乙型肝炎病毒對(duì)單核細(xì)胞來(lái)源的樹突狀細(xì)胞表型及自噬作用的影響研究
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【摘要】:目的:探尋乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染對(duì)單核細(xì)胞來(lái)源的樹突狀細(xì)胞(dendritic cell, DC)自噬作用的影響,以及自噬的變化與樹突狀細(xì)胞表型變化的關(guān)系。方法:用免疫磁珠方法分選健康志愿者、慢性乙型肝炎病毒感染者外周血CD14+單核細(xì)胞,經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)成為未成熟樹突狀細(xì)胞(immaturate dendritic cell, imDC)后,分別用單純1640培養(yǎng)液(control組)、脂多糖(lipopolysaccharide, LPS) (LPS組)HepG2.2.15上清(HBV組)、HepG2上清(HepG2組)刺激imDC促使其成熟。用流式細(xì)胞檢測(cè)術(shù)檢測(cè)刺激后DC表型的變化,western blot、免疫熒光術(shù)檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白(LC3、Atg-5)變化情況。結(jié)果:培養(yǎng)10天后DC直徑明顯大于其前體單核細(xì)胞;其胞內(nèi)的顆粒明顯多于剛分選出來(lái)的單核細(xì)胞。正常人和HBV慢性感染者來(lái)源DC有相似的形態(tài)學(xué)發(fā)展過(guò)程。健康人來(lái)源的DC經(jīng)HBV刺激后,與對(duì)照組相比較,表達(dá)HLA-DR及CD80、CD83、CD86增高,其中CD83的表達(dá)較LPS刺激后降低;慢性HBV感染者DC與對(duì)照組相比,高表達(dá)HLA-DR及CD80、CD86共刺激分子,低表達(dá)CD83分子(P0.05)。免疫熒光共聚焦和、vestern blot檢測(cè)顯示,健康人來(lái)源和慢性HBV感染者來(lái)源的DC與未刺激組相比,在HBV刺激后自噬相關(guān)蛋白LC3、Atg-5表達(dá)均增高(P0.05),與HBV刺激后HLA-DR、CD80、CD86表達(dá)水平增高變化相符。結(jié)論:持續(xù)的HBV感染對(duì)單核細(xì)胞發(fā)育的DC的形態(tài)和顆粒無(wú)明顯影響。HBV感染DC后,細(xì)胞自噬作用增強(qiáng),且能夠使HLA-DR、CD80、CD86表達(dá)水平增高,CD83水平表達(dá)降低。
【關(guān)鍵詞】:乙型病毒性肝炎 樹突狀細(xì)胞 自噬作用
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R512.62
【目錄】:
- 符號(hào)說(shuō)明5-7
- 中文摘要7-9
- ABSTRACT9-11
- 前言11-13
- 1 材料13-17
- 2 實(shí)驗(yàn)方法17-24
- 3 結(jié)果24-39
- 4 討論39-46
- 參考文獻(xiàn)46-50
- 全文總結(jié)50-52
- 文獻(xiàn)綜述52-61
- 參考文獻(xiàn)57-61
- 致謝61-62
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文62
- 參加的學(xué)術(shù)會(huì)議62
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