway方法重組到慢病毒表達(dá)載體中進(jìn)行包裝,采用包裝好的慢病毒感染大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系NR8383,ELISA法檢測(cè)TGF-β1、IL-1β、IL-6的表達(dá)情況;而后,在大鼠矽肺模型中引入TLR2慢病毒載體,觀察矽肺發(fā)生和進(jìn)展情況。結(jié)果成功篩選出具有良好TLR2表達(dá)干擾效果的shRNA,并成功包裝入慢病毒,慢病毒滴度為1.0×106TU/ml,轉(zhuǎn)染慢病毒的肺泡巨噬細(xì)胞釋放TGF-β1、IL-1β、IL-6均顯著減少(P0.05);轉(zhuǎn)導(dǎo)了干擾病毒載體的矽肺大鼠,其矽肺發(fā)生發(fā)展受抑情況均優(yōu)于對(duì)照組。結(jié)論成功構(gòu)建了表達(dá)大鼠TLR2 shRNA的慢病毒,具有良好的抑制TGF-β1、IL-1β、IL-6功能,并能有效抑制矽肺的發(fā)生發(fā)展,揭示TLR2可能成為治療肺纖維化的潛在靶點(diǎn)。
【作者單位】： 同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院;第二軍醫(yī)大學(xué)研管大隊(duì)臨床十隊(duì);第二軍醫(yī)大學(xué)免疫學(xué)教研室;
【分類(lèi)號(hào)】：R363
【正文快照】： 一般認(rèn)為,SiO2粉塵長(zhǎng)期刺激肺泡,引發(fā)慢性肺泡炎癥,導(dǎo)致肺泡巨噬細(xì)胞(alveolar macrophage,AM)分泌多種細(xì)胞因子和炎性介質(zhì),作用于肺間質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞,促使成纖維細(xì)胞大量增殖和膠原沉積[1～3]。因此作為塵肺的重要啟動(dòng)細(xì)胞,AM觸發(fā)炎癥應(yīng)答的作用一直受到重視[4]。Toll樣

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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9 孟愛(ài)宏;;p38MAPK和STAT3在LPS刺激小鼠肺泡巨噬細(xì)胞中的作用[A];中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)代表大會(huì)及學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2010年

10 胡建利;;過(guò)氯酸銨對(duì)肺泡巨噬細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究[A];第三屆廣西青年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（自然科學(xué)篇）[C];2004年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 王世鑫;二氧化硅粉塵致肺纖維化機(jī)制及早期生物標(biāo)記物研究[D];重慶大學(xué);2004年

3 王萬(wàn)宗;體外三維培養(yǎng)條件下轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1基因轉(zhuǎn)染的兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞促成軟骨細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

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9 黃宏;細(xì)菌內(nèi)毒素、脂蛋白、DNA的協(xié)同效應(yīng)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

10 許順江;CCK-8抗炎作用的受體及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2004年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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4 姜昌麗;人TGFβ1自體疫苗的構(gòu)建及其免疫原性的鑒定[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2006年

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10 張連霞;GM-CSF對(duì)肥大細(xì)胞蛋白酶激活受體表達(dá)和介質(zhì)分泌的影響及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路探討[D];汕頭大學(xué);2008年

本文編號(hào)：1231872