慢性感染性疾病以及惡性腫瘤嚴(yán)重威脅著當(dāng)今世界人類的健康。近年來雖然出現(xiàn)了眾多抗感染藥物,對腫瘤的發(fā)病機(jī)制也從細(xì)胞水平到分子水平有了更為深入的認(rèn)識,同時腫瘤靶向藥物和小分子抑制劑的應(yīng)用也取得了一定程度的臨床療效,然而在治療過程中仍然存在著各種需要改善的問題,如何提高慢性感染性疾病以及惡性腫瘤的臨床治療效果已經(jīng)成為亟待解決的重要問題之一。慢性乙型肝炎在世界范圍內(nèi),尤其在亞洲地區(qū),感染者數(shù)目仍然很多。目前治療慢性乙型肝炎的藥物主要分為干擾素和核苷或者核苷酸類似物等。然而在臨床治療過程中發(fā)現(xiàn),只有干擾素才能夠在部分乙肝患者中達(dá)到清除HBsAg及HBeAg的效果,其機(jī)理有很多,主要認(rèn)為可能是通過STAT1分子向下游傳遞信號,從而誘導(dǎo)干擾素刺激基因的表達(dá)。因此對于干擾素應(yīng)答與不應(yīng)答患者之間的免疫學(xué)機(jī)制研究,從而尋找能夠提高干擾素療效的策略,已經(jīng)成為關(guān)注的重要問題。T細(xì)胞與自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）對抗病毒感染等起著至關(guān)重要的促進(jìn)作用,但在慢性感染過程中,T細(xì)胞和NK細(xì)胞往往處于功能耗竭的狀態(tài)。細(xì)胞因子IL-2對多種免疫細(xì)胞有著活化與擴(kuò)增的作用,而且曾經(jīng)應(yīng)用于多種腫瘤的臨床治療。但是對于繼干擾素使用后... 

【文章頁數(shù)】：136 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
符號說明
第一章 緒論乙肝和肝癌治療研究現(xiàn)狀
    1.1 乙肝
        1.1.1 慢性乙型肝炎的診斷及其感染過程
        1.1.2 乙肝病毒特征
        1.1.3 乙型肝炎與STAT信號相關(guān)免疫應(yīng)答
        1.1.4 慢性HBV感染的治療
            1.1.4.1 核苷類似物的治療
            1.1.4.2 干擾素的治療
            1.1.4.3 核苷類似物及干擾素聯(lián)合治療
            1.1.4.4 肝炎其他治療策略及目前肝炎治療過程中存在的其他問題
        1.1.5 I型干擾素調(diào)控免疫細(xì)胞功能
        1.1.6. IL-2及其免疫治療
    1.2 肝癌
        1.2.1 肝癌的分類及診斷
        1.2.2 肝癌的流行病學(xué)及發(fā)生機(jī)制
        1.2.3 肝再生
        1.2.4 肝癌的治療
            1.2.4.1 手術(shù)
            1.2.4.2 肝移植
            1.2.4.3 介入放射
            1.2.4.4 肝癌的化學(xué)治療
            1.2.4.5 免疫治療
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 臨床標(biāo)本
        2.1.2 實驗動物
        2.1.3 原代細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑
        2.1.4 細(xì)胞系及培養(yǎng)基
        2.1.5 細(xì)菌培養(yǎng)及相關(guān)試劑
        2.1.6 質(zhì)粒及抽提試劑
        2.1.7 RNA體外轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒及相關(guān)試劑
        2.1.8 細(xì)胞因子及小分子抑制劑
        2.1.9 細(xì)胞分離和純化試劑
        2.1.10 總RNA提取和RT-PCR試劑
        2.1.11 核酸序列
        2.1.12 PCR試劑和核酸電泳試劑
        2.1.13 Western blotting試劑
        2.1.14 流式抗體
        2.1.15 免疫熒光及流式細(xì)胞術(shù)檢測相關(guān)試劑
        2.1.16 免疫組化及HE染色試劑
        2.1.17 細(xì)胞三維立體培養(yǎng)試劑
        2.1.18 抗原特異性T細(xì)胞檢測試劑
        2.1.19 ELISA檢測試劑
    2.2 實驗儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 臨床試驗
            2.3.1.1 臨床試驗Ⅰ
            2.3.1.2 臨床試驗Ⅱ
        2.3.2 人單個核細(xì)胞分離及CD8~+T細(xì)胞的純化
        2.3.3 人肝癌組織基因芯片數(shù)據(jù)分析
        2.3.4 細(xì)胞總RNA提取及RT-PCR檢測
        2.3.5 熒光定量PCR檢測
        2.3.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測
        2.3.7 小鼠血清采集
        2.3.8 放射免疫檢測
        2.3.9 免疫熒光實驗
