本文關(guān)鍵詞：2015南昌市活禽市場(chǎng)禽流感病毒污染及從業(yè)人員細(xì)胞免疫狀況調(diào)查，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:禽流感病毒的跨種傳播和不同亞型之間重組產(chǎn)生新的病毒株或新的亞型引起了全球廣泛的高度注意。2013年以前,國際上已報(bào)道了人感染H5N1、H7N7、H7N3、H7N2、H9N2、H10N7等禽流感病例,從2013年春季起,我國面臨頻發(fā)的人H7N9禽流感病例,同年12月國家衛(wèi)計(jì)委宣布在江西省南昌市確診了全球首例人感染H10N8禽流感病例。既往研究提示,活禽市場(chǎng)在禽流感病毒的保存、繁殖和傳播中起著至關(guān)重要的作用;是禽流感病毒基因混合池,為不同亞型禽流感病毒基因重組提供有利條件;是人感染禽流感病毒的主要源頭;也是預(yù)防和控制禽流感的關(guān)鍵所在。本研究的主要目的是通過細(xì)胞免疫學(xué)方法,探索活禽從業(yè)人群T淋巴細(xì)胞對(duì)不同流感病毒保守多肽(NP/M1)應(yīng)答的頻率和強(qiáng)度;同時(shí),對(duì)活禽市場(chǎng)及其從業(yè)人員開展現(xiàn)況調(diào)查,了解活禽從業(yè)人群個(gè)人衛(wèi)生防護(hù)行為和活禽市場(chǎng)禽流感病毒污染程度,以期為進(jìn)一步采取公共衛(wèi)生行動(dòng)提供科學(xué)依據(jù)。方法:(1)流行病學(xué)調(diào)查,通過二階段整群抽樣的方法抽取南昌市轄區(qū)內(nèi)76家活禽市場(chǎng)內(nèi)全部活禽從業(yè)人群作為調(diào)查對(duì)象。利用自制問卷收集活禽市場(chǎng)基本情況和管理措施實(shí)施情況以及活禽從業(yè)人員的人口統(tǒng)計(jì)學(xué)、職業(yè)暴露和衛(wèi)生習(xí)慣等信息。問卷調(diào)查結(jié)束后,采集活禽市場(chǎng)中的廢水、禽類新鮮糞便和籠具表面涂抹擦拭物三類具有代表性的環(huán)境標(biāo)本,同時(shí)采集活禽從業(yè)人員EDTA-Na抗凝血20ml的血液標(biāo)本。(2)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),環(huán)境標(biāo)本在采集后1周內(nèi)使用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)進(jìn)行A型流感病毒核酸檢測(cè),陽性標(biāo)本再使用H5、H7、H9、H10特異性引物進(jìn)行禽流感病毒亞型的鑒定;從業(yè)人員的血液標(biāo)本采用酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)試驗(yàn)(ELISPOT)進(jìn)行禽流感病毒特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)的檢測(cè)。(3)數(shù)據(jù)分析,利用Epidate3.0創(chuàng)建數(shù)據(jù)庫并進(jìn)行數(shù)據(jù)的錄入,應(yīng)用spss13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。統(tǒng)計(jì)方法采用描述性統(tǒng)計(jì)分析、卡方檢驗(yàn)和方差分析,假設(shè)檢驗(yàn)的顯著性水準(zhǔn)設(shè)為0.05,P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:(1)調(diào)查的76家活禽市場(chǎng)中,55.26%(42/76)實(shí)施一日一清洗;76.32%(58/76)實(shí)行一周一消毒,僅2家禽類攤檔一月一休市;97.37%(74/76)的市場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)宰殺活禽,69.74%(53/76)存在活禽存欄過夜現(xiàn)象。(2)365名活禽從業(yè)人員累積職業(yè)暴露時(shí)間中位數(shù)是13年(四分位數(shù)間距:5~20年),主要暴露方式為宰殺(58.90%)和銷售(43.01%),90.96%的暴露頻率≥5d/周,13.97%報(bào)告近期接觸過病死禽。工作中堅(jiān)持每天戴口罩、帶手套、每次接觸禽類后洗手、每次吃飯前洗手和每次洗手時(shí)使用肥皂或洗手液的分別占14.79%、20.00%、46.58%、52.05%和47.67%。(3)474份環(huán)境標(biāo)本中,75份A型流感病毒核酸陽性(陽性率15.82%),其中禽流感病毒亞型H9陽性44份,H5陽性16份,H7陽性11份,H10陽性2份。三種環(huán)境標(biāo)本均有A型流感病毒陽性檢出,陽性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(?2=12.85,P=0.002),廢水陽性檢出率顯著高于其它標(biāo)本。(4)365份活禽從業(yè)人員血液標(biāo)本中,241份標(biāo)本記性性T細(xì)胞對(duì)流感病毒NP/M1應(yīng)答(應(yīng)答陽性率66.03%)。