人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)及其生長(zhǎng)特性分析
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【摘要】:目的:探討人血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)體外培養(yǎng)方法及其生長(zhǎng)的特性。方法:采用組織塊貼壁結(jié)合酶消化法培養(yǎng)人大隱靜脈VSMC并傳代,以形態(tài)學(xué)觀察、免疫熒光染色法、考馬斯亮藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞;以臺(tái)盼藍(lán)染色法、四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法、繪制生長(zhǎng)曲線、劃痕法測(cè)定細(xì)胞成活率、增殖及遷移能力。結(jié)果:原代培養(yǎng)5~7 d細(xì)胞從組織塊爬出,傳代細(xì)胞呈"峰-谷"樣生長(zhǎng);胞質(zhì)內(nèi)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白免疫熒光染色陽(yáng)性;考馬斯亮藍(lán)染色可見(jiàn)VSMC細(xì)胞骨架呈致密束狀;傳代細(xì)胞成活率為97%;生長(zhǎng)曲線呈類"S"形;細(xì)胞生長(zhǎng)3~6 d內(nèi)光密度值變化明顯;無(wú)血清培養(yǎng)的VSMC在24 h內(nèi)劃痕寬度變化顯著。結(jié)論:體外培養(yǎng)的VSMC純度高,結(jié)構(gòu)、功能良好,為收縮表型,細(xì)胞生長(zhǎng)第3~6天增殖活力較強(qiáng),24 h內(nèi)遷移能力最強(qiáng)。
【作者單位】: 山東大學(xué)附屬千佛山醫(yī)院血管外科;
【基金】:山東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(ZR2009CL018)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth musclecell,VSMC)是血管壁組織結(jié)構(gòu)及維持血管張力的主要細(xì)胞成分。以體外培養(yǎng)VSMC為基礎(chǔ),研究血管病變發(fā)生過(guò)程中的細(xì)胞及分子生物學(xué)改變,是探明血管疾病發(fā)病機(jī)制良好的研究手段[1-2]。本研究通過(guò)組織塊貼壁結(jié)合酶消化法培養(yǎng)人大隱靜脈VSMC
【參考文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1144422
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