發(fā)布時間：2017-05-30 17:01

  本文關(guān)鍵詞：高通量ELISA檢測HBV系統(tǒng)化標(biāo)準(zhǔn)化研究及重慶地區(qū)HBV流行病學(xué)調(diào)查分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：高通量酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的檢測是臨床實驗室最常用的檢測乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)血清學(xué)標(biāo)志物的方法,具有靈敏度高、特異型好、價格低廉的優(yōu)勢,但同時又存在操作的重復(fù)性和準(zhǔn)確性差問題,影響著結(jié)果的可靠性。在本研究中我們通過高通量ADDCARE1100全自動酶免工作站的儀器硬件檢測和配套試劑的性能評價,來確保ADDCARE1100全自動酶免工作站檢測結(jié)果的可靠性。儀器硬件參數(shù)檢測包括加樣器加樣精度測量、洗板殘留量的測量和孵育微板溫度的測量;配套試劑的性能評價包括:以Architect I2000全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀為參考方法,對ADDCAER1100全自動酶免工作站進行HBV血清學(xué)標(biāo)志物檢測的方法學(xué)對比,同時進行ADDCARE1100全自動酶免工作站的重復(fù)性試驗,通過上述試驗來進行ELISA檢測系統(tǒng)檢測過程中的系統(tǒng)化和標(biāo)準(zhǔn)化研究。同時收集2013.6-2014.6重慶市主城和區(qū)縣的4家醫(yī)院不同方法學(xué)檢測HBV的血清學(xué)標(biāo)志物和被檢測者基本信息,建立重慶市乙型肝炎病毒信息標(biāo)本庫,對重慶市乙型肝炎病毒進行流行病學(xué)調(diào)查分析,本研究結(jié)果如下:1.ADDCARE1100全自動酶免工作站硬件設(shè)備共有12個加樣器,每個加樣器重復(fù)10次,測量次數(shù)為12×10=120次。加樣器的12個通道精度都在100±2μl內(nèi),重復(fù)性符合國家標(biāo)準(zhǔn)CV≤0.75%.。3臺洗板機的洗板殘留量都到達每孔平均殘留量≤2μl要求的結(jié)果;32塊微板在不同時間段2次的測量結(jié)果符合溫度T=37℃±0.5℃的要求2.方法學(xué)對比:兩種檢測儀器檢測乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗體(hepatitis B surface antibody,HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗體(hepatitis B e antigen,HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗體(hepatitis B core antibody,HBcAb)的總符合率分別為99.0%,99.5%,99.5%,98.0%,100.0%;陽性符合率分別為98.0%,100.0%,99.0%,97.0%,100.0%;陰性符合率分別為100.0%,99.0%,100.0%,99.0%,100.0%;Kappa檢驗系數(shù)K分別為0.98,0.99,0.99,0.96,1.00。3.重復(fù)性試驗:ADDCARE1100檢測HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb在±20%濃度的臨界值樣本陽(陰)性率均≥95%,95%可信區(qū)間分別為:96.6%-99.5%,97.6%-99.5%,97.6%-99.5%,94.7%-99.5%,98.6%-99.5%。4.HBV流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果:2013.6-2014.6重慶市大坪醫(yī)院檢驗科、南川區(qū)人民醫(yī)院檢驗科、黔江中心醫(yī)院檢驗科、合川區(qū)中心醫(yī)院檢驗科共檢測乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志物(HBs Ag、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)149762例份標(biāo)本,共得出31種血清學(xué)組合模式;以為HBsAb(+)、HBsAb(+)HBcAb(+)、標(biāo)志物全陰,三種模式為主,占所檢測人數(shù)的18.02%,17.55%,15.46%。5.HBsAg陽性的性別分布情況:人群中男性HBsAg的陽性率16%,女性HBsAg陽性率為9.82%。6.四個年齡段的HBs Ag陽性、HBsAb陽性分布水平:HBsAg陽性率0-4歲年齡段為4.53%:HBsAg的陽性率5-14歲的年齡段最低為3.48%,HBsAg陽性率15-59歲年齡段最高為14.15%,HBsAg陽性率60歲以上年齡段為10.37%;4個年齡段的HBsAg陽性率有統(tǒng)計學(xué)差異,P0.01;HBsAb陽性率0-4歲年齡段的最高為65.38%,HBs Ab陽性率5-14歲的最低為48.48%,HBsAb陽性率15-59歲年齡段為50.65%,HBsAb陽性率60歲以上年齡段為63.07%;4個年齡段的HBsAb分布有統(tǒng)計學(xué)差異,P0.01.7.重慶主城和區(qū)縣HBsAg陽性率的分布情況;共有4家醫(yī)院參加的HBV血清學(xué)的檢測,主城區(qū)的HBs Ag陽性率是10.23%,區(qū)縣3家醫(yī)院HBsAg陽性率是13.78%,主城區(qū)和區(qū)縣的HBsAg陽性率有統(tǒng)計學(xué)差異,P0.01�？偨Y(jié):ADDCARE1100全自動酶免工作站的硬件參數(shù)檢測符合國家標(biāo)準(zhǔn),與Architect I2000全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀共同檢測HBV血清學(xué)標(biāo)志物的結(jié)果一致性很好;ADDCARE1100全自動酶免工作站檢測HBV血清學(xué)標(biāo)志物在臨界值±20%的濃度內(nèi)能得到穩(wěn)定結(jié)果。該儀器的的檢測符合ELISA檢測系統(tǒng)對于準(zhǔn)確性高、重復(fù)性好的臨床要求,以及ELISA檢測系統(tǒng)的規(guī)范化操作要求,可用于臨床實驗室對于標(biāo)本的檢測;重慶市HBV流行病學(xué)的調(diào)查總體符合2006年的全國流行病學(xué)調(diào)查的報告:兒童和青少年的HBsAg陽性率最低,15至59歲人群HBsAg陽性率最高,表明年齡越小,HBsAg陽性率下降幅度越大,兒童HBsAg的陽性率明顯降低,我國HBsAg陽性率和HBV傳播方式已發(fā)生明顯改變[1];為重慶市HBV流行的基本特征及預(yù)后轉(zhuǎn)歸等提供重要的臨床依據(jù),并為HBV的的臨床防治提供可靠的科學(xué)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：ELISA 性能評價 定性試驗 HBV 血清學(xué)標(biāo)志物 流行病學(xué)調(diào)查
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R446.6;R512.62
【目錄】：