        2.3.10 免疫組化、HE染色、Masson染色及天狼猩紅染色實驗
        2.3.11 抗原特異性CD8~+T細(xì)胞檢測
        2.3.12 ELISA檢測細(xì)胞因子
        2.3.13 RTCA檢測細(xì)胞殺傷
        2.3.14 Western blotting
        2.3.15 基因缺陷小鼠構(gòu)建
        2.3.16 小鼠原發(fā)肝癌模型構(gòu)建
        2.3.17 小鼠自發(fā)肝癌模型及移植瘤模型構(gòu)建
        2.3.18 小鼠HBV模型構(gòu)建
        2.3.19 小鼠肝癌手術(shù)切除
        2.3.20 小鼠肝癌模型治療
        2.3.21 小鼠肝炎模型治療
        2.3.22 小鼠組織單個核細(xì)胞的分離
        2.3.23 統(tǒng)計學(xué)分析
第三章 序貫IL-2治療有利于提高難治性無應(yīng)答乙肝患者的免疫功能
    3.1 引言
    3.2 Peg-IFN-α-2b治療后多數(shù)CHB患者呈現(xiàn)無應(yīng)答狀態(tài)
    3.3 Peg-IFN-α-2b治療后IL-2Rα在CD4~+T細(xì)胞表達(dá)顯著降低
    3.4 體外使用IL-2促進(jìn)外周T細(xì)胞和NK細(xì)胞表達(dá)IFN-γ及TNF-α
    3.5 體外使用IL-2促進(jìn)人肝臟淋巴細(xì)胞表達(dá)IFN-γ
    3.6 無應(yīng)答患者序貫使用IL-2治療可抑制負(fù)調(diào)免疫應(yīng)答
    3.7 無應(yīng)答患者序貫使用IL-2治療可促進(jìn)STAT1活化
    3.8 無應(yīng)答患者序貫使用IL-2治療可促進(jìn)分泌IFN-γ及TNF-α
    3.9 無應(yīng)答患者序貫使用IL-2治療可提高CD8~+T細(xì)胞毒性及抗原特異性CD8~+T細(xì)胞比例
    3.10 序貫使用IL-2治療可提高難治性無應(yīng)答患者臨床治療效果
    3.11 經(jīng)Peg-IFNα-2b治療后CHB患者外周血中CD24~+CD38~(hi)B細(xì)胞顯著增加
    3.12 Peg-IFNα可誘導(dǎo)CD24~+CD38~(hi) B細(xì)胞形成并產(chǎn)生大量IL-10
    3.13 CD24~+CD38~(hi)B細(xì)胞抑制T細(xì)胞及NK細(xì)胞抗病毒能力
    3.14 靶向CD24分子可清除CD24~+CD38~(hi)B細(xì)胞
    3.15 anti-CD24抗體聯(lián)合干擾素提高HBV耐受小鼠的治療效果
    3.16 討論與總結(jié)
第四章 肝切除通過IL-11-STAT3信號途經(jīng)促進(jìn)肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)
    4.1 引言
    4.2 手術(shù)后肝癌可復(fù)發(fā)
    4.3 手術(shù)誘導(dǎo)肝癌過度生長
    4.4 手術(shù)后IL-11水平升高
    4.5 IL-11信號對術(shù)后肝癌生長是必要的
    4.6 抑制IL-11信號可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡
    4.7 Napabucasin可抑制WT鼠肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)
    4.8 Napabucasin可抑制Il6~(KO)鼠肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)
    4.9 Napabucasin能夠抑制同種移植模型中肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)
    4.10 Napabucasin可防止IL-11誘導(dǎo)的肝癌過度生長
    4.11 討論與總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀博士學(xué)位期間的主要研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]42,573 cases of hepatectomy in China: a multicenter retrospective investigation[J]. Binhao Zhang,Bixiang Zhang,Zhiwei Zhang,Zhiyong Huang,Yifa Chen,Minshan Chen,Ping Bie,Baogang Peng,Liqun Wu,Zhiming Wang,Bo Li,Jia Fan,Lunxiu Qin,Ping Chen,Jingfeng Liu,Zhe Tang,Jun Niu,Xinmin Yin,Deyu Li,Songqing He,Bin Jiang,Yilei Mao,Weiping Zhou,Xiaoping Chen.  Science China（Life Sciences）. 2018(06)
[2]New advances in hepatocellular carcinoma[J]. Sonia Pascual,Iván Herrera,Javier Irurzun.  World Journal of Hepatology. 2016(09)



本文編號：3669967