本文關(guān)鍵詞：γδT細(xì)胞在細(xì)粒棘球蚴感染中作用的初步研究

  更多相關(guān)文章： 細(xì)粒棘球蚴 γδT細(xì)胞 感染

【摘要】：目的通過(guò)研究包蟲(chóng)病患者以及小鼠感染模型中γδT淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng),探討γδT淋巴細(xì)胞在包蟲(chóng)感染免疫作用機(jī)制,為進(jìn)一步探討抗包蟲(chóng)病的免疫機(jī)制和包蟲(chóng)病的防治提供新的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。方法(一)檢測(cè)包蟲(chóng)病患者中γδT細(xì)胞的變化:流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)包蟲(chóng)病患者和正常人γδT細(xì)胞數(shù)目和比例;流式分選γδT細(xì)胞并用anti-TCRγδ+IL-2刺激后觀察γδT細(xì)胞體外擴(kuò)增培養(yǎng);純化得到的r Eg14-3-3進(jìn)行SDS-PAGE電泳;對(duì)純化獲得的r Eg14-3-3進(jìn)行western blot鑒定;MTT法和流式檢測(cè)不同抗原(囊液,囊壁,原頭蚴,r Eg14-3-3)刺激γδT細(xì)胞增殖能力;ELISA檢測(cè)不同抗原(囊液,囊壁,原頭蚴,r Eg14-3-3)刺激慢性包蟲(chóng)病患者和正常人γδT細(xì)胞后IFN-γ,TNF-α,IL17A,TGF-β和IL-4細(xì)胞因子的表達(dá);q RT-PCR檢測(cè)IFN-γ,Perforin,Granzyme A and B,和Fas L m RNA的表達(dá)。(二)檢測(cè)小鼠繼發(fā)感染模型中γδT細(xì)胞的變化:從包蟲(chóng)病手術(shù)患者包囊中分離原頭蚴,經(jīng)腹腔注射感染BALB/c小鼠;建立細(xì)粒棘球蚴繼發(fā)感染動(dòng)物模型;感染模型小鼠中小腸組織IEL淋巴細(xì)胞的分離,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)IEL+γδT細(xì)胞數(shù)量及表型。結(jié)果細(xì)粒棘球蚴感染人后??T細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果:從健康人與病人外周血中分離PBMCs,通過(guò)流式檢測(cè)發(fā)現(xiàn),病人外周血中??T細(xì)胞無(wú)論從絕對(duì)數(shù)量還是從比例以及V?2亞型都明顯下降(有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)經(jīng)流分選出??T細(xì)胞后,加入anti-TCRγδ+IL-2可促進(jìn)其體外擴(kuò)增;對(duì)體外擴(kuò)增的??T細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),??T細(xì)胞對(duì)原頭蚴粗抗原刺激能夠產(chǎn)生明顯的增殖活化,而對(duì)囊液、囊壁以及重組抗原14-3-3無(wú)應(yīng)答(P0.01);對(duì)于經(jīng)不同成分刺激后,檢測(cè)發(fā)現(xiàn)對(duì)于原頭蚴刺激??T細(xì)胞細(xì)胞因子IFN-?與TNF-α顯著的升高(P0.01);??T細(xì)胞在原頭蚴抗原刺激后,細(xì)胞毒作用分子(穿孔素,顆粒酶A和B,IFN-γ和Fas L)的m RNA表達(dá)水平明顯上調(diào),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。小鼠繼發(fā)感染細(xì)粒棘球蚴模型中??T細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果:原頭蚴腹腔感染的模型小鼠建立成功;IEL細(xì)胞數(shù)量明顯減少(P0.05);小腸IEL+γδT細(xì)胞也明顯減少(P0.05)。結(jié)論體外實(shí)驗(yàn)證實(shí),在細(xì)粒棘球蚴患者中,原頭蚴粗抗原可有效誘導(dǎo)外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)中γδT細(xì)胞擴(kuò)增,其主要效應(yīng)分子IFN-γ的m RNA表達(dá)及分泌明顯增高,另外原頭蚴粗抗原可刺激穿孔素,顆粒酶A和B,Fas L的m RNA表達(dá)水平明顯增高。說(shuō)明在細(xì)粒棘球蚴感染中γδT細(xì)胞參加了宿主的免疫應(yīng)答,并具有抗感染作用。體內(nèi)試驗(yàn)證實(shí),細(xì)粒棘球蚴患者PBMC中γδT細(xì)胞(尤其是Vδ2+γδT細(xì)胞)明顯降低,在細(xì)粒棘球蚴感染小鼠模型中,慢性感染階段小鼠的小腸IEL+γδT細(xì)胞與正常對(duì)照組相比顯著下降,與此同時(shí),小腸IEL亦明顯下調(diào)。說(shuō)明在慢性感染階段γδT細(xì)胞受到抑制。
【關(guān)鍵詞】：細(xì)粒棘球蚴 γδT細(xì)胞 感染
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R532.32
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 縮寫(xiě)詞簡(jiǎn)表9-12
• 前言12-17
• 材料與方法17-35
• 結(jié)果35-49
• 討論49-52
• 結(jié)論52-53
• 參考文獻(xiàn)53-56
• 綜述56-71
• 綜述參考文獻(xiàn)63-71
• 致謝71-72
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文72-73
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷73