• 英文縮寫一覽表4-5
• 英文摘要5-8
• 中文摘要8-10
• 第一章 前言10-13
• 1.1 選題緣由10-12
• 1.2 研究背景12
• 1.3 本實驗的研究意義及主要內(nèi)容12-13
• 第二章 高通量ELISA檢測HBV系統(tǒng)化標(biāo)準(zhǔn)化研究13-25
• 2.1 ADDCARE1100全自動酶免工作站的硬件檢測13-16
• 2.1.1 材料與方法13-15
• 2.1.2 結(jié)果15-16
• 2.2 ADDCAER1100全自動酶免工作站實驗性能評價16-25
• 2.2.1 材料與方法16-17
• 2.2.2 結(jié)果17-24
• 2.2.3 討論24-25
• 第三章 重慶地區(qū)HBV流行病學(xué)調(diào)查分析25-36
• 3.1 材料和方法25-26
• 3.2 結(jié)果26-34
• 3.3 討論34-36
• 全文總結(jié)36-37
• 參考文獻37-40
• 文獻綜述 基層醫(yī)生應(yīng)該如何篩查，評估感染HBV的患者40-46
• 參考文獻44-46
• 攻讀學(xué)位期間研究成果46-47
• 致謝47

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李金明;血液感染性疾病標(biāo)志物篩檢中應(yīng)重視的若干問題[J];中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2005年06期

  本文關(guān)鍵詞：高通量ELISA檢測HBV系統(tǒng)化標(biāo)準(zhǔn)化研究及重慶地區(qū)HBV流行病學(xué)調(diào)查分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：407518