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鵝ERα/β基因克隆及在肝細(xì)胞脂肪合成與轉(zhuǎn)運(yùn)中的功能初探

發(fā)布時間:2024-12-11 01:19
  哺乳動物脂肪合成與轉(zhuǎn)運(yùn)異常將會導(dǎo)致甘油三酯在肝臟內(nèi)過量堆積,使得肝臟發(fā)生脂肪變性,從而使肝臟發(fā)生病理變化,雌二醇能夠通過其受體(ERα/β)的介導(dǎo)調(diào)節(jié)肝臟脂肪的合成與轉(zhuǎn)運(yùn)過程。然而,鵝肝臟脂肪變性卻不會引起病理變化,且ERα/β對鵝肝細(xì)胞的脂肪合成與轉(zhuǎn)運(yùn)作用還未見報道。本試驗(yàn)通過基因克隆獲得鵝ERα/β基因CDS區(qū)序列;利用qPCR檢測ERα/β的組織特異性以及在鵝肝臟中的發(fā)育性表達(dá);并在細(xì)胞水平添加雌二醇處理正常和誘導(dǎo)變性后的鵝肝細(xì)胞,檢測ERα/β及脂肪合成與轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因的mRNA變化情況,初步探索ERα/β在鵝肝臟脂肪合成與轉(zhuǎn)運(yùn)中的作用。主要研究結(jié)果如下:(1)鵝ERα基因部分CDS區(qū)序列1755bp,編碼585個氨基酸,ERβ基因全長CDS區(qū)序列1704bp,共編碼568個氨基酸。同源性及進(jìn)化樹結(jié)果顯示,鵝ERα/β基因與鳥類同源性最高,與鳥類進(jìn)化關(guān)系最近。(2)在不同組織中,ERα主要在垂體、肝臟和卵巢中高表達(dá),ERβ主要在腎臟和肝臟中高表達(dá)。(3)在1-6周齡鵝肝臟中,ERα在1-3周齡表達(dá)量有下降趨勢(p>0.05),4-6周齡表達(dá)迅速上升(p<0.05),而E...

【文章頁數(shù)】:75 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1雌激素受體A/B、C、D、E/F區(qū)結(jié)構(gòu)及其磷酸化位點(diǎn)[67]

圖1-1雌激素受體A/B、C、D、E/F區(qū)結(jié)構(gòu)及其磷酸化位點(diǎn)[67]

可變性大,且能與特定啟動子結(jié)合的特點(diǎn),然而ERβ卻缺乏A,這可能與它執(zhí)行不同于ERα的功能相關(guān),并且ERα的AF1功能區(qū)對激素反應(yīng)元件(estrogenresponseelement,ERE)的刺激反應(yīng)活躍,可以基因的表達(dá),而ERβ的AF-1功能區(qū)的這種反....


圖1-2雌激素受體信號通路[67]

圖1-2雌激素受體信號通路[67]

發(fā)揮與其他信號通路的作用[69],包括與IGF-1、TGF-α、EGF等生長因子和TNF-α腫瘤壞死因子的相互作用,以及ER自身的磷酸化。DMIgnartrowbridge[70]等研究表明,用EGF處理卵巢切除后的小鼠,出現(xiàn)了ER的磷酸化現(xiàn)象。OsborneCK....


圖3-1RNA完整性檢測Fig3-1RNAintegritydetection

圖3-1RNA完整性檢測Fig3-1RNAintegritydetection

圖3-1RNA完整性檢測Fig3-1RNAintegritydetection物信息學(xué)分析接結(jié)果及鑒定ptionPCR(RT-PCR)擴(kuò)增及后續(xù)克后(vecscreen)利用DNAStarSeNCBI比對后獲得ERα部分CDS區(qū)p。其中ERα基因所獲....


圖3-2ERα基因核苷酸序列和翻譯的氨基酸序列

圖3-2ERα基因核苷酸序列和翻譯的氨基酸序列

22圖3-2ERα基因核苷酸序列和翻譯的氨基酸序列Fig3-2ThenucleotidesequencesandaminoacidsequencesofERα注:圖中數(shù)字表示核苷酸(氨基酸)所在序列中的位置Note:Thenumberofpictur....



本文編號:4015959

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