布魯氏菌病是由布魯氏菌(Brucella)引起的一種人畜共患傳染病,可引發(fā)病畜流產(chǎn)和睪丸炎,給畜牧業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。目前許多國家對該病采取了相應(yīng)的防控措施,如疫苗免疫、撲殺等,但收效甚微;弱毒疫苗免疫易感畜群,血清學(xué)檢測通常呈陽性,不能與自然感染動物進行有效區(qū)分,不利于畜群的凈化,同時某些疫苗仍具有一定的毒力,仍能引發(fā)孕畜的流產(chǎn);布魯氏菌019株是上世紀80年代在新疆本地分離的1株綿羊附睪種布魯氏菌,以其為研究對象進行新型布魯氏菌疫苗的研究具有重要的現(xiàn)實意義。目的:通過物理和化學(xué)的方法對布魯氏菌019株進行誘導(dǎo)突變,分析生長狀況及毒力的變化。同時針對布魯氏菌磷酸葡萄糖變位酶基因(pgm)定向構(gòu)建布魯氏菌019株pgm缺失株,并對其毒力及免疫效果進行評價;探討布魯氏菌019株致弱后作為疫苗株的潛力。方法:(1)布魯氏菌019株分別采用吖啶橙(0.1g/L和0.05g/L)、苯酚(0.1g/L和0.05g/L)和紫外照射(5min和2min)處理,每組處理50次,測定各處理組細菌生長曲線及代時變化;腹腔注射小鼠測定脾臟指數(shù)和脾臟菌落形成單位(CFU);(2)分別以熱滅活的布魯氏菌019...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮略表
引言
第一章 文獻綜述 布魯氏菌的研究進展
    1 布魯氏菌主要毒力因子
    2 布魯氏菌的致病與免疫機理
        2.1 布魯氏菌的致病機制
        2.2 布魯氏菌的免疫機制
    3 布魯氏菌病的臨床與診斷
        3.1 布魯氏菌病的臨床癥狀
        3.2 布魯氏菌病的診斷
        3.3 布魯氏菌病的防控
    4 布魯氏菌疫苗
        4.1 布魯氏菌滅活疫苗
        4.2 布魯氏菌弱毒疫苗
        4.3 新型布魯氏菌疫苗
第二章 實驗部分
    實驗一 布魯氏菌019株弱化與毒力評價
        摘要
        1. 材料方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2. 結(jié)果
            2.1 生長能力變化比較
            2.2 小鼠脾臟指數(shù)的變化
            2.3 小鼠脾臟細菌計數(shù)
        3 討論
    實驗二 布魯氏菌 019?pgm基因缺失株的構(gòu)建
        摘要
        1 材料方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 pgm基因上、下游同源臂的擴增
            2.2 pgm基因上下游同源臂的融合
            2.3 SacB基因的擴增
            2.4 重組質(zhì)粒酶切鑒定
            2.5 重組自殺載體ppS酶切鑒定
            2.6 布魯氏菌 019Δpgm缺失株同源重組交換子的篩選
        3 討論
    實驗三 布魯氏菌 019?pgm基因缺失株毒力及免疫效果的初步評價
        摘要
        1 材料方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 小鼠脾臟指數(shù)比較
            2.2 脾臟細菌計數(shù)
            2.3 小鼠體液免疫水平分析
            2.4 細胞免疫水平分析
        3 討論
實驗總結(jié)
創(chuàng)新點
參考文獻
致謝
作者簡介
導(dǎo)師評閱表



本文編號：3810595