本文關(guān)鍵詞：日本血吸蟲抗原SjE16.7激活巨噬細(xì)胞的表型鑒定與功能研究

  更多相關(guān)文章： SjE16.7 巨噬細(xì)胞 血吸蟲 免疫反應(yīng)

【摘要】：日本血吸蟲病是我國的重大傳染病之一。血吸蟲蟲卵所誘導(dǎo)的蟲卵肉芽腫是血吸蟲病的主要病理表現(xiàn),其形成過程與宿主免疫反應(yīng)密切相關(guān)。研究血吸蟲蟲卵誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)的過程與機(jī)制,對血吸蟲病的防治具有重要意義。SjE16.7為日本血吸蟲蟲卵特異性抗原。以往的研究發(fā)現(xiàn),SjE16.7對固有免疫細(xì)胞具激活作用,但其具體的機(jī)制尚不十分明確。本課題以巨噬細(xì)胞為研究對象,對SjE16.7激活巨噬細(xì)胞的表型與功能進(jìn)行了深入探索。體外遷移實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明,SjE16.7可顯著促進(jìn)巨噬細(xì)胞的趨化,并且SjE16.7特異性抗體可明顯抑制血吸蟲蟲卵可溶性抗原(SEA)所誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞趨化,提示SjE16.7在血吸蟲蟲卵招募免疫細(xì)胞的過程中起著重要作用。實(shí)時(shí)定量PCR與ELISA檢測證實(shí),SjE16.7刺激巨噬細(xì)胞,使其產(chǎn)生和分泌細(xì)胞因子(IL-10,IL-12,IL-6,TNF-α)的能力明顯增加。以流式細(xì)胞術(shù)分析巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志后發(fā)現(xiàn),SjE16.7可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞表面MHCⅡ類分子的表達(dá)顯著增高,而巨噬細(xì)胞M1和M2a極化相關(guān)分子CD16/32與CD206的表達(dá)并無明顯變化。應(yīng)用Western Blot檢測SjE16.7刺激巨噬細(xì)胞后細(xì)胞內(nèi)信號通路結(jié)果表明,SjE16.7可顯著激活細(xì)胞內(nèi)JNK與NF-κB信號通路。SjE16.7誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞活化可被酪氨酸蛋白激酶抑制劑(Genistein)所抑制,提示SjE16.7可能通過酪氨酸蛋白激酶相關(guān)受體發(fā)揮作用。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,利用小鼠血吸蟲蟲卵肺肉芽腫模型,我們發(fā)現(xiàn)SjE16.7抗體可有效抑制蟲卵肉芽腫的形成,使肉芽腫體積減小、炎癥細(xì)胞浸潤減少。本研究結(jié)果表明,SjE16.7是血吸蟲蟲卵中的一個(gè)重要致病因子,在蟲卵誘導(dǎo)的免疫病理反應(yīng)中起著重要作用。
【關(guān)鍵詞】：SjE16.7 巨噬細(xì)胞 血吸蟲 免疫反應(yīng)
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R532.21
【目錄】：

