目的通過(guò)反向遺傳學(xué)方法,探索白念珠菌F1Fo-ATP合酶α亞基編碼基因（ATP1）通過(guò)清除細(xì)胞內(nèi)活性氧以逃逸巨噬細(xì)胞殺傷的生理作用。方法以白念珠菌ATP1缺失株及其親本株為研究對(duì)象,接種平板培養(yǎng)后計(jì)算菌落數(shù)評(píng)估其體外細(xì)胞活性,通過(guò)尾靜脈接種小鼠后計(jì)算腎臟組織形成菌落數(shù)評(píng)估體內(nèi)細(xì)胞活性。將培養(yǎng)過(guò)夜的白念珠菌菌液與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)后,接種平板,計(jì)算菌落數(shù),測(cè)定菌的存活率,通過(guò)乳酸脫氫酶釋放法測(cè)定巨噬細(xì)胞乳酸脫氫酶水平;以過(guò)氧化氫建立模擬巨噬細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激模型,過(guò)氧化氫作用白念珠菌后,通過(guò)計(jì)算菌落數(shù)比較各菌株細(xì)胞活性,采用DCFH-DA染色測(cè)定細(xì)胞內(nèi)活性氧水平,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)過(guò)氧化氫酶1（CAT1）基因、超氧化物歧化酶4（SOD4）基因和超氧化物歧化酶5（SOD5）基因mRNA水平。采用雙因素方差分析或Studentt檢驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果在體外,親本株組和ATP1缺失組菌落數(shù)隨培養(yǎng)時(shí)間逐漸增多,24 h后ATP1缺失組菌落數(shù)僅為親本株組的10%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F = 481.84,P < 0.001）。在小鼠體內(nèi),親本株組腎臟組織形成菌落數(shù)隨時(shí)間逐漸增多,但是ATP... 

【文章來(lái)源】：中華皮膚科雜志. 2020,53(07)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)


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