本文關(guān)鍵詞：VEGF、CD34在肝泡狀棘球蚴浸潤性生長中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究VEGF、CD34在肝泡狀棘球蚴浸潤性生長中的作用。方法:1.建立泡球蚴原頭節(jié)-人肝癌Hep G2細(xì)胞共培養(yǎng)體系,共培養(yǎng)一周后,將其分為三組:去鐵敏缺氧誘導(dǎo)組、DMSO溶劑組、常規(guī)培養(yǎng)組,繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)后,伊紅染色法計(jì)數(shù)原頭節(jié)的活力,Elisa法檢測泡球蚴原頭節(jié)HIF1-α、VEGF、CD34的表達(dá),2.采用隨機(jī)數(shù)字表法將60只長爪沙鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和假手術(shù)對照組,實(shí)驗(yàn)組采用開腹直視法接種泡球蚴原頭節(jié),對照組接種等體積的PBS。分別在接種后的第20d、40d、60d、80d、100d在各組中隨機(jī)取六只沙鼠,頸椎脫臼法處死沙鼠,分別取泡球蚴組織、泡球蚴周圍0.5cm處肝組織以及正常肝組織,采用HE染色法觀察泡球蚴組織病理學(xué)變化,采用免疫組化檢測VEGF、CD34在各樣本中的表達(dá)情況。結(jié)果:繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)后,正常培養(yǎng)組、DMSO溶劑組、去鐵敏誘導(dǎo)組頭節(jié)活力分別為:(79.90±1.31)%、(78.58±2.52)%和(78.45±1.65)%,各組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。正常培養(yǎng)組、DMSO溶劑組、去鐵敏誘導(dǎo)組HIF1-α的表達(dá)情況分別為:(852.00+124.41)pg/m L、(806.20±118.51)pg/m L和(1168.20±93.59)pg/m L;VEGF的表達(dá)情況分別為:(158.28±29.24)pg/m L、(157.49±26.88)pg/m L和(222.36±18.87)pg/m L;CD34的表達(dá)情況分別為:(605.40±49.95)pg/m L、(592.20±51.91)pg/m L和(873.60±61.15)pg/m L;與正常培養(yǎng)組及DMSO組相比,HIF1-α、VEGF、CD34的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.05);DMSO組和正常培養(yǎng)組相比,HIF1-α、VEGF、CD34差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.05)。感染泡球蚴沙鼠肝臟中均見大小不等的團(tuán)塊狀囊泡組織,部分播散至腹腔。在感染的各時(shí)間點(diǎn),泡球蚴組織中均可見到MVD-CD34和VEGF的表達(dá),定位于肝泡球蚴組織“外囊”囊壁內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞漿。在感染后第20 d、40 d、60 d、80 d和100 d時(shí),泡球蚴組織中MVD分別為(9.83±3.87)、(25.33±6.71)/HP、(34.50±5.50)/HP、(37.67±5.71)/HP和(44.67±4.93)/HP,與泡球蚴周圍肝組織〔0/HP、(1.17±0.98)/HP、(3.50±1.38)/HP、(5.83±2.71)/HP、(8.83±2.48)/HP〕和正常肝組織(均為0)相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。各時(shí)間點(diǎn)泡球蚴組織中VEGF免疫組化評分分別為(2.95±0.46)分、(3.90±0.68)分、(4.27±1.05)分、(5.33±0.95)分和(4.50±0.81)分,與泡球蚴周圍肝組織〔(1.07±0.63)分、(1.38±0.75)分、(1.55±0.83)分、(1.67±0.47)分、(2.10±0.55)分〕和正常肝組織〔(1.02±0.83)分、(1.12±0.63)分、(1.26±0.26)分、(1.20±0.74)分、(1.21±0.28)分〕相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.成功建立了泡球蚴體外缺氧培養(yǎng)模型,缺氧24小時(shí)對泡球蚴原頭節(jié)活力無影響,2.缺氧可以上調(diào)泡球蚴原頭節(jié)HIF1-α、VEGF、CD34的表達(dá);3.VEGF、CD34在泡球蚴組織中高表達(dá),可能與泡球蚴組織血管生成有關(guān),4.血管新生可能是泡球蚴浸潤性生長的機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】：泡狀棘球蚴 血管內(nèi)皮生長因子 CD34 血管生成
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R532.31
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-10
• 英文縮略語表10-11
• 前言11-13
• 第一部分 泡球蚴原頭節(jié)—人肝癌HepG2細(xì)胞共培養(yǎng)體系的建立及其對泡球蚴原頭節(jié)生長發(fā)育的影響13-19
• 材料和方法13-15
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動物13
• 1.2 細(xì)胞系13
• 1.3 試劑及主要儀器設(shè)備13-14
• 1.4 人肝癌HepG2細(xì)胞的培養(yǎng)14-15
• 1.5 泡狀棘球蚴原頭節(jié)的提取15
• 1.6 體外共培養(yǎng)模型的建立15
• 1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析15
• 結(jié)果15-17
• 2.1 形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果15-16
• 2.2 泡球蚴原頭節(jié)的活力及其增殖結(jié)果16-17
• 討論17-18
• 結(jié)論18-19
• 第二部分 缺氧對泡球蚴原頭節(jié)VEGF、CD34表達(dá)的影響19-30
• 材料和方法19-24
• 1.1 體外培養(yǎng)材料19
• 1.2 藥物、試劑及設(shè)備19-20
• 1.3 技術(shù)路線圖20
• 1.4 去鐵敏培養(yǎng)基的配制20
• 1.5 泡球蚴原頭節(jié)的培養(yǎng)及缺氧模型的建立20-21
• 1.6 原頭節(jié)活力計(jì)數(shù)21
• 1.7 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢原理及步驟21-23
• 1.8 結(jié)果評判標(biāo)準(zhǔn)23-24
• 1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析24
• 結(jié)果24-28
• 2.1 頭節(jié)形態(tài)及活力檢測結(jié)果24
• 2.2 HIF1-α含量檢測結(jié)果24-25
• 2.3 VEGF含量檢測結(jié)果25-27
• 2.4 CD34含量檢測結(jié)果27-28
• 討論28-29
• 結(jié)論29-30
• 第三部分 VEGF、MVD-CD34在沙鼠肝泡球蚴組織中的表達(dá)及意義30-37
• 材料與方法30-33
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動物及分組30
• 1.2 主要試劑及儀器30-31
• 1.3 原頭節(jié)混懸液的制備31
• 1.4 沙鼠泡球蚴模型建立31
• 1.5 標(biāo)本的收集及處理31
• 1.6 石蠟切片的制作31
• 1.7 組織病理學(xué)觀察31-32
• 1.8 免疫組化Envision法檢測MVD-CD34的表達(dá)32
• 1.9 免疫組化Envision法檢測VEGF的表達(dá)32
• 1.10 免疫組化結(jié)果評判標(biāo)準(zhǔn)32-33
• 1.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析33
• 結(jié)果33-35
• 2.1 大體觀察33-34
• 2.2 組織病理學(xué)觀察34
• 2.3 MVD-CD34免疫組化染色結(jié)果34-35
• 2.4 VEGF免疫組化染色結(jié)果35
• 討論35-37
• 結(jié)論37
• 小結(jié)37-38
• 參考文獻(xiàn)38-43
• 文獻(xiàn)綜述43-48
• 參考文獻(xiàn)46-48
• 致謝48-49
• 作者簡介49-50
• 石河子大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文導(dǎo)師評閱表50

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本文編號：493778