• 論文創(chuàng)新點(diǎn)6-7
• 摘要7-8
• ABSTRACT8-11
• 中英文對照11-13
• 緒論13-15
• 第1章 SJE16.7 在巨噬細(xì)胞活化中的作用15-42
• 1.1 引言15-16
• 1.2 實(shí)驗(yàn)材料16-22
• 1.2.1 實(shí)驗(yàn)動物、細(xì)胞16
• 1.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑及其配制16-21
• 1.2.3 主要實(shí)驗(yàn)器材及儀器21-22
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法22-31
• 1.3.1 固體培養(yǎng)基22
• 1.3.2 GST-SjE16.7 的表達(dá)與純化22-23
• 1.3.3 His-SjE16.7 的表達(dá)與純化23-24
• 1.3.4 巨噬細(xì)胞Transwell實(shí)驗(yàn)24-25
• 1.3.5 BCA測定蛋白濃度25
• 1.3.6 細(xì)胞復(fù)蘇25
• 1.3.7 細(xì)胞凍存25-26
• 1.3.8 細(xì)胞計(jì)數(shù)26
• 1.3.9 小鼠成纖維細(xì)胞（L929）培養(yǎng)26
• 1.3.10 骨髓巨噬細(xì)胞的提取與培養(yǎng)26-27
• 1.3.11 抗原刺激巨噬細(xì)胞27
• 1.3.12 骨髓巨噬細(xì)胞的mRNA的提取及Real-time PCR檢測被刺激骨髓巨噬細(xì)胞的基因表達(dá)水平27-29
• 1.3.13 ELISA檢測抗原刺激骨髓巨噬細(xì)胞的免疫反應(yīng)29
• 1.3.14 Western檢測抗原刺激骨髓巨噬細(xì)胞蛋白表達(dá)水平29-30
• 1.3.15 流式檢測技術(shù)30
• 1.3.16 Genistein抑制實(shí)驗(yàn)30
• 1.3.17 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析30-31
• 1.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-39
• 1.4.1 SjE16.7 誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞移行31-33
• 1.4.2 SjE16.7 刺激巨噬細(xì)胞分泌細(xì)胞因子33-34
• 1.4.3 抗原在巨噬細(xì)胞的極化方面的免疫學(xué)研究34-36
• 1.4.4 SjE16.7 活化巨噬細(xì)胞的信號通路36-37
• 1.4.5 Genistein抑制巨噬細(xì)胞的分泌IL-1037-39
• 1.5 討論39-42
• 第2章 SJE16.7 促進(jìn)日本血吸蟲蟲卵肉芽腫的形成和發(fā)展42-54
• 2.1 引言42
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料42-46
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)動物42
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑及其配制42-44
• 2.2.3 主要實(shí)驗(yàn)器材及儀器44-46
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法46-49
• 2.3.1 抗原乳化46
• 2.3.2 小鼠日本血吸蟲模型的構(gòu)建與蟲卵的提取46-47
• 2.3.3 SEA的制備47
• 2.3.4 His-SjE16.7 小鼠多克隆抗體的制備47
• 2.3.5 多克隆抗體的純化47-48
• 2.3.6 ELISA檢測抗原刺激骨髓巨噬細(xì)胞的IL-1048
• 2.3.7 小鼠肺蟲卵肉芽腫模型的構(gòu)建48-49
• 2.3.8 免疫組化實(shí)驗(yàn)49
• 2.3.9 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計(jì)49
• 2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果49-52
• 2.4.1 SjE16.7 活化巨噬細(xì)胞與SEA趨勢不完全相同49-50
• 2.4.2 SjE16.7 在蟲卵肉芽腫的形成中的作用50-52
• 2.5 討論52-54
• 總結(jié)54-56
• 參考文獻(xiàn)56-59
• 綜述 巨噬細(xì)胞在血吸蟲感染中的作用59-69
• 參考文獻(xiàn)66-69
• 致謝69-71
• 已發(fā)表論文71

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;豚鼠巨噬細(xì)胞經(jīng)P_(204)處理后的抗石英細(xì)胞毒作用[J];國外醫(yī)學(xué)參考資料(衛(wèi)生學(xué)分冊);1976年04期

2 鄧俠進(jìn);;巨噬細(xì)胞的抗癌作用[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1979年02期

3 陸天才;;疾病對肺巨噬細(xì)胞的影響[J];煤礦醫(yī)學(xué);1982年01期

4 郭瑞清;祝彼得;;一種分離巨噬細(xì)胞的簡單方法[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1990年02期

5 謝志堅(jiān);巨噬細(xì)胞異質(zhì)性[J];醫(yī)學(xué)綜述;2001年06期

6 饒艷;運(yùn)動及神經(jīng)內(nèi)分泌對巨噬細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)[J];體育與科學(xué);2002年05期

7 朱金元;;吸煙對肺巨噬細(xì)胞的影響[J];浙江醫(yī)學(xué)教育;2003年01期

8 張俊峰;過氧化物酶體增殖物激活受體與單核/巨噬細(xì)胞系[J];醫(yī)學(xué)綜述;2004年03期

9 韋錦學(xué);顧軍;;巨噬細(xì)胞的激活誘導(dǎo)死亡[J];生命科學(xué);2006年02期

10 李曉曦;郭寧;曹雪濤;;腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞促進(jìn)腫瘤生長與轉(zhuǎn)移的研究現(xiàn)狀[J];中國腫瘤生物治療雜志;2008年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 史玉玲;王又明;豐美福;;巨噬細(xì)胞激活作用的研究[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會第五次會議論文摘要匯編[C];1992年

2 吳國明;周輝;;巨噬細(xì)胞和創(chuàng)傷纖維化[A];2009年浙江省骨科學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

3 李奇;王海杰;;透明質(zhì)酸對于淋巴結(jié)巨噬細(xì)胞運(yùn)動的影響[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會2002年年會文摘匯編[C];2002年

4 劉革修;歐大明;劉軍花;黃紅林;廖端芳;;丙丁酚在體外能抑制巨噬細(xì)胞脂質(zhì)氧化介導(dǎo)的低密度脂蛋白氧化并調(diào)節(jié)氧化巨噬細(xì)胞的分泌功能[A];面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展（下冊）[C];1999年

5 葉金善;楊麗霞;郭瑞威;;環(huán)氧化酶-2/前列腺素E_2在血管緊張素Ⅱ刺激巨噬細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子中的作用[A];第十三次全國心血管病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

6 秦帥;陳希;孔德明;;構(gòu)建由綠色熒光標(biāo)記巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因斑馬魚系[A];貴州省中西醫(yī)結(jié)合內(nèi)分泌代謝學(xué)術(shù)會論文匯編[C];2012年

