本文關鍵詞：細粒棘球絳蟲H3蛋白的克隆表達及囊型包蟲病檢測效果評價

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【摘要】：目的克隆、表達細粒棘球絳蟲基底膜特異性硫酸乙酰肝素聚糖核心蛋白(H3),并評價其檢測囊型包蟲病的效果。方法將從細粒棘球絳蟲原頭節(jié)cDNA文庫中免疫篩選的H3基因,克隆入pGEX-4T表達載體,將重組質粒轉化大腸桿菌BL21細胞,用異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)進行誘導表達,用親和層析法純化重組蛋白,用ELISA方法檢測囊型包蟲病患者血清、其他寄生蟲病患者血清及健康人血清,評價其檢測效能,并與本課題組制備的細粒棘球蚴包囊液粗抗原(Hydatid cyst fluid,HCF)和重組Ag B8/2進行比較。結果成功構建細粒棘球蚴pGEX-4T-H3重組質粒,并在原核細胞中成功表達。重組H3抗原、純化HCF和rAgB8/2檢測囊型包蟲病患者血清的敏感度分別為84.0%(68/81)、90.1%(73/81)、77.8%(63/81),3者差異無統(tǒng)計學意義(χ~2=4.58,P0.05)。重組H3抗原與泡型包蟲病患者、囊蟲病患者及血吸蟲病患者血清分別存在63.3%(19/30)、16.7%(5/30)和5.0%(1/20)的交叉反應,與50份健康者血清無交叉反應;H3檢測總特異度為80.8%(105/130),H3、純化HCF[71.5%(93/130)]和rAgB8/2[82.3%(107/130)]特異度間差異無統(tǒng)計學意義(χ~2=5.71,P0.05)。結論重組H3抗原在囊型包蟲病診斷上具有潛在的應用價值。
【作者單位】： 中國疾病預防控制中心寄生蟲病預防控制所 衛(wèi)生部寄生蟲病原與媒介生物學重點實驗室 科技部國家級熱帶病國際聯(lián)合研究中心 世界衛(wèi)生組織熱帶病合作中心;
【關鍵詞】： 細粒棘球絳蟲 基底膜特異性硫酸乙酰肝素聚糖核心蛋白(H) 基因克隆 表達 診斷抗原 酶聯(lián)免疫吸附試驗 敏感度 特異度 交叉反應
【基金】：國家重大科技專項(2012ZX10004-220) 上海市衛(wèi)計委科研項目(20134235)
【分類號】：R532.32
【正文快照】： 細粒棘球蚴病(囊型包蟲病)是由細粒棘球蚴引起的一種人獸共患病,廣泛流行于我國西部,嚴重危害人民健康并可造成重大經濟損失,阻礙經濟發(fā)展。當前診斷囊型包蟲病所依賴的影像學方法因不能進行早期診斷[1],而影響了藥物治療效果;免疫學檢測的敏感性和特異性均較高,可用于早期診

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