本文關鍵詞：淫羊藿苷對老年癡呆模型小鼠的病理學影響及相關機制探討

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【摘要】：老年癡呆(AD)是一種原發(fā)性、不可逆轉(zhuǎn)的、伴有認知障礙和記憶喪失的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,病因迄今未明�！癆β學說”是最為普遍接受的AD發(fā)病學說,即β-淀粉樣蛋白(Aβ)是AD發(fā)病的最主要原因,其在大腦內(nèi)特定區(qū)域聚集,引發(fā)一系列病理變化(神經(jīng)元死亡、神經(jīng)纖維纏結(jié)、氧化應激以及膽堿能系統(tǒng)損傷。最近幾年研究發(fā)現(xiàn)顆粒蛋白(PGRN)與AD和Aβ之間有著密切關系。PGRN與Aβ存在某種數(shù)量關系,參與了AD的一系列病生理過程,但是PGRN在AD發(fā)病中的具體機制還不清楚。淫羊藿苷(ICA)為小檗科淫羊?qū)僦参镆蜣降闹饕行С煞?其藥理作用研究較多的是生殖和內(nèi)分泌方面。今年來,ICA在神經(jīng)系統(tǒng)方面的作用越來越受到人們的重視,已經(jīng)取得了一定得的研究成果,而其對AD的治療作用研究還比較少。本實驗用Aβ1-42誘導小鼠AD模型,ICA給藥處理,觀察ICA對Aβ沉積、神經(jīng)纖維纏結(jié)、氧化應激和膽堿能系統(tǒng)損傷等AD典型病理特征的影響,而且探討了PGRN在小鼠海馬中的數(shù)量變化,為后續(xù)進一步研究ICA對AD的治療作用以及PGRN在AD發(fā)病中的機制打下基礎。方法:將小鼠分為四大組,分別為對照組(Naive)、生理鹽水組(NS)、模型組(Aβ)和治療組,其中治療組又分三個小組,分別為ICA30、60和120mg/kg組。模型組和治療組小鼠雙側(cè)海馬內(nèi)注射寡聚態(tài)Aβ1-42構(gòu)造老年癡呆模型,生理鹽水組用等量生理鹽水替代,對照組不做處理。造模次日起,治療組ICA30、60和120mg/kg灌胃給藥,其它組用等量生理鹽水替代,連續(xù)14天后取材。HE染色,觀察小鼠海馬形態(tài)學變化。Elisa檢測小鼠海馬內(nèi)Aβ1-42、AChE和ChAT的含量。免疫組織化學法檢測小鼠海馬內(nèi)Aβ1-42的沉積以及tau蛋白、CDK5和PGRN的表達。試劑盒檢測小鼠海馬內(nèi)SOD、GSH-PX和NOS的含量。Western blot檢測tau蛋白、CDK5和OGRN的表達。結(jié)果:1.淫羊藿苷對老年癡呆模型小鼠的病理學影響(1)HE結(jié)果:與對照組和生理鹽水組相比,模型組小鼠海馬炎癥損傷明顯,神經(jīng)元變性,細胞皺縮,胞體與周圍組織脫離,細胞核固縮,治療組有所改善。(2)Elisa結(jié)果:模型組Aβ1-42含量明顯增多,而對照組和生理鹽水組幾乎檢測不到Aβ1-42的沉積,治療組與模型組相比Aβ1-42含量有所下降。模型組與對照組和生理鹽水組相比AChE和ChAT含量明顯下降,治療組有所升高。(3)SOD和GSH-PX試劑盒檢測結(jié)果:模型組與對照組和生理鹽水組相比SOD和GSH-PX含量明顯下降,治療組有所升高。(4)免疫組織化學結(jié)果:各組都觀察不到明顯的Aβ1-42。(5)Western blot結(jié)果:模型組與對照組和生理鹽水組相比tau蛋白和CDK5含量明顯升高,治療組有所下降。2.相關機制探討結(jié)果(1)免疫組織化學結(jié)果:模型組與對照組和生理鹽水組相比PGRN含量明顯升高,治療組有所下降。(2)Western blot結(jié)果:模型組與對照組和生理鹽水組相比PGRN含量明顯升高,治療組有所下降。結(jié)論:1.Aβ1-42可以誘導小鼠海馬內(nèi)產(chǎn)生一系列老年癡呆病理特征(神經(jīng)纖維纏結(jié)、產(chǎn)生氧化應激、膽堿能系統(tǒng)損傷)。2.淫羊藿苷治療可減輕AD模型鼠的類AD病理,且有劑量依賴性,這種對AD病理的改善作用可能是通過加快Aβ的清除,抑制tau磷酸化,提高乙酰膽堿酯酶和乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶的活性,降低氧化應激反應實現(xiàn)的。3.Aβ沉積可致PGRN表達量增加,淫羊藿苷治療可顯著降低PGRN的表達,且有劑量依賴性,提示PGRN可能與AD的病理有關,這為AD發(fā)病機理提供了一條新的思路。
【關鍵詞】：老年癡呆 淫羊藿苷 病理學 Aβ1-42 PGRN
【學位授予單位】：廣東藥科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R285.5;R-332
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 1. 前言10-14
• 2. 材料與方法14-23
• 2.1 實驗材料14-17
• 2.1.1 主要儀器與試劑14-17
• 2.2 實驗動物17
• 2.3 實驗方法17-23
• 2.3.1 動物模型的建立及給藥17-18
• 2.3.2 動物的取材18
• 2.3.3 組織形態(tài)學檢測18-20
• 2.3.4 蛋白質(zhì)印跡檢測20-21
• 2.3.5 酶聯(lián)免疫吸附實驗（Elisa）21
• 2.3.6 超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒檢測21
• 2.3.7 谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）試劑盒檢測21-22
• 2.3.8 圖像分析及統(tǒng)計學方法22-23
• 結(jié)果23-38
• 3.1 淫羊藿苷對老年癡呆模型小鼠的病理學影響23-34
• 3.1.1 HE 染色23-24
• 3.1.2 Elisa結(jié)果24-27
• 3.1.3 SOD和GSH-PX試劑盒檢測結(jié)果27-28
• 3.1.4 免疫組化結(jié)果28-32
• 3.1.5 Western Blot結(jié)果32-34
• 3.2 相關機制探討結(jié)果34-38
• 3.2.1 免疫組化結(jié)果35-36
• 3.2.2 Western Blot結(jié)果36-38
• 討論38-43
• 4.1 老年癡呆動物模型的建立38
• 4.2 淫羊藿苷作用與Aβ 的變化38-39
• 4.3 淫羊藿苷作用與tau蛋白和CDK5的變化39-40
• 4.5 淫羊藿苷作用與AChE和ChAT的變化40
• 4.6 淫羊藿苷作用與SOD和GSH-PX的變化40-41
• 4.7 PGEN變化與相關機制探討41
• 4.8 總結(jié)及后續(xù)工作41-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻44-52
• 中英文縮寫語對照表52-53
• 攻讀學位期間發(fā)表的文章53-54
• 致謝54

