本文關(guān)鍵詞：一種新型免疫毒素IAB-TAT-BH3的表達(dá)、純化及初步鑒定

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【摘要】：利用能與CA125結(jié)合的間皮素最小活性片段IAB與跨膜肽TAT和凋亡肽BH3連接后,插入至質(zhì)粒pET32a(+)中,構(gòu)建成免疫毒素IAB-TAT-BH3融合表達(dá)載體pET32a(+)-IAB-TAT-BH3。將此重組質(zhì)粒及對(duì)照組質(zhì)粒pET32a(+)-IAB-BH3分別轉(zhuǎn)化E.coli BL21(DE3),表達(dá)后經(jīng)western blot驗(yàn)證,獲得了相應(yīng)的可溶性蛋白表達(dá)產(chǎn)物。表達(dá)菌的裂解上清經(jīng)鎳柱親和層析、超濾脫鹽后,分別收集到高純度且濃度均大于250μg/ml的融合蛋白。經(jīng)MTT檢測,這兩種融合蛋白針對(duì)細(xì)胞表面表達(dá)有受體蛋白CA125的癌細(xì)胞并具有抑制其增殖的作用。其中IAB-TAT-BH3與對(duì)照IAB-BH3相比,具有更強(qiáng)抑制細(xì)胞增殖的作用。IAB-TAT-BH3這一新型免疫毒素的表達(dá)、純化及初步鑒定,為CA125陽性癌細(xì)胞的靶向治療研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 華東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： CA 免疫毒素 表達(dá) 純化
【基金】：上海市科委生物醫(yī)藥領(lǐng)域重點(diǎn)科技攻關(guān)專項(xiàng)(074319104)資助 國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(31000346)資助
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 癌癥在當(dāng)今已嚴(yán)重威脅到人類的健康,針對(duì)癌癥的藥物治療是目前最為直接而有效的手段[1]。在腫瘤藥物治療中,腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的耐藥性成為腫瘤藥物治療的主要障礙[2],如何避免藥物對(duì)于正常組織的殺傷和破壞,也是腫瘤藥物治療的關(guān)鍵所在。近幾十年來,全世界大力發(fā)展腫瘤分子靶向

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本文編號(hào)：1115074