目的:通過抑制小鼠體內JAK/STAT信號通路,進一步探討JAK/STAT信號通路在CTP-HBcAg_18-27-Tapasin誘導特異性細胞毒T淋巴細胞(CTL)反應的作用。方法:1.HLA-A2小鼠分為6組,分別為:CTP-HBcAg_18-27-Tapasin(50μg)、CTP-HBcAg_18-27(50μg)、HBcAg_18-27-Tapasin(50μg)、CTP-HBcAg_18-27-Tapasin+AG490(50μg)、AG490、空白組(PBS)。HBV轉基因小鼠隨機分為7組,分別為:CTP-HBcAg_18-27-Tapasin(50μg)、CTP-HBcAg_18-27(50μg)、HBcAg_18-27-Tapasin(50μg)、CTP-HBcAg_18-27-Tapasin+AG490(50μg)、AG490、IFN-α(2000 IU)、PBS。融合蛋白經肌肉免疫小鼠,...

【文章頁數】：61 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
第一章 JAK/STAT信號通路在CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合蛋白誘導特異性CTL反應的作用
    1.1 引言
    1.2 材料和方法
        1.2.1 主要儀器與試劑
        1.2.2 實驗動物的處理
        1.2.3 制備HLA-A2 小鼠和HBV轉基因小鼠脾淋巴細胞
        1.2.4 分離HLA-A2 小鼠和HBV轉基因小鼠T淋巴細胞
        1.2.5 檢測HLA-A2 小鼠和HBV轉基因小鼠T細胞培養(yǎng)上清液中細胞因子
        1.2.6 檢測HLA-A2 小鼠和HBV轉基因小鼠T細胞內細胞因子
        1.2.7 檢測HLA-A2 小鼠和HBV轉基因小鼠T淋巴細胞增殖活性
        1.2.8 酶聯免疫斑點(ELISPOT)法檢測HLA-A2 小鼠和HBV轉基因小鼠分泌IFN-γ的 T淋巴細胞
        1.2.9 統(tǒng)計學處理
    1.3 結果
        1.3.1 抑制JAK/STAT信號通路小鼠T淋巴細胞培養(yǎng)上清液中細胞因子水平變化
        1.3.2 抑制JAK/STAT信號通路流式細胞儀檢測小鼠T淋巴細胞胞內細胞因子變化
        1.3.3 抑制JAK/STAT信號通路分泌IFN-γ的小鼠T淋巴細胞數量變化
        1.3.4 抑制JAK/STAT信號通路小鼠T淋巴細胞增殖活性變化
    1.4 討論
    1.5 小結
第二章 JAK/STAT信號通路在CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合蛋白抑制HBV轉基因小鼠病毒復制的作用
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 主要儀器與試劑
        2.2.2 引物設計
        2.2.3 實驗動物的處理
        2.2.4 HBV轉基因小鼠框靜脈取血
        2.2.5 HBV轉基因小鼠血清AST、ALT、HBsAg及 HBVDNA水平檢測
        2.2.6 HBV轉基因小鼠脾淋巴細胞的制備
        2.2.7 HBV轉基因小鼠T淋巴細胞的分離
        2.2.8 HBV轉基因小鼠肝組織常規(guī)HE染色
        2.2.9 HBV轉基因小鼠肝臟組織HBsAg和HBcAg免疫組織化學染色
        2.2.10 HBV轉基因小鼠T淋巴細胞JAK/STAT通路分子Western blotting檢測
        2.2.11 HBV轉基因小鼠T淋巴細胞JAK/STAT通路分子Realtime-PCR分析
        2.2.12 統(tǒng)計學處理
    2.3 結果
        2.3.1 抑制JAK/STAT信號通路HBV轉基因小鼠血清HBs Ag、HBV DNA、ALT及 AST水平變化
        2.3.2 抑制JAK/STAT信號通路HBV轉基因小鼠肝臟病理改變
        2.3.3 抑制JAK/STAT信號通路HBV轉基因小鼠肝臟組織中HBsAg和HBcAg表達
        2.3.4 抑制JAK/STAT信號通路HBV轉基因小鼠T淋巴細胞JAK/STAT信號通路分子表達
    2.4 討論
    2.5 小結
結論
參考文獻
致謝
在校期間撰寫文章



本文編號：3752611