背景布魯菌病(簡稱布病),是由布魯菌(簡稱布菌)引起的一種嚴重的人畜共患傳染病。人感染布菌后容易轉為慢性,引起多器官損傷。目前布病的實驗室診斷主要以血清學檢測抗體為主,存在不同程度的交叉反應,不能真實地反映患者胞內的攜菌情況。布病的病原學檢測以菌培養(yǎng)作為“金標準”,但其分離率較低,操作存在較大的生物安全風險。核酸檢測也是當前的研究熱點,其操作的簡便性尚不能滿足大多臨床診斷要求。直接檢測布病患者細胞內的病原體或布菌抗原,對于布病的診斷和治療效果評價具有重要意義。然而,這一領域的研究報道尚不多見。目的本研究擬通過制備、篩選和鑒定特異性布菌外膜蛋白單克隆抗體,建立針對布病患者外周血單個核細胞(PBMCs)內布菌抗原的流式細胞檢測方法,用于布病臨床治療效果評價。方法1.材料重組布菌外膜蛋白Omp31、Bp26和Omp25;布菌外膜蛋白特異性單克隆抗體及其雜交瘤細胞;滅活布菌菌體,包括牛種(B.abortus 2308、104M和S19菌株),羊種(B.melitensis M5-90)和豬種(B.suis S2);異硫氰酸熒光素(FITC),藻紅蛋白(r-PE)標記試劑盒。2.研究對象52名布...

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【學位級別】：碩士

圖１－４抗Ｏｍｐ２５單抗的抗原識別表位??Ｆｉｇｕｒｅ?１－４?Ｅｐｉｔｏｐｅ?ｍａｐｐｉｎｇ?ｏｆ?Ｏｍｐ２５??Ａ、ＥＬＩＳＡＭＡｂｓＯｍ２５；Ｂ、ＭＡｂＯｍ２５，??

圖２－１?Ｏｍｐ２５、Ｂｐ２６和Ｏｍｐ３１重組表達載體雙酶切鑒定??

圖３－２不同抗體用量時ＦＣＭ檢測的２９３ＦＴ陽性細胞數??

圖３－４流式細胞術檢測健康獻血者ＰＢＭ?

本文編號：3887568