遵義及周邊地區(qū)結(jié)膜吸吮線蟲(chóng)的形態(tài)學(xué)觀察和遺傳變異研究
本文關(guān)鍵詞:遵義及周邊地區(qū)結(jié)膜吸吮線蟲(chóng)的形態(tài)學(xué)觀察和遺傳變異研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:通過(guò)收集遵義及周邊地區(qū)結(jié)膜吸吮線蟲(chóng)(Thelazia callipaeda,T.cp)人體感染標(biāo)本,對(duì)其進(jìn)行病例資料分析、形態(tài)學(xué)觀察和遺傳變異研究,初步獲得遵義及周邊地區(qū)結(jié)膜吸吮線蟲(chóng)病的流行特征,了解遵義及周邊地區(qū)T.cp形態(tài)特點(diǎn)及種間和種內(nèi)進(jìn)化關(guān)系,不僅為遵義及周邊地區(qū)結(jié)膜吸吮線蟲(chóng)病的防治提供依據(jù),也為豐富T.cp基因組序列信息奠定基礎(chǔ)。方法:1、遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院、遵義市航天醫(yī)院眼科采集T.cp感染者成蟲(chóng)標(biāo)本,獲得感染者病例資料;2、光學(xué)顯微鏡和掃描電鏡下觀察T.cp雌、雄蟲(chóng)形態(tài)特征和超微結(jié)構(gòu);3、HE染色法觀察T.cp雌、雄蟲(chóng)橫切和縱切組織結(jié)構(gòu)特征;4、利用試劑盒提取遵義及周邊地區(qū)不同來(lái)源地蟲(chóng)體DNA,分別進(jìn)行18S r RNA、cox1兩個(gè)基因的PCR擴(kuò)增,產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè);5、對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序,利用Clustal X 1.83進(jìn)行比對(duì),并用MEGA 7.01軟件基于最大似然法(ML)進(jìn)行遺傳進(jìn)化分析。結(jié)果:1、病例資料分析結(jié)果顯示遵義及周邊地區(qū)T.cp人體感染病例為散發(fā),病例近年逐漸增多,每年8~11月為高發(fā)期;感染者集中在35~60歲;女性多于男性;以農(nóng)村患者居多,其中正安縣病例最多,約1/3患者家中養(yǎng)有狗、貓。2、遵義及周邊地區(qū)人體感染T.cp形態(tài)特征與其他地區(qū)蟲(chóng)體基本相同;掃描電鏡下觀察遵義及周邊地區(qū)T.cp超微結(jié)構(gòu)與其他地區(qū)蟲(chóng)體存在一定差異,遵義及周邊地區(qū)T.cp口囊底部有兩塊半月形的咽門結(jié)構(gòu),成蟲(chóng)尾部腹面末端1對(duì)尾乳突上未觀察到有新月形開(kāi)口。3、HE染色結(jié)果顯示T.cp體表結(jié)構(gòu)為鋸齒狀皺褶,為多肌型線蟲(chóng);體壁由角皮層、皮下層和縱肌層組成,體內(nèi)有消化系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等。4、遵義及周邊不同地區(qū)(正安縣、綏陽(yáng)縣、桐梓縣、習(xí)水縣等)T.cp 18S r RNA基因序列同源性為99%~100%;遵義及周邊地區(qū)多數(shù)樣本18S r RNA基因與日本Oita(AB538282.1)樣本同源性為100%,系統(tǒng)發(fā)育分析顯示同在一個(gè)分支。5、遵義及周邊不同地區(qū)T.cp樣本cox1基因同源性為98%~100%,與羅馬尼亞(KP087796.1)、日本Oita(AB538283.1)樣本等其他地區(qū)cox1基因同源性為95%~98%。系統(tǒng)發(fā)育分析顯示正安1號(hào)與日本Oita(AB538283.1)在一個(gè)分支;習(xí)水等遵義及周邊地區(qū)多數(shù)樣本的cox1基因與遵義市區(qū)2號(hào)、正安(2、3)號(hào)之間的親緣關(guān)系較近;遵義市區(qū)1號(hào)則與羅馬尼亞(KP087796.1)、塞爾維亞(KJ433983.1)樣本序列在同一分支。結(jié)論:1、遵義及周邊地區(qū)T.cp人體感染病例為散發(fā),近年逐漸增多;2、遵義及周邊地區(qū)T.cp蟲(chóng)體的形態(tài)特征與其他地區(qū)基本一致,但掃描電鏡下有一定區(qū)別;3、18S r RNA基因同源性高,可以作為T.cp有效檢測(cè)基因;cox1基因則存在一定的種內(nèi)和不同地域差異,可作為T.cp種群遺傳變異的有效分子標(biāo)記。
【關(guān)鍵詞】:結(jié)膜吸吮線蟲(chóng) 病例資料 形態(tài)學(xué) 18S rRNA基因 cox1基因
【學(xué)位授予單位】:遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R532.1
【目錄】:
- 英文縮略詞表4-5
- 中文摘要5-7
- Abstract7-10
- 前言10-13
- 1 材料與方法13-18
- 2 結(jié)果18-47
- 3 討論47-51
- 4 結(jié)論51-52
- 參考文獻(xiàn)52-56
- 綜述:結(jié)膜吸吮線蟲(chóng)及其分子遺傳鑒定研究進(jìn)展56-64
- 參考文獻(xiàn)62-64
- 致謝64-65
- 作者簡(jiǎn)介65-66
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):377414
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