基于熒光免疫層析技術(shù)快速檢測(cè)發(fā)熱伴血小板減少綜合征總抗體
發(fā)布時(shí)間:2022-08-06 17:00
目的建立一種簡(jiǎn)便、快速、特異的發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(SFTSV)總抗體的熒光免疫層析檢測(cè)方法。方法利用熒光染料標(biāo)記的SFTSV重組NP蛋白制備檢測(cè)液,用SFTSV重組NP蛋白包被NC膜制備快速檢測(cè)SFTSV總抗體的試紙條。檢測(cè)100例健康者陰性血清樣本確定檢測(cè)方法 cut-off值,評(píng)價(jià)其敏感性、特異性和精密度,并與real-time RT-PCR法和ELISA方法進(jìn)行92份SFTSV疑似病例血清檢測(cè)比較。結(jié)果本方法可在12 min內(nèi)完成檢測(cè),其cut-off值為0.16,可檢測(cè)1∶500稀釋度的SFTSV陽性血清,與漢坦病毒、HBV、HCV和類風(fēng)濕因子RF無交叉反應(yīng),CV <10%。采用本方法、real-time RT-PCR法和ELISA-IgM法檢測(cè)92例SFTSV疑似患者血清,其陽性率分別為57.61%、53.26%和29.35%,與ELISA法差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.01);以real-time RT-PCR法為標(biāo)準(zhǔn),熒光免疫層析方法檢測(cè)陰性符合率、陽性符合率分別為79.10%和89.79%,總符合率為84.78%,與ELISA法相比,其陽性符合率和總符...
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 標(biāo)本
1.2 儀器與試劑
1.3 方法
1.3.1 SFTSV總抗體檢測(cè)分析液制備
1.3.2 SFTSV總抗體檢測(cè)免疫層析試紙制備組裝
1.3.3 熒光免疫層析法檢測(cè)SFTSV血清樣本
1.3.4 cut-off值確定
1.3.5 靈敏度實(shí)驗(yàn)
1.3.6 特異性實(shí)驗(yàn)
1.3.7 精密度實(shí)驗(yàn)
1.3.8 ELISA法檢測(cè)疑似患者的SFTSV Ig M抗體
1.3.9 real-time RT-PCR法檢測(cè)SFTSV核酸
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 cut-off值確定
2.2 熒光免疫層析法和ELISA法檢測(cè)靈敏度比較
2.3 特異性試驗(yàn)
2.4 精密度實(shí)驗(yàn)
2.5 3種檢測(cè)方法對(duì)92份SFTSV疑似患者血清的檢測(cè)結(jié)果比較
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]實(shí)時(shí)RT-PCR與ELISA在發(fā)熱伴血小板減少綜合征檢測(cè)中的應(yīng)用[J]. 王麗,劉靚雯,馮兆雷,耿大影,苑廣盈. 中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 2015 (04)
[2]新布尼亞病毒核酸檢測(cè)實(shí)時(shí)熒光RT-PCR方法的評(píng)價(jià)[J]. 呂惠榮,楊云惠,杜燕華,黃學(xué)勇. 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2013(05)
[3]TaqMan探針實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)新布尼亞病毒L基因方法的建立與應(yīng)用[J]. 虞吉寅,王忠發(fā),任宜,毛彬. 疾病監(jiān)測(cè). 2013(02)
[4]實(shí)時(shí)熒光PCR法與ELISA法在發(fā)熱伴血小板減少綜合征病例檢測(cè)中的比較[J]. 杜燕華,黃學(xué)勇,王海峰,尤愛國(guó),康鍇,陳豪敏,許汴利. 中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2013(01)
[5]一種新布尼亞病毒快速檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[J]. 宋玉亮,葉繼斌,熊晨暉,劉慶輝,林萬寶,龍波,崔友福,葉鋒,王貴強(qiáng). 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2012 (02)
[6]新布尼亞病毒IgG抗體間接免疫熒光檢測(cè)方法的建立[J]. 黃學(xué)勇,杜燕華,李幸樂,馬宏,滿瑞琴,康鍇,唐曉燕,陳豪敏,劉國(guó)華,許汴利. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2012 (02)
[7]多功能靈敏固相時(shí)間分辨熒光免疫分析儀設(shè)計(jì)[J]. 宋克非,張佩杰. 儀器儀表學(xué)報(bào). 2011(11)
[8]發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒概述[J]. 李德新. 中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 2011 (02)
[9]基于免疫層析技術(shù)的時(shí)間分辨熒光免疫分析儀研究[J]. 任冰強(qiáng),黃立華,黃惠杰. 儀器儀表學(xué)報(bào). 2009(06)
本文編號(hào):3670023
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【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 標(biāo)本
1.2 儀器與試劑
1.3 方法
1.3.1 SFTSV總抗體檢測(cè)分析液制備
1.3.2 SFTSV總抗體檢測(cè)免疫層析試紙制備組裝
1.3.3 熒光免疫層析法檢測(cè)SFTSV血清樣本
1.3.4 cut-off值確定
1.3.5 靈敏度實(shí)驗(yàn)
1.3.6 特異性實(shí)驗(yàn)
1.3.7 精密度實(shí)驗(yàn)
1.3.8 ELISA法檢測(cè)疑似患者的SFTSV Ig M抗體
1.3.9 real-time RT-PCR法檢測(cè)SFTSV核酸
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 cut-off值確定
2.2 熒光免疫層析法和ELISA法檢測(cè)靈敏度比較
2.3 特異性試驗(yàn)
2.4 精密度實(shí)驗(yàn)
2.5 3種檢測(cè)方法對(duì)92份SFTSV疑似患者血清的檢測(cè)結(jié)果比較
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]新布尼亞病毒核酸檢測(cè)實(shí)時(shí)熒光RT-PCR方法的評(píng)價(jià)[J]. 呂惠榮,楊云惠,杜燕華,黃學(xué)勇. 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2013(05)
[3]TaqMan探針實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)新布尼亞病毒L基因方法的建立與應(yīng)用[J]. 虞吉寅,王忠發(fā),任宜,毛彬. 疾病監(jiān)測(cè). 2013(02)
[4]實(shí)時(shí)熒光PCR法與ELISA法在發(fā)熱伴血小板減少綜合征病例檢測(cè)中的比較[J]. 杜燕華,黃學(xué)勇,王海峰,尤愛國(guó),康鍇,陳豪敏,許汴利. 中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2013(01)
[5]一種新布尼亞病毒快速檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[J]. 宋玉亮,葉繼斌,熊晨暉,劉慶輝,林萬寶,龍波,崔友福,葉鋒,王貴強(qiáng). 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2012 (02)
[6]新布尼亞病毒IgG抗體間接免疫熒光檢測(cè)方法的建立[J]. 黃學(xué)勇,杜燕華,李幸樂,馬宏,滿瑞琴,康鍇,唐曉燕,陳豪敏,劉國(guó)華,許汴利. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2012 (02)
[7]多功能靈敏固相時(shí)間分辨熒光免疫分析儀設(shè)計(jì)[J]. 宋克非,張佩杰. 儀器儀表學(xué)報(bào). 2011(11)
[8]發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒概述[J]. 李德新. 中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 2011 (02)
[9]基于免疫層析技術(shù)的時(shí)間分辨熒光免疫分析儀研究[J]. 任冰強(qiáng),黃立華,黃惠杰. 儀器儀表學(xué)報(bào). 2009(06)
本文編號(hào):3670023
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