本文關(guān)鍵詞：VOCs指紋圖快速質(zhì)譜鑒定結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群的研究

  更多相關(guān)文章： 質(zhì)譜 結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群 結(jié)核病 VOCs 揮發(fā)性代謝產(chǎn)物

【摘要】：目的:探討質(zhì)譜技術(shù)對結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群相關(guān)標(biāo)記物檢測和鑒定,判斷VOCs標(biāo)記物及VOCs指紋圖對結(jié)核病的診斷和鑒別診斷價值。方法:采用表面解吸常壓化學(xué)電離質(zhì)譜(SDAPCI-MS)技術(shù)對結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTC)及其相似菌屬如非結(jié)核分枝桿菌(Nontuberculosis mycobacteria,NTM)、諾卡氏菌、馬紅球菌、鏈霉菌及齲齒羅氏菌的培養(yǎng)基上層行VOCs檢測,同時對臨床常見細(xì)菌和真菌檢測,以確定MTC特異性標(biāo)記物及釋放時間規(guī)律。通過碰撞誘導(dǎo)解離(CID)技術(shù)鑒定特異譜峰的分子量和分子結(jié)構(gòu)式,并用Matlab對其行主成分分析(PCA)以評估不同種屬細(xì)菌VOCs之間的關(guān)系。結(jié)果:質(zhì)譜檢測所得VOCs指紋圖可準(zhǔn)確鑒別MTC與多種在生物學(xué)特性和臨床感染上的相似菌屬,主成分分析可將所有菌明顯的相互區(qū)分。煙酸甲酯(m/z138)特異性存在于MTC培養(yǎng)基上層,在培養(yǎng)第9天,肉眼可見菌落之前即可檢出。m/z 140和m/z 152在MTC培養(yǎng)基上層中含量顯著高于其他菌屬(P0.01,Fisher’s精確檢驗),是MTC相關(guān)標(biāo)記物。本實驗中所有菌共同產(chǎn)生的VOCs主要有2-苯乙醇(m/z 122),甲酸乙酯(m/z 74),丙酸(m/z 76),苯甲酸(m/z 108),普遍存在于其他細(xì)菌培養(yǎng)基上層,是細(xì)菌在代謝過程中有機(jī)酸或醇類的積聚。結(jié)論:SDAPCI-MS通過檢測微生物的揮發(fā)性代謝產(chǎn)物,快速、高效的作出MTC的判斷,確定了MTC的特異性標(biāo)記物煙酸甲酯。VOCs指紋圖可用于相似細(xì)菌“氣味”的鑒別。
【關(guān)鍵詞】：質(zhì)譜 結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群 結(jié)核病 VOCs 揮發(fā)性代謝產(chǎn)物
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R446.5;R52
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 英文縮略詞表7-9
• 第1章 引言9-11
• 第2章 材料與方法11-17
• 2.1 材料11-12
• 2.1.1 菌株來源11
• 2.1.2 主要儀器和試劑11-12
• 2.2 方法12-17
• 2.2.1 培養(yǎng)基的配置12-13
• 2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)菌株的復(fù)蘇13
• 2.2.3 菌株鑒定和保存13
• 2.2.4 樣品的準(zhǔn)備13-14
• 2.2.5 質(zhì)譜檢測14-16
• 2.2.6 數(shù)據(jù)處理16-17
• 第3章 結(jié)果17-26
• 3.1 質(zhì)譜檢測結(jié)果17-23
• 3.1.1 MTC培養(yǎng)基上層VOCs檢測17-19
• 3.1.2 MTC標(biāo)記物的鑒定19-23
• 3.2 MTC與NTM，諾卡氏菌屬，馬紅球菌和鏈霉菌，羅氏菌的對比23-26
• 3.2.1 指紋圖對比23
• 3.2.2 主成分分析對比23-26
• 第4章 討論26-30
• 第5章 結(jié)論30-31
• 致謝31-32
• 參考文獻(xiàn)32-35
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果35-36
• 綜述 基于mVOCs為標(biāo)記物快速病原菌鑒定的研究進(jìn)展36-50
• 參考文獻(xiàn)46-50

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：674876