7 武劍華;徐惠綿;;腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在胃癌中的相關(guān)研究[A];第9屆全國胃癌學(xué)術(shù)會議暨第二屆陽光長城腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2014年

8 何軍;;血凝素樣氧化型低密度脂蛋白受體升高巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平[A];中華醫(yī)學(xué)會第11次心血管病學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

9 宋盛;周非凡;邢達(dá);;PDT誘導(dǎo)的凋亡細(xì)胞對巨噬細(xì)胞NO合成的影響[A];第七屆全國光生物學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2010年

10 張磊;朱建華;黃元偉;姚航平;;血管緊張素Ⅱ?qū)奘杉?xì)胞(THP-1重細(xì)胞)凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體表達(dá)的影響[A];浙江省免疫學(xué)會第五次學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2004年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 通訊員 李靜 記者 胡德榮;惡性腫瘤巨噬細(xì)胞未必皆“惡人”[N];健康報(bào);2014年

2 蘭克;以嘗試用巨噬細(xì)胞治癱瘓[N];科技日報(bào);2000年

3 薛佳;免疫系統(tǒng)——人體的“衛(wèi)士”[N];保健時(shí)報(bào);2009年

4 記者 胡德榮;鐵泵蛋白“維穩(wěn)”鐵代謝作用首次闡明[N];健康報(bào);2011年

5 侯嘉 何新鄉(xiāng);硒的神奇功能[N];中國食品質(zhì)量報(bào);2003年

6 唐穎 倪兵 陳代杰;巨噬細(xì)胞泡沫化抑制劑研究快步進(jìn)行[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

7 劉元江;新發(fā)現(xiàn)解釋腫瘤為何易成“漏網(wǎng)之魚”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2007年

8 本報(bào)記者 侯嘉 通訊員 何新鄉(xiāng);今天你補(bǔ)硒了嗎[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

9 左志剛;升血小板藥使用注意[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2007年

10 記者 許琦敏;“鐵泵”蛋白幫助回收鐵元素[N];文匯報(bào);2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周赤燕;巨噬細(xì)胞MsrA對動脈粥樣硬化的干預(yù)研究[D];武漢大學(xué);2013年

2 章桂忠;TIPE2蛋白調(diào)控細(xì)胞增殖和炎癥的機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

3 張瑜;DKK1抑制巨噬細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積及其相關(guān)分子機(jī)制[D];山東大學(xué);2015年

4 孟濤;異丙酚對心臟收縮功能的抑制作用及其對巨噬細(xì)胞分泌功能調(diào)節(jié)的機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

5 周興;基于酵母微囊構(gòu)建新型口服巨噬細(xì)胞靶向遞送系統(tǒng)的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 蔣興偉;Tim-3對巨噬細(xì)胞極化的調(diào)控機(jī)制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

7 劉伯玉;清道夫受體A介導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬鉤端螺旋體研究[D];上海交通大學(xué);2013年

8 楊紹俊;miRNA-155介導(dǎo)ESAT-6誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制及其在結(jié)核診斷中的作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

9 翟光耀;單核/巨噬細(xì)胞Ly6C~(low)亞群在心肌梗死后瘢痕形成期的抗炎特性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

10 韓露;TRB3介導(dǎo)的脂肪組織巨噬細(xì)胞極化與糖尿病冠狀動脈病變關(guān)系的研究[D];山東大學(xué);2015年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張譯丹;鹽皮質(zhì)激素受體拮抗劑調(diào)控巨噬細(xì)胞表型對實(shí)驗(yàn)性矽肺的作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 盧文冉;HCV core蛋白作用的巨噬細(xì)胞培養(yǎng)上清對肝細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 李文建;載脂蛋白E影響巨噬細(xì)胞因子表達(dá)及分型的機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 曹爽;高糖對巨噬細(xì)胞TLR4信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)節(jié)作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 寧程程;腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在子宮內(nèi)膜癌雌激素敏感性中的作用及機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

6 高龍;PLD4在腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞抑制結(jié)腸癌增殖中的作用研究[D];成都醫(yī)學(xué)院;2015年

7 丁弋娜;TLR4在肺癌相關(guān)巨噬細(xì)胞極性轉(zhuǎn)化及其調(diào)控機(jī)制的研究[D];杭州師范大學(xué);2016年

8 袁震;砷對巨噬細(xì)胞和肝細(xì)胞膽固醇流出及相關(guān)基因ABCA1和ABCG1表達(dá)的影響[D];杭州師范大學(xué);2016年

9 李曉琴;Fc99抑制單核/巨噬細(xì)胞表達(dá)Tenascin-C及緩解關(guān)節(jié)炎癥狀的研究[D];南京大學(xué);2014年

10 王凱凱;綠豆肽的結(jié)構(gòu)鑒定及對小鼠巨噬細(xì)胞免疫活性物質(zhì)的影響作用研究[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2016年

，

本文編號：565169