目的通過反向遺傳學(xué)方法,探索白念珠菌F1Fo-ATP合酶α亞基編碼基因（ATP1）通過清除細(xì)胞內(nèi)活性氧以逃逸巨噬細(xì)胞殺傷的生理作用。方法以白念珠菌ATP1缺失株及其親本株為研究對象,接種平板培養(yǎng)后計算菌落數(shù)評估其體外細(xì)胞活性,通過尾靜脈接種小鼠后計算腎臟組織形成菌落數(shù)評估體內(nèi)細(xì)胞活性。將培養(yǎng)過夜的白念珠菌菌液與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)后,接種平板,計算菌落數(shù),測定菌的存活率,通過乳酸脫氫酶釋放法測定巨噬細(xì)胞乳酸脫氫酶水平;以過氧化氫建立模擬巨噬細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激模型,過氧化氫作用白念珠菌后,通過計算菌落數(shù)比較各菌株細(xì)胞活性,采用DCFH-DA染色測定細(xì)胞內(nèi)活性氧水平,實時熒光定量PCR檢測過氧化氫酶1（CAT1）基因、超氧化物歧化酶4（SOD4）基因和超氧化物歧化酶5（SOD5）基因mRNA水平。采用雙因素方差分析或Studentt檢驗對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果在體外,親本株組和ATP1缺失組菌落數(shù)隨培養(yǎng)時間逐漸增多,24 h后ATP1缺失組菌落數(shù)僅為親本株組的10%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F = 481.84,P < 0.001）。在小鼠體內(nèi),親本株組腎臟組織形成菌落數(shù)隨時間逐漸增多,但是ATP... 

【文章來源】：中華皮膚科雜志. 2020,53(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁


本文編號：3492111