本文關(guān)鍵詞：miRNA-133a在泡球蚴感染所致肝星狀細胞活化中作用及與肝纖維化的關(guān)系，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討miR-133a在泡球蚴蛋白共培養(yǎng)所致肝星狀細胞活化及泡球蚴感染所致小鼠肝纖維化中的作用。方法:建立肉眼直視下肝臟門靜脈接種泡球蚴感染小鼠肝臟模型,對照組注射生理鹽水。造模后1月,3月取肝組織,HE染色檢測泡球蚴感染情況,天狼猩紅染色檢測膠原合成情況,免疫組化檢測α-SMA在肝組織中的表達情況。qRT-PCR檢測COL1A1、α-SMA和miRNA-133a的表達情況。泡球蚴蛋白(60μg/ml,600μg/ml)體外與肝星狀細胞共培養(yǎng)24h后,qRT-PCR檢測肝星狀細胞中COL1A1、α-SMA、Smad2、Smad3、Smad4、TGFβ-RI、TGFβ-RII和mi RNA-133a基因表達水平。Weston-blot檢測肝星狀細胞中COL1A1和α-SMA蛋白表達水平。LX-2細胞轉(zhuǎn)染miRNA-133a mimics后檢測LX-2細胞中COL1A1、α-SMA、Smad2、Smad3、Smad4和miR-133a基因表達水平。Weston-blot檢測COL1A1和α-SMA蛋白表達水平。結(jié)果:(1)成功建立肉眼直視下肝臟門靜脈接種泡球蚴感染小鼠模型,泡球蚴感染1月和3月后,小鼠病灶旁肝臟中α-SMA和I型膠原mRNA及蛋白表達水平較假手術(shù)組顯著升高,具統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01)。泡球蚴感染1月小鼠病灶近旁肝臟中miRNA-133a表達水平較假手術(shù)組顯著升高,具統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01)。(2)泡球蚴蛋白可刺激肝星狀細胞α-SMA和COL1A1 mRNA水平及蛋白水平的顯著升高(P0.0001),同時miRNA-133a表達顯著升高(P0.0001)。泡球蚴蛋白刺激miRNA-133a模擬物轉(zhuǎn)染LX-2細胞,α-SMA、COL1A1、Smad2、Smad3和Smad4 mRNA及蛋白表達水平均較未轉(zhuǎn)染miRNA-133a模擬物L(fēng)X-2細胞顯著升高(P0.05),提示miRNA-133a可促進泡球蚴誘發(fā)的肝星狀細胞活化并影響TGF-β/Smad信號通路中的關(guān)鍵蛋白。結(jié)論:miRNA-133a的高表達可促進泡球蚴誘導(dǎo)的肝星狀細胞的活化并影響TGF-β/Smad信號通路中關(guān)鍵蛋白的表達。
【關(guān)鍵詞】：泡型包蟲病 肝纖維化 泡球蚴 肝星狀細胞 miRNA-133a
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R532.3;R575.2
【目錄】：

• 摘要8-9
• ABSTRACT9-10
• 前言10-12
• 研究內(nèi)容與方法12-24
• 1. 實驗動物12
• 2. 材料與試劑12-13
• 3. 研究方法13-24
• 結(jié)果24-44
• 1. 泡球蚴感染小鼠模型肝臟病理學(xué)檢測24-31
• 2.小鼠原代肝星狀細胞生物學(xué)特性31-33
• 3. 泡球蚴蛋白對肝星狀細胞活化后相關(guān)蛋白、基因表達的影響33-37
• 4. miRNA-133a minics對泡球蚴蛋白刺激的肝星狀細胞活化的影響37-40
• 5. 生物信息學(xué)技術(shù)預(yù)測miR-133a的相關(guān)靶基因40-44
• 討論44-46
• 小結(jié)46-47
• 參考文獻47-52
• 致謝52-53
• 綜述53-58
• 參考文獻55-58
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文58
• 攻讀碩士學(xué)位期間獲得項目資助情況58-59
• 導(dǎo)師評閱表59

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