本文關(guān)鍵詞：細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)H3蛋白的克隆表達(dá)及囊型包蟲(chóng)病檢測(cè)效果評(píng)價(jià)

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【摘要】：目的克隆、表達(dá)細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)基底膜特異性硫酸乙酰肝素聚糖核心蛋白(H3),并評(píng)價(jià)其檢測(cè)囊型包蟲(chóng)病的效果。方法將從細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)原頭節(jié)cDNA文庫(kù)中免疫篩選的H3基因,克隆入pGEX-4T表達(dá)載體,將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21細(xì)胞,用異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),用親和層析法純化重組蛋白,用ELISA方法檢測(cè)囊型包蟲(chóng)病患者血清、其他寄生蟲(chóng)病患者血清及健康人血清,評(píng)價(jià)其檢測(cè)效能,并與本課題組制備的細(xì)粒棘球蚴包囊液粗抗原(Hydatid cyst fluid,HCF)和重組Ag B8/2進(jìn)行比較。結(jié)果成功構(gòu)建細(xì)粒棘球蚴pGEX-4T-H3重組質(zhì)粒,并在原核細(xì)胞中成功表達(dá)。重組H3抗原、純化HCF和rAgB8/2檢測(cè)囊型包蟲(chóng)病患者血清的敏感度分別為84.0%(68/81)、90.1%(73/81)、77.8%(63/81),3者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ~2=4.58,P0.05)。重組H3抗原與泡型包蟲(chóng)病患者、囊蟲(chóng)病患者及血吸蟲(chóng)病患者血清分別存在63.3%(19/30)、16.7%(5/30)和5.0%(1/20)的交叉反應(yīng),與50份健康者血清無(wú)交叉反應(yīng);H3檢測(cè)總特異度為80.8%(105/130),H3、純化HCF[71.5%(93/130)]和rAgB8/2[82.3%(107/130)]特異度間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ~2=5.71,P0.05)。結(jié)論重組H3抗原在囊型包蟲(chóng)病診斷上具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。
【作者單位】： 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心寄生蟲(chóng)病預(yù)防控制所 衛(wèi)生部寄生蟲(chóng)病原與媒介生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 科技部國(guó)家級(jí)熱帶病國(guó)際聯(lián)合研究中心 世界衛(wèi)生組織熱帶病合作中心;
【關(guān)鍵詞】： 細(xì)粒棘球絳蟲(chóng) 基底膜特異性硫酸乙酰肝素聚糖核心蛋白(H) 基因克隆 表達(dá) 診斷抗原 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) 敏感度 特異度 交叉反應(yīng)
【基金】：國(guó)家重大科技專項(xiàng)(2012ZX10004-220) 上海市衛(wèi)計(jì)委科研項(xiàng)目(20134235)
【分類號(hào)】：R532.32
【正文快照】： 細(xì)粒棘球蚴病(囊型包蟲(chóng)病)是由細(xì)粒棘球蚴引起的一種人獸共患病,廣泛流行于我國(guó)西部,嚴(yán)重危害人民健康并可造成重大經(jīng)濟(jì)損失,阻礙經(jīng)濟(jì)發(fā)展。當(dāng)前診斷囊型包蟲(chóng)病所依賴的影像學(xué)方法因不能進(jìn)行早期診斷[1],而影響了藥物治療效果;免疫學(xué)檢測(cè)的敏感性和特異性均較高,可用于早期診

【相似文獻(xiàn)】

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4 高s，

本文編號(hào)：518000