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1 梁統(tǒng),周克元,凌光鑫;毛細管膠束電動色譜法測定淫羊藿及其中藥制劑中淫羊藿苷的含量[J];廣東藥學院學報;2000年02期

2 王明權(quán),畢志明,李萍,季暉,陳飛龍;高效液相色譜法測定淫羊藿中淫羊藿定C和淫羊藿苷的含量[J];中國中藥雜志;2003年11期

3 劉道德,劉蜀生,王凡;淫羊藿對骨的作用研究進展[J];四川解剖學雜志;2003年04期

4 葉曉鐳,劉惠娟;傅立葉變換紅外光譜法考察藥典中5種淫羊藿的質(zhì)量[J];南京中醫(yī)藥大學學報;2004年06期

5 陳燕芬,馮怡,洪宋貞,朱尚虹;微波技術提取中藥淫羊藿的研究[J];中國中藥雜志;2005年20期

6 劉向榮;王凱;鄧楠;;反相高效液相色譜法測定骨松寶片中淫羊藿苷含量[J];中國新藥雜志;2006年03期

7 趙麗東;張華峰;董靜洲;王瑛;;淫羊藿苷的超聲波強化提取及其穩(wěn)定性初探[J];西北農(nóng)業(yè)學報;2007年06期

8 盧敏;陳保漢;沈申軍;;補腎膠囊中淫羊藿苷的測定[J];中國現(xiàn)代中藥;2008年11期

9 申強;呂竹芬;謝清春;莊義修;;高效液相法測定祛痹舒肩丸中淫羊藿苷的含量[J];中國實驗方劑學雜志;2008年04期

10 朱升;歐海軍;趙淑兒;左華庭;祝金龍;;高效液相色譜法法測定不同產(chǎn)地淫羊藿中淫羊藿苷的含量[J];時珍國醫(yī)國藥;2008年09期

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1 趙小妹;聶其霞;張保獻;臧琛;王元瑜;馬振山;馮青然;;不同方法精制淫羊藿水提液對淫羊藿苷含量的影響[A];2000中藥研究論文集[C];2001年

2 張士更;呂伯東;黃曉軍;楊克冰;馬寅鋒;傅俊;錢樂;耿強;;淫羊藿苷復合物治療早泄的療效觀察[A];2009年浙江省男科、泌尿外科學術年會論文匯編[C];2009年

3 孟華;王廣基;孫建國;吳曉蘭;鄭媛婷;;體外及在體方法研究淫羊藿苷吸收特性和機制[A];中國藥理學會制藥工業(yè)專業(yè)委員會第十一屆學術會議論文摘要匯編[C];2004年

4 蔡曼玲;季暉;劉悅;王明權(quán);畢志明;李萍;;五種淫羊藿黃酮類成分對體外培養(yǎng)成骨細胞的影響[A];中國藥理學會制藥工業(yè)專業(yè)委員會第十一屆學術會議論文摘要匯編[C];2004年

