使用豬源器官進(jìn)行異種移植被認(rèn)為是解決當(dāng)前人源供體器官短缺,治療終末期器官疾病的有效方法之一。而廣西巴馬小型豬是采用閉鎖純繁近交方式選育的廣西地方特有的小型豬品種,是一種遺傳穩(wěn)定,性狀優(yōu)良的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,可作為異種移植的理想器官供體。但是,由于廣西巴馬小型豬體內(nèi)普遍存在豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒(Porcine endogenous retrovirus, PERV),能夠以前病毒DNA形式整合進(jìn)宿主細(xì)胞基因組中,并隨細(xì)胞染色體復(fù)制而復(fù)制。PERV在體外可以感染多種人源細(xì)胞的發(fā)現(xiàn),引起了人們對(duì)異種移植安全性的廣泛關(guān)注。因此,有必要開展廣西巴馬小型豬PERV的基礎(chǔ)研究,了解其感染機(jī)制,以評(píng)估PERV的病原安全性。 本研究采用PCR技術(shù),擴(kuò)增獲得4條覆蓋廣西巴馬小型豬PERV全基因的重疊片段,經(jīng)拼接獲得1條完整的廣西巴馬小型豬PERV (PERV-BM)全基因序列,大小為8774bp。遺傳進(jìn)化分析表明PERV-BM屬于PERV A亞型；序列分析發(fā)現(xiàn),PERV-BM的5'UTR的啟動(dòng)子和增強(qiáng)子區(qū)域分別位于400-467bp與313-432bp位置；對(duì)推導(dǎo)氨基酸序列分析則發(fā)現(xiàn)病毒的env蛋白中含有15個(gè)可...

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1PERV病毒粒子結(jié)構(gòu)示意圖

為棒狀或球狀，由蛋白質(zhì)和螺旋狀的核糖核酸組成[ia5]。構(gòu)由外向內(nèi)依次為：外膜（Outerenvelope)，包括表面蛋白（SU)和穿內(nèi)膜（Innermembrane)，為衣殼蛋白（Capsidprotein);最內(nèi)層為病毒核(圖1)。

圖2FEAV基因組結(jié)構(gòu)

廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文 廣西巴馬<N型豬PERV全基因擴(kuò)增與序列分析及cDNA克隆的構(gòu)建以及其它物種細(xì)胞；不是所有豬的基因組中都攜帶PERV-C，因其具有嗜親性，所以僅能感染豬源細(xì)胞。逆轉(zhuǎn)錄酶為PERV最重要的酶，PERV感染宿主后，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下以病毒RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成前....

圖3PERV感染模式圖

圖3PERV感染模式圖Fig.3PatterningofPERVinfectionERV最早是由Armstrong等[46]于1971年在PK-15細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)的。在此之后，nig和？[37丨6[等[47，48]從豬淋巴瘤細(xì)胞系以及經(jīng)福射誘導(dǎo)的豬白血病細(xì)胞中第一次分PE....

圖4抗PERV復(fù)制的細(xì)胞?限制因子作用模式圖

(ApolipoproteinBmRNA-editingcatalyticpolypeptides,APOBEC)具有胞嘧唆脫氨酶活性，能破壞病毒DNA的合成[79’81"?3](圖4)。對(duì)這些抗病毒因子進(jìn)行研究，有助于抗PERV藥物的研發(fā)，為提高異種移植的安全性提供....

本文編號(hào)：4014682