豬流感（Swine influenza, SI）是由豬流感病毒（Swine Influenza Virus，SIV）引起的一種嚴重影響?zhàn)B豬業(yè)的急性、呼吸系統(tǒng)疾病，是規(guī)�；B(yǎng)豬場普遍發(fā)生的傳染病之一。其特點是發(fā)病率高，死亡率低，但常繼發(fā)其他細菌和病毒的感染，導(dǎo)致疾病加重，死亡率增高。同時，豬還可以作為流感病毒種間傳播的中間宿主，因而具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。目前防治豬流感的措施主要是疫苗免疫和使用抗病毒藥物，但由于流感病毒驚人的變異速度以及西藥所產(chǎn)生的耐藥性，對于該病的防治面臨嚴峻的考驗。因此，篩選安全有效的抗豬流感病毒中藥對養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展具有重要意義。 本研究的目的在于篩選具有抗流感病毒作用的中藥，從中選擇抑制效果顯著的藥物并對其抗病毒機制進行初步探索，研究結(jié)果將為進一步研究以及開發(fā)有效、特異的防治流感病毒感染的藥物奠定實驗基礎(chǔ)。 方法：利用對流感病毒敏感的犬腎細胞株（MDCK細胞）建立抗豬流感病毒單味中藥的體外篩選模型。以常規(guī)水煎法提取中藥的有效成分，制備成0.5g/ml的提取液，以利巴韋林為陽性對照藥物，用細胞病變（CPE）觀察法、噻唑藍鹽微量酶反應(yīng)比色法（MTT法）檢測細胞活性，對...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
符號說明 中文摘要 Abstract 1 引言
1.1 豬流感研究進展
    1.1.1 病原學(xué)
    1.1.2 流行特點
    1.1.3 癥狀
    1.1.4 病理變化
    1.1.5 豬流感病毒種種間傳播及公共衛(wèi)生意義
1.2 豬流感防治研究進展
    1.2.1 豬流感疫苗研究進展
    1.2.2 抗流感病毒藥物研究進展
1.3 中藥抗病毒作用研究進展
    1.3.1 抗病毒中藥及其臨床應(yīng)用現(xiàn)狀
    1.3.2 中藥抗病毒作用機理方面的研究
1.4 藥物篩選模型研究進展
    1.4.1 整體水平篩選模型
    1.4.2 組織器官水平篩選模型
    1.4.3 細胞、分子水平藥物篩選模型
1.5 本課題研究的目的意義和設(shè)計思路
    1.5.1 建立抗豬流感病毒藥物的篩選模型
    1.5.2 備篩藥物的選擇及提取方法的確定
    1.5.3 抗豬流感病毒藥物篩選試驗 2 材料與方法
2.1 試驗材料
    2.1.1 病毒
    2.1.2 單味中草藥
    2.1.3 利巴韋林
    2.1.4 細胞
    2.1.5 主要試劑
    2.1.6 主要儀器設(shè)備
2.2 相關(guān)溶液制備
2.3 試驗方法
    2.3.1 抗病毒豬流感病毒單味中藥篩選模型的建立
    2.3.2 中藥水煎劑在 MDCK 毒性作用的測試
    2.3.3 利巴韋林注射劑在 MDCK 細胞上毒性作用的測試
    2.3.4 抗病毒中藥在 MDCK 細胞上的初步篩選
    2.3.5 中藥作用機制的初步探索試驗
    2.3.6 藥物最小有效量的測定
    2.3.7 統(tǒng)計學(xué)分析 3 結(jié)果與分析
3.1 豬流感病毒血凝效價測定結(jié)果
3.2 豬流感病毒致 MDCK 細胞病變情況觀察
3.3 豬流感病毒在 MDCK 細胞上毒力的測定
3.4 中藥水煎劑在 MDCK 細胞上毒性作用的結(jié)果
    3.4.1 同一種中藥不同濃度對細胞的毒性試驗
    3.4.2 不同藥物對細胞的毒性試驗
3.5 利巴韋林對 MDCK 毒性作用的研究結(jié)果
3.6 中藥水煎劑抗病毒效果初步篩選的結(jié)果
3.7 藥物作用機制的初步探索結(jié)果
    3.7.1 先給藥再感染病毒組試驗結(jié)果
    3.7.2 先感染病毒再給藥組試驗結(jié)果
    3.7.3 藥物與病毒混合后同時作用于細胞試驗結(jié)果
    3.7.4 藥物與病毒混合后作用 2h 再加入細胞
    3.7.5 各種藥物不同作用方式效果
3.8 藥物最小有效劑量的測定
3.9 藥物治療指數(shù) 4 討論 5 結(jié)論 參考文獻 致謝



本文編號：4031157