本文關(guān)鍵詞：小凹蛋白1上調(diào)人臍靜脈內(nèi)皮細胞鈣敏感受體介導一氧化氮合酶激活的機制

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【摘要】：目的探討小凹蛋白1(Cav-1)上調(diào)人臍靜脈內(nèi)皮細胞鈣敏感受體介導內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)激活的作用機制。方法培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞,取同代細胞隨機分為:(1)對照組;(2)鈣敏感受體激動劑精胺(2.0 mmol/L)+Ca2+組;(3)Caveolae結(jié)構(gòu)破壞劑(Filipin,1.5 mg/L)+精胺+Ca2+組;(4)Cav-1 ShRNA+精胺+Ca2+組;(5)空質(zhì)粒+精胺+Ca2+組;(6)Filipin不同濃度(1.5、2.0、2.5 mg/L)組。免疫印跡檢測人臍靜脈內(nèi)皮細胞中eNOS和磷酸化eNOS(p-eNOS)、Cav-1以及eNOS膜蛋白表達;免疫熒光和免疫共沉淀技術(shù)檢測Cav-1和eNOS表達、共定位以及相互作用。結(jié)果不同濃度Filipin不影響eNOS和p-eNOS蛋白表達(P0.05);精胺作用下細胞內(nèi)p-eNOS表達增加(P0.05),此作用可被Filipin(1.5 mg/L)或Cav-1基因沉默完全阻斷(P0.05);Fili-pin(1.5 mg/L)或Cav-1干擾處理后,eNOS的膜蛋白表達減少(P0.05),eNOS的蛋白表達無變化(P0.05);免疫熒光雙標顯示Filipin(1.5 mg/L)或Cav-1基因沉默后eNOS在小凹定位減少,核周邊局部區(qū)域聚集增多。與對照組和精胺+Ca2+組比較,Cav-1 ShRNA處理組Cav-1和eNOS相互作用減弱(P0.05),其他處理組間的相互作用無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論人臍靜脈內(nèi)皮細胞中Cav-1上調(diào)鈣敏感受體介導eNOS激活作用機制可能與Cav-1影響eNOS質(zhì)膜定位及抑制eNOS向細胞器轉(zhuǎn)位有關(guān)。
【作者單位】： 新疆石河子大學醫(yī)學院新疆地方與民族高發(fā)病教育部重點實驗室;新疆石河子大學醫(yī)學院病理生理教研室;新疆石河子大學醫(yī)學院醫(yī)學機能實驗中心;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(30860099)
【分類號】：R363
【正文快照】： 內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxidesynthase,eNOS)通過促使一氧化氮(nitric oxide,NO)的合成,在維持血管張力從而調(diào)節(jié)血壓等方面發(fā)揮重要作用。在血管內(nèi)皮細胞,eNOS主要富集于細胞膜小凹和高爾基復合體。小凹蛋白1(caveolin-1,Cav-1)作為小凹表面標志蛋白和結(jié)構(gòu)蛋

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本文編號：1192189