5 王琳;李琰;徐運;;淫羊藿苷對腦缺血再灌損傷的保護作用及機制研究[A];第十一屆全國神經(jīng)病學學術會議論文匯編[C];2008年

6 王晶彬;周旭;金城;肖小河;;基于淫羊藿苷含量及HPLC指紋圖譜分析的淫羊藿莖與葉質(zhì)量差異研究[A];中華中醫(yī)藥學會中成藥學術研討會論文集[C];2007年

7 吳濤;金丹;南開輝;裴國獻;;淫羊藿苷可促進羊骨髓間充質(zhì)干細胞的增殖和成骨分化[A];第七屆全國創(chuàng)傷學術會議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學論壇論文匯編[C];2009年

8 裴利寬;郭寶林;;近十年中藥淫羊藿藥材和飲片研究進展[A];第八屆全國中藥和天然藥物學術研討會與第五屆全國藥用植物和植物藥學學術研討會論文集[C];2005年

9 潘曉明;趙連梅;劉麗華;紀昕;艾軍;單保恩;;淫羊藿苷體內(nèi)外免疫調(diào)節(jié)作用的實驗研究[A];河北省免疫學會第六次免疫學大會資料匯編[C];2010年

10 王鑫;徐運;;淫羊藿苷調(diào)控中樞神經(jīng)系統(tǒng)乙�；瘍�(nèi)穩(wěn)態(tài)改善卒中后癡呆[A];2013年全國老年性癡呆與相關疾病學術會議論文匯編[C];2013年

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1 金鵬輝;陜西商洛地產(chǎn)中藥材淫羊藿簡評[N];中國醫(yī)藥報;2008年

2 金鵬輝;陜西商洛地產(chǎn)淫羊藿簡評[N];農(nóng)村醫(yī)藥報（漢）;2008年

3 本報通訊員 劉安琴 孫全明;質(zhì)量標準研究為安康淫羊藿“正名”[N];安康日報;2006年

4 金鵬輝;陜西商洛淫羊藿析[N];中國中醫(yī)藥報;2008年

5 常怡勇;淫羊藿藥理研究進展[N];中國中醫(yī)藥報;2004年

6 殷曉雪 陳仲強 黨耕町;北京大學——淫羊藿苷可促進人成骨細胞增殖與分化[N];中國醫(yī)藥報;2006年

7 組稿：何建昆;淫羊藿苷芍藥苷藥效藥理簡述[N];科技日報;2001年

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1 錢衛(wèi)慶;淫羊藿苷促成骨細胞增殖中非核效應及機制研究[D];蘇州大學;2016年

2 李磊;淫羊藿苷誘導骨髓間充質(zhì)干細胞修復股骨頭壞死的實驗研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2016年

3 李梨;淫羊藿苷對缺血再灌致腦損傷保護作用的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學;2005年

4 肖強兵;淫羊藿甙對人工關節(jié)假體松動的作用及其分子機制[D];華中科技大學;2006年

5 陸鵬;淫羊藿素對人骨肉瘤細胞作用的實驗研究[D];中南大學;2012年

6 李鋼;淫羊藿苷及富自體濃縮生長因子促進兔顱骨缺損修復的分子機制探討[D];河北醫(yī)科大學;2015年

7 李謹;牙齒發(fā)育的信號調(diào)控機制及淫羊藿苷的干預研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2010年

8 劉鵬;淫羊藿素減輕急性肝損傷及其分子機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2009年

9 郝福良;淫羊藿苷促進兔顱骨缺損修復愈合的影響和機制的探討[D];河北醫(yī)科大學;2013年

10 徐長青;淫羊藿苷對卵蛋白和內(nèi)毒素誘導炎癥反應的影響及機制研究[D];復旦大學;2010年

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1 王安斌;淫羊藿苷納米微粒制備及釋放性能的研究[D];遵義醫(yī)學院;2015年

2 陳發(fā)菊;淫羊藿苷抗SAMP8小鼠衰老作用及機制研究[D];遵義醫(yī)學院;2016年

3 年宏蕾;基于GR、HSP90研究淫羊藿女貞子協(xié)同激素吸入對哮喘大鼠的影響[D];首都醫(yī)科大學;2016年

4 王晗;淫羊藿苷對老年癡呆模型小鼠的病理學影響及相關機制探討[D];廣東藥科大學;2016年

5 王立超;從PTEN信號通路探討淫羊藿苷促神經(jīng)干細胞增殖分化的作用機制[D];南京中醫(yī)藥大學;2016年

6 那君;淫羊藿苷對心肌缺血再灌注損傷的保護作用及機制研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學;2015年

7 張妤;淫羊藿素通過抑制脂肪酸合成酶活性誘導腫瘤細胞凋亡和生長抑制[D];第二軍醫(yī)大學;2009年

8 杜海斌;淫羊藿苷對人外周血內(nèi)皮祖細胞數(shù)量及功能的影響[D];山西醫(yī)科大學;2010年

9 劉韶英;淫羊藿苷對骨髓間充質(zhì)干細胞增殖及向心肌細胞分化的影響[D];北京中醫(yī)藥大學;2008年

10 徐佳楊;淫羊藿復方及其提取物對高脂血癥的臨床及實驗研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2011年

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本文編號：1010695