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鐘萬(wàn)劍;突尼斯羊肝臟中的細(xì)粒棘球蚴:宿主年齡的影響[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(寄生蟲(chóng)病分冊(cè));2000年01期

2 林仁勇,丁劍冰,溫浩,盧曉梅;新疆細(xì)粒棘球蚴95基因的克隆及同源性分析[J];中國(guó)寄生蟲(chóng)病防治雜志;2002年05期

3 王婭娜,趙嘉慶,丁淑琴,王健,趙巍;細(xì)粒棘球蚴中國(guó)大陸株鐵蛋白基因分子克隆和序列分析[J];寧夏醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年04期

4 張靜;趙嘉慶;王婭娜;張焱;王淑靜;王潔;高嶺;趙巍;;細(xì)粒棘球蚴中國(guó)大陸株親肌肉基因分子克隆和序列分析[J];寧夏醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2006年03期

5 王俊安;鄒曉毅;葉彬;張成武;趙發(fā)生;;高強(qiáng)度聚焦超聲輻照后細(xì)粒棘球蚴囊壁的病理變化[J];中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志;2007年06期

6 葉瑛,周淑琴,古麗娜;新疆阿勒泰居民細(xì)粒棘球蚴感染血清流行病學(xué)調(diào)查[J];地方病通報(bào);1989年04期

7 溫浩;姚秉禮;鄒培范;丁兆勛;;丙硫咪唑?qū)π∈蠹?xì)粒棘球蚴作用的觀察[J];新疆醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1989年02期

8 溫浩,姚秉禮,鄒培范,楊興忠;四種小鼠對(duì)細(xì)粒棘球蚴感染情況觀察[J];地方病通報(bào);1990年03期

9 王虎;青藏高原牦牛原發(fā)性細(xì)粒棘球蚴的超微結(jié)構(gòu)觀察[J];中國(guó)人獸共患病雜志;1990年05期

10 溫浩,姚秉禮,鄒培范,丁兆勛;阿本達(dá)唑?qū)π∈蠹?xì)粒棘球蚴的作用[J];寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志;1990年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 任仲軒;馬福貴;;25%高滲鹽水滅活細(xì)粒棘球蚴療效的初步研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)感染病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

2 牛榮麗;莫紅梅;薛弘燮;;阿苯噠唑免疫脂質(zhì)體治療小鼠細(xì)粒棘球蚴的效果觀察[A];中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)第八次全國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2001年

3 陳剛;錢(qián)中希;程秉銓;劉立方;陳潞;劉輝宗;;小鼠細(xì)粒棘球蚴的超微結(jié)構(gòu)觀察[A];第四次全國(guó)電子顯微學(xué)會(huì)議論文摘要集[C];1986年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 呂海龍;MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在細(xì)粒棘球蚴生長(zhǎng)及凋亡中的作用[D];華中科技大學(xué);2014年

2 侯秋蓮;應(yīng)用SSH技術(shù)研究氧化脅迫下細(xì)粒棘球蚴基因的表達(dá)[D];新疆大學(xué);2008年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 何鑫;γδT細(xì)胞在細(xì)粒棘球蚴感染中作用的初步研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2015年

2 劉婧;多頻聚焦超聲體外治療小鼠細(xì)粒棘球蚴的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘭州大學(xué);2009年

3 李建輝;肝細(xì)粒棘球蚴周?chē)w維囊壁鈣化機(jī)制及意義的初步研究[D];石河子大學(xué);2006年

4 黃福強(qiáng);青海部分地區(qū)牦牛源細(xì)粒棘球蚴mtDNA基因多態(tài)性分析[D];青海大學(xué);2013年

5 王婭娜;細(xì)粒棘球蚴中國(guó)大陸株鐵蛋白基因的克隆、重組表達(dá)、純化及免疫學(xué)特性鑒定[D];寧夏醫(yī)學(xué)院;2006年

6 李振環(huán);骨細(xì)粒棘球蚴動(dòng)物模型放射性治療的試驗(yàn)研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2009年

7 印雙紅;TGF-β抑制自然殺傷細(xì)胞在細(xì)粒棘球蚴免疫逃逸作用中的初步探討[D];石河子大學(xué);2014年

8 丁淑琴;細(xì)粒棘球蚴（中國(guó)大陸株）熱休克蛋白70重組疫苗的研究[D];寧夏醫(yī)學(xué)院;2006年

9 安然;IL-10在細(xì)粒棘球蚴感染大鼠過(guò)敏反應(yīng)中的水平及意義的初步研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2013年

10 師志云;細(xì)粒棘球蚴（中國(guó)大陸株）重組EgP-29抗原的克隆、表達(dá)、免疫保護(hù)力及其免疫機(jī)制的研究[D];寧夏醫(yī)學(xué)院;2008年

，

本文編號(hào)：644565