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大鼠海馬神經(jīng)元的原代培養(yǎng)及細(xì)胞鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-10-10 01:16

  本文關(guān)鍵詞:大鼠海馬神經(jīng)元的原代培養(yǎng)及細(xì)胞鑒定


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【摘要】:目的建立一種大鼠海馬神經(jīng)元的分離及原代培養(yǎng)方法,并進(jìn)行細(xì)胞鑒定來(lái)確定其特質(zhì)性,為進(jìn)行海馬神經(jīng)元的體外研究提供技術(shù)支持。方法選用出生24 h內(nèi)的Wistar大鼠,分離雙側(cè)海馬,經(jīng)胰酶消化后用含10%馬血清的DMEM/F12(1∶1)培養(yǎng)基培養(yǎng),12h內(nèi)換成無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)48 h,加入阿糖胞苷處理24 h,第5~8天用免疫組織化學(xué)法鑒定微管相關(guān)蛋白-2(MAP-2)的表達(dá)。結(jié)果接種4 h后細(xì)胞開(kāi)始貼壁,有的長(zhǎng)出細(xì)小突起,膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)活躍,換為無(wú)血清培養(yǎng)及阿糖胞苷處理后膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制,海馬神經(jīng)元生長(zhǎng)占優(yōu)勢(shì),隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加,細(xì)胞突起逐漸增長(zhǎng)及網(wǎng)狀聯(lián)絡(luò)密集。培養(yǎng)至3周細(xì)胞逐漸死亡。MAP-2鑒定表達(dá)陽(yáng)性。結(jié)論出生24 h內(nèi)的乳鼠原代海馬神經(jīng)元的分離及培養(yǎng)方法可靠,可作為神經(jīng)元體外培養(yǎng)的良好模型,為體外研究提供可靠的技術(shù)支持。
【作者單位】: 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心環(huán)境與健康相關(guān)產(chǎn)品安全所;
【關(guān)鍵詞】海馬神經(jīng)元 原代培養(yǎng) 微管相關(guān)蛋白- 細(xì)胞鑒定
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81072260)
【分類號(hào)】:R338
【正文快照】: 海馬和皮質(zhì)神經(jīng)元被廣泛用于研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)極化、軸突、樹(shù)突外生長(zhǎng)和突觸的生長(zhǎng)和功能。培養(yǎng)這些神經(jīng)元的優(yōu)點(diǎn)之一就是容易極化,在很低密度的二維底物上形成有鑒別性的樹(shù)突和軸突。而且,如果提供神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,這些神經(jīng)元可以生長(zhǎng)和形成有功能性的突觸連接并且可以存

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 嚴(yán)燦;宋清;吳麗麗;潘毅;劉書(shū)考;;加味四逆散對(duì)皮質(zhì)酮、谷氨酸致PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用研究[J];安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2008年05期

2 楊慶利;陳浩;韋平;;馬立克氏病病毒可感染雞大腦小膠質(zhì)細(xì)胞并促進(jìn)其Toll樣受體15和1LB基因的轉(zhuǎn)錄[J];病毒學(xué)報(bào);2011年01期

3 蔡志平;李朝暉;石素琴;崔慧先;霍東升;石巖;賈建新;;原代SD大鼠海馬神經(jīng)元掃描電鏡形態(tài)學(xué)特點(diǎn)[J];包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年01期

4 胡慧;王平;胡亞萍;石和元;孔明望;劉萍;;溫膽湯改良方對(duì)Alzheimer病細(xì)胞模型JNK、c-jun磷酸化水平的影響[J];中華中醫(yī)藥雜志;2008年01期

5 尚美;郁衛(wèi)東;梁蓉;楊麗君;張峰;郭靜竹;;一個(gè)唐氏綜合征下調(diào)表達(dá)基因片段的克隆、鑒定及細(xì)胞定位分析[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年04期

6 王敏;崔雅莉;李文軍;徐世文;李術(shù);;王鴿腦神經(jīng)細(xì)胞原代分離培養(yǎng)與純化的研究[J];東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2008年03期

7 崔劍,陶國(guó)才,易斌,魯開(kāi)智,文欣榮,陳杰,王震;抑肽酶預(yù)處理對(duì)凝血酶誘導(dǎo)的星形細(xì)胞凋亡的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年22期

8 李奎,馮杰,許梓榮;NMDA對(duì)培養(yǎng)的大鼠腺垂體細(xì)胞分泌生長(zhǎng)激素影響的研究[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2004年03期

9 王鴻;張偉;黃麗輝;雷靂;矯健;王士杰;;胚胎大鼠背根神經(jīng)節(jié)酶消化法的評(píng)價(jià)[J];中國(guó)耳鼻咽喉頭頸外科;2011年04期

10 黃山,林玲,鄭志z,

本文編號(hào):1003497


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