其中104份標(biāo)本的T細(xì)胞對(duì)H9亞型禽流感病毒NP/M1多肽應(yīng)答,以對(duì)NP反應(yīng)為主,應(yīng)答頻率隨年齡的增長(zhǎng)而降低,隨職業(yè)暴露時(shí)間的增加先升高后下降。結(jié)論:(1)南昌市活禽市場(chǎng)禽流感防控措施未得到充分落實(shí),市場(chǎng)禽流感病毒污染程度較為嚴(yán)重,提示需要進(jìn)一步加強(qiáng)市場(chǎng)防控措施實(shí)施力度,降低活禽從業(yè)人群和市場(chǎng)顧客的感染風(fēng)險(xiǎn)。(2)南昌市活禽從業(yè)人員疫苗接種率低,每周接觸活禽頻率高,累計(jì)接觸時(shí)間長(zhǎng)且個(gè)人衛(wèi)生防護(hù)措施采用率較低,存在發(fā)生感染的隱患,公共衛(wèi)生工作者應(yīng)加強(qiáng)對(duì)該人群的宣傳教育,提高其個(gè)人防護(hù)意識(shí)。(3)南昌市活禽從業(yè)人群對(duì)H9亞型禽流感病毒和季節(jié)性流感病毒存在交叉反應(yīng)的記憶性T細(xì)胞免疫應(yīng)答。年齡和職業(yè)暴露時(shí)間是T細(xì)胞對(duì)H9亞型禽流感病毒NP/M1肽段應(yīng)答頻率的影響因素。
【關(guān)鍵詞】：活禽市場(chǎng) 禽流感 活禽從業(yè)人群 酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)試驗(yàn)
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R511.7
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 中英文縮略詞表10-11
• 第1章 引言11-13
• 第2章 材料與方法13-20
• 2.1 流行病學(xué)調(diào)查13-15
• 2.1.1 調(diào)查目的13
• 2.1.2 調(diào)查對(duì)象13
• 2.1.3 調(diào)查方法13-14
• 2.1.4 標(biāo)本的采集與處理14
• 2.1.5 組織與實(shí)施14-15
• 2.2 RT-PCR實(shí)驗(yàn)15-16
• 2.2.1 主要試劑15
• 2.2.2 主要儀器15
• 2.2.3 核酸抽提15-16
• 2.2.4 禽流感病毒核酸檢測(cè)16
• 2.3 ELISPOT實(shí)驗(yàn)16-19
• 2.3.1 主要儀器16-17
• 2.3.2 主要試劑17
• 2.3.3 抗原肽庫的選擇17
• 2.3.4 PBMCs復(fù)蘇17-18
• 2.3.5 PBMCs流式細(xì)胞計(jì)數(shù)18
• 2.3.6 ELISPOT實(shí)驗(yàn)18-19
• 2.4 統(tǒng)計(jì)分析19
• 2.5 質(zhì)量控制19-20
• 第3章 結(jié)果20-35
• 3.1 活禽市場(chǎng)基本情況20-22
• 3.1.1 活禽市場(chǎng)基本情況20-21
• 3.1.2 活禽市場(chǎng)中禽類攤檔情況21-22
• 3.2 活禽從業(yè)人群特征22-25
• 3.2.1 人口學(xué)特征22-23
• 3.2.2 活禽職業(yè)暴露情況23-24
• 3.2.3 個(gè)人衛(wèi)生行為24-25
• 3.3 活禽市場(chǎng)禽流感病毒污染狀況25-27
• 3.3.1 活禽市場(chǎng)禽流感病毒檢測(cè)情況25-26
• 3.3.2 不同類型標(biāo)本禽流感病毒檢出情況26-27
• 3.4 ELISPOT實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-35
• 3.4.1 T細(xì)胞對(duì)不同亞型流感病毒NP/M1多肽的應(yīng)答28-30
• 3.4.2 T細(xì)胞對(duì)流感病毒NP/M1多肽的交叉反應(yīng)強(qiáng)度分析30
• 3.4.3 年齡與T細(xì)胞對(duì)禽流感病毒NP/M1多肽的應(yīng)答的分析30-32
• 3.4.4 暴露時(shí)間與T細(xì)胞對(duì)禽流感病毒NP/M1多肽的應(yīng)答分析32-34
• 3.4.5 環(huán)境污染與T細(xì)胞對(duì)禽流感病毒NP/M1多肽的應(yīng)答分析34-35
• 第4章 討論35-39
• 4.1 活禽市場(chǎng)禽流感病毒污染及從業(yè)人員分析35-37
• 4.2 活禽從業(yè)人員對(duì)流感病毒MP/M1多肽的T細(xì)胞免疫研究37-39
• 第5章 結(jié)論與展望39-40
• 5.1 結(jié)論39
• 5.2 進(jìn)一步工作方向39-40
• 致謝40-41
• 參考文獻(xiàn)41-46
• 附錄A46-48
• 附錄B48-50
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果50-51
• 綜述 職業(yè)人群高致病性禽流感的流行病學(xué)研究進(jìn)展51-60
• 主要參考文獻(xiàn)57-60

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本文編號(